Mutagenesis by Nucleoside Analogs and its Mechanism
核苷类似物的诱变及其机制
基本信息
- 批准号:08044291
- 负责人:
- 金额:$ 1.92万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for international Scientific Research
- 财政年份:1996
- 资助国家:日本
- 起止时间:1996 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
We have shown that deoxyribosyl dihydropyrimido [4,5-c] [1,2] oxazin-7-one (dP) is a potent mutagen in Escherichia coli and Salmonella typhimurium. In E.coli, this deoxycytidine analog induces both GC-to-AT and AT-to GC transitions. No induced transversions are observed. It is highly mutagenic in a wild-type E.coli, but this is much reduced in a strain lacking thymidine kinase. The mutagenesis induced by dP is efficiently inhibited by the addition of thymidine. Partially purified thymidine kinase from E.coli catalyzes the phosphorylation of dP to its 5'-monophosphate. When E.coli was grown in the presence of dP,the nucleoside analogue was incorporated into its DNA.The content of dP in DNA was dependent on the concentration of dP added to the medium. The incorporation characteristics of the 5'-triphosphate of dP (dPTP) were also studied using E.coli DNA polymerase I large fragment. The results confirm that this triphosphate can be incorporated opposite both A and G in the template with similar efficiencies. This indicates that dP is metabolized as a thymidine analogue and the resulting triphosphate induces a high rate of mutagensis through replicational errors with the error level quite high.N^4-Aminocytidine is a ptently mutagenic nucleoside analog, causing AT-to-GC and GC-to-AT transitions. This mutagenicity was enhanced by the presence of NiCl_2 in the assay on S.typhimurium and E.coli. We also found that N^4-aminocytidine and N^4-aminodeoxycytidine triphosphate can form a complex with Ni^<++>ion. Spectral changes of N^4-aminocytidene induced by Ni^<++> indicated that twe N^4-aminocytidene molecules can be complexed with one Ni^<++>ion. This complex formation may result in the inhibition of the enzymatic degradation of N^4-aminocytidine and/or in the enhancement of the error in DNA replication.
我们已经证明,脱氧核糖基二氢嘧啶基 [4,5-c] [1,2] 恶嗪-7-酮 (dP) 对大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌是一种有效的诱变剂。在大肠杆菌中,这种脱氧胞苷类似物可诱导 GC 至 AT 和 AT 至 GC 的转变。没有观察到诱发的颠换。它在野生型大肠杆菌中具有高度诱变性,但在缺乏胸苷激酶的菌株中,这种诱变性大大降低。添加胸苷可有效抑制 dP 诱导的诱变。从大肠杆菌中部分纯化的胸苷激酶可催化 dP 磷酸化为其 5'-单磷酸。当大肠杆菌在 dP 存在的情况下生长时,核苷类似物会掺入其 DNA 中。DNA 中 dP 的含量取决于添加到培养基中的 dP 浓度。还使用大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 大片段研究了 dP (dPTP) 5'-三磷酸的掺入特性。结果证实,这种三磷酸盐可以以相似的效率与模板中的 A 和 G 相对并入。这表明 dP 被代谢为胸苷类似物,产生的三磷酸通过复制错误诱导高比率的诱变,错误水平相当高。N^4-氨基胞苷是一种潜在诱变核苷类似物,导致 AT-to-GC 和 GC - 到 - AT 转换。在鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌的测定中,NiCl_2 的存在增强了这种致突变性。我们还发现N^4-氨基胞苷和N^4-氨基脱氧胞苷三磷酸可以与Ni^++离子形成络合物。 Ni^++诱导的N^4-氨基胞苷的光谱变化表明两个N^4-氨基胞苷分子可以与一个Ni^++离子络合。这种复合物的形成可能导致抑制N^4-氨基胞苷的酶促降解和/或增加DNA复制中的错误。
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
K.Negishi他: "Enhancement of N^4-aminocytidine-induced mutagenesis by Ni^<++>ion" Nucleic Acids Symposium Series. No.35. 137-138 (1996)
K.Negishi等人:“Ni^++离子增强N^4-氨基胞苷诱导的诱变”核酸研讨会系列第35期(1996)。
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K.Negishi他: "The mechanism of mutagenesis induced by a hydrogen bond ambivalent nucleoside analogue,P-deoxynucleoside in Escherichia coli" Nucleic Acids Research. in press (1997)
K. Negishi 等人:“大肠杆菌中氢键二价核苷类似物 P-脱氧核苷诱导的诱变机制”,《核酸研究》,出版 (1997)。
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V.N.Noskov他: "HAM1,the gene controlling 6-N-hydroxylaminopurine sensitivity and mutagenesis in the Saccharomyces cerevisiae" Yeast. 12. 17-29 (1996)
V.N.Noskov 等人:“HAM1,酿酒酵母中控制 6-N-羟氨基嘌呤敏感性和诱变的基因”酵母。
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- 作者:
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H.Hayatsu他: "Polynucleotide-chitosan complex : preparation properties and applications" Nucleic Acids Symposium Series. No.35. 253-254 (1996)
H. Hayatsu 等人:“多核苷酸-壳聚糖复合物:制备特性和应用”核酸研讨会系列第 35 期(1996 年)。
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K.Negishi et al.: "Enhancement of N^4-aminocytidine-induced mutagenesis by Ni^<++>ion" Nucleic Acids Symposium Series. 35. 137-138 (1996)
K.Negishi 等人:“Enhancement of N^4-aminocytidine-induced mutagenesis by Ni^< >ion”核酸研讨会系列。
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