癌化におけるテネイシンCとテネイシンXのクロストークの機構

腱蛋白C和腱蛋白X在致癌过程中的串扰机制

• 批准号: 10152258
• 负责人: 松本 健一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10152258/
• 关键词: 細胞外マトリックス; テネイシンファミリー; two-hybrid; VEGF

癌化における細胞外マトリックス・テネイシンX(TNX)とテネイシンC(TNC)のクロストークの機構を調べるために、TNXやTNCと相互作用する分子の探索を行った。1. マウスTNXに特異性の高い配列であるフィブロネクチン・タイプIII(FNIII)配列をbaitとして、酵母two-hybridの系を用いHeLa細胞由来CDNAライブラリーをスクリーニングしたところ、TNXのFNIII領域に結合する因子として血管内皮増殖因子(VEGF)のメンバーの一つであるVEGF-B186を同定した。その他、細胞膜レセプタータンパク質であるNa,K-ATPase beta-3 subunitを同定した。2. 一方マウスTNCに特異性の高い配列であるFNIII配列をbaitとして、同様のスクリーニングを行ったところ、TNCのFNIII領域に結合する分子としてbeta-2 microglobulinや精巣上体分泌タンパク質を同定した。3. これらのTNXやTNCと結合する分子の中で、特に癌悪性度などの関係で興味深いVEGF-B186とTNXとの相互作用についてさらに検討を行った。VEGF-B186のTNX・FNIIIとの結合には、VEGF-Bの二つのアイソフォーム(VEGF-B186とVEGF-B167)に共通の配列であるN末端から137aaが必要であることが明らかとなった。またTNXの、VEGF-B186との結合に必要な配列の決定を行ったところ、VEGF-B186に結合するのはbaitに用いたFNIII配列のところのみで、TNXの他の領域たとえばヘプタッド・リピート領域、フィブリノーゲン様領域にはVEGF-Bは結合しないことが明らかとなった。4. まだ現在のところ酵母two-hybridの系での確認のみであるが、VEGF-BはTNXのFNIII配列のみならずTNCのFNIII配列とも結合することが明らかとなった。

为了研究细胞外基质生腱蛋白-X (TNX) 和生腱蛋白-C (TNC) 在致癌过程中的串扰机制，我们寻找与 TNX 和 TNC 相互作用的分子。 1. 当使用酵母双杂交系统使用纤连蛋白 III 型 (FNIII) 序列（该序列是小鼠 TNX 的高度特异性序列）作为诱饵筛选 HeLa 细胞来源的 cDNA 文库时，发现 TNX 与我们确定了 TNX 的 FNIII 区域中的一个因子，即血管内皮生长因子 (VEGF) 的成员 VEGF-B186。此外，我们还鉴定了 Na,K-ATPase beta-3 亚基，它是一种细胞膜受体蛋白。 2. 另一方面，当我们使用对小鼠TNC具有高度特异性的FNIII序列作为诱饵进行类似的筛选时，我们鉴定出β-2微球蛋白和附睾分泌蛋白作为与TNC的FNIII区域结合的分子。 3. 在这些与 TNX 和 TNC 结合的分子中，我们进一步研究了 VEGF-B186 和 TNX 之间的相互作用，这与癌症恶性肿瘤的关系特别有趣。研究表明，VEGF-B186 与 TNX/FNIII 的结合需要 N 端的 137 个氨基酸，这是 VEGF-B 的两种亚型（VEGF-B186 和 VEGF-B167）共有的序列。此外，当我们确定与 VEGF-B186 结合所需的 TNX 序列时，我们发现只有用于诱饵的 FNIII 序列与 VEGF-B186 结合，而 TNX 的其他区域，如七肽重复区域，与 VEGF-B186 结合。 B186。据揭示，VEGF-B 不与纤维蛋白原样区域结合。 4. 虽然迄今为止仅在酵母双杂交系统中得到证实，但已经清楚VEGF-B不仅与TNX的FNIII序列结合，而且还与TNC的FNIII序列结合。