細胞(シングルセル)内液のダイレクト分離分析による特異的細胞情報の探索

通过细胞（单细胞）内液的直接分离分析寻找特定的细胞信息

基本信息

批准号：
08650962
负责人：
津田孝雄
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Nagoya Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞は複雑な生命体であり、様々な機能を持っている。これらの機能へのアプローチとして、一細胞の取り扱いと内液の分離分析を行い、細胞から直接的な情報を得ることを目的とする。細胞の表面は負の電荷をもっており、細胞を静電場に置くと細胞は自らの負電荷より電気移動度を得、陽極へ向かって泳動する。これを利用し(I)細胞を電気移動度によりキャピラリー管中へ導入し、(II)細胞膜をラプチャーさせる試薬を導入し、一細胞をキャピラリー管内でラプチャーさせて、その後(III)そのキャピラリー管を用いて一細胞内液の分離分析を行った。第一の目標として一細胞内液の分離分析に適合できる顕微鏡下でのミクロ分離分析システムの確立(ミクロな導入システム、電気化学的微少電極を用いる検知システム,ショートなカラム)した。システム自体は改良の余地はあるもののほぼ確立できた。第二の目標である細胞への適用については、神経芽細胞を用いてその内液中のカテコールアミン類について検討した。第三の目標としてヒト赤血球への適用の基礎実験を行った。細胞の取り扱いに電場を用いる工夫と、ミクロなシステムによるシングルセルの挙動(細胞一個の電気移動度や赤血球内のヘモグロビンの変化)、セル内液中の若干の成分分析が達成でき、細胞の情報として一個の細胞レベルから得た。

细胞是具有多种功能的复杂生物体。作为实现这些功能的一种方法，我们的目标是通过处理单个细胞并分离和分析其内部液体来从细胞中获取直接信息。电池的表面带有负电荷，当将电池置于静电场中时，它会从自身的负电荷中获得电迁移率并向阳极迁移。利用这一点，(I)利用电迁移率将细胞引入毛细管中，(II)引入引起细胞膜破裂的试剂，使毛细管内的一个细胞破裂，然后(III)将毛细管分离并使用该方法进行单细胞细胞内液的分析。第一个目标是建立一个能够适应单细胞分离分析的显微镜下微分离分析系统（微引入系统、使用电化学微电极的检测系统和短柱）细胞内液。虽然制度本身还有改进的空间，但已经基本建立了。关于应用于细胞的第二个目标，我们研究了神经母细胞内部液体中的儿茶酚胺。作为第三个目标，我们进行了应用于人类红细胞的基础实验。通过使用电场处理细胞，我们能够使用微系统分析单个细胞的行为（单个细胞的电迁移率、红细胞中血红蛋白的变化）以及细胞液中的一些成分，并且获取从单细胞水平获得的细胞信息。