副腎髄質からのカテコールアミン分泌におけるアセチールコリン受容体機構の動物種差

肾上腺髓质分泌儿茶酚胺乙酰胆碱受体机制的物种差异

基本信息

批准号：
07760286
负责人：
寺岡宏樹
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Rakuno Gakuen University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

副腎髄クロム親和性細胞からのカテコールアミン(CA)分泌を介在するアセチールコリン(ACh)受容体タイプには動物種差がある。本研究はこの種差の生理的意義について、ウシとニワトリの受容体機構を比較することにより検討することを企図し、以下の成績を得た。1.ニワトリ副腎クロム親和性細胞における機能的ニコチン受容体の存在ニワトリ副腎分離細胞において、ニコチンは濃度依存性(10^<-7>-10^<-4>M)にCA分泌および細胞内Ca^<2+>濃度(Cai)の上昇を起こした。両反応はヘキサメトニウム(C6)により濃度依存性(10^<-7>-10^<-3>M)に抑制された。またAChの反応はC6により半減し、アトロピンとの併用により消失した。さらに、^3H-a-bungarotoxinを用いた結合実験から、C6感受性の高親和性結合が観察された。これらは、ニワトリ副腎に機能的なNic受容体が存在する薬理学的な証拠であり、ニワトリ副腎ではMus受容体刺激のみがCA分泌を惹起するという従来の報告を覆すものである。2.ニワトリおよびウシ副腎クロム親和性細胞におけるCA分泌、Cai反応、受容体結合能の比較ニワトリ副腎においてメサコリン(10^<-7>-10^<-3>M)は他のMusアゴニストと同様に濃度依存性にCA分泌を起こしたが、ウシ副腎では殆ど影響しなかった。プロテインキナーゼ阻害薬のスタウロスポリン(10^<-9>-10^<-6>M)はすべてのAChアゴニストの効果を抑制したが、ニワトリにおけるMus受容体刺激に対して非常に強い抑制を示した。細胞外Ca^<2+>除去や細胞内Ca^<2+>キレートは両動物種ともNic, Musアゴニストの効果を殆ど消失させた。一方、メサコリンはニコチンと異なり潜時の長い持続性のCai上昇を両動物種で起こしたが、ウシの反応の大きさはニワトリの約1/5であった。両動物とも、外液Ca^<2+>除去はニコチンのCai上昇を消失させたが、メサコリンおよびカフェイン反応は残存した。従って、2種の受容体刺激によるCa^<2+>の動員経路は定性的に両動物で共通であった。両動物とも^3H-QNBによる高親和性結合部位が存在したが、顕著な性質の違いは認められなかった。以上の成績は、副腎が器官として独立している動物種を通して、Nic受容体はCA分泌を介在する主要な受容体であることを示唆する。また、ウシ副腎のMus受容体刺激はCai動員を起こす内部効力が弱く、これがMus受容体刺激がCA分泌に結びつかない原因の一つと考えられる。今回、Mus受容体刺激によるCA分泌機構に蛋白質リン酸化が比較的強く関与する可能性が示唆されたが、これはラットでの報告と全く異なるものであり、ウシのMus受容体機構によるリン酸化の程度を今後検討するべきであると思われた。

介导肾上腺髓质嗜铬细胞分泌儿茶酚胺 (CA) 的乙酰胆碱 (ACh) 受体类型存在动物物种差异。本研究旨在通过比较牛和鸡的受体机制来探讨这种物种差异的生理意义，并获得以下结果。 1.鸡肾上腺嗜铬细胞中功能性烟碱受体的存在在分离的鸡肾上腺细胞中，尼古丁诱导浓度依赖性(10^-7>-10^-4M)CA分泌和细胞内Ca分泌。 > 导致浓度 (Cai) 增加。两个反应均被六甲铵(C6)以浓度依赖性方式(10^-7-10^-3M)抑制。此外，ACh 反应被 C6 减半，并通过与阿托品共同给药而消失。此外，在与3H-α-银环蛇毒素的结合实验中观察到C6敏感的高亲和力结合。这些发现为鸡肾上腺中存在功能性Nic受体提供了药理学证据，并推翻了之前的报道，即只有Mus受体刺激才能诱导鸡肾上腺中CA分泌。 2.鸡和牛肾上腺嗜铬细胞中CA分泌、Cai反应和受体结合能力的比较乙酰甲胆碱(10^<-7>-10^<-3>M)与鸡肾上腺中的其他Mus激动剂相似，引起CA分泌呈浓度依赖性，但对牛肾上腺影响不大。蛋白激酶抑制剂星形孢菌素(10^-9>-10^-6M)抑制所有ACh激动剂的作用，但对鸡中的Mus受体刺激显示出非常强的抑制作用。细胞外Ca ^ 2+ 去除和细胞内Ca ^ 2+ 螯合几乎消除了两种动物物种中Nic和Mus激动剂的作用。另一方面，与尼古丁不同，乙酰甲胆碱会导致两种动物体内的蔡（Cai）长期持续增加，但牛的反应幅度约为鸡的五分之一。在两只动物中，去除外部液体Ca 2+ 消除了尼古丁Cai升高，但乙酰甲胆碱和咖啡因反应仍然存在。因此，通过刺激两种类型的受体诱导的Ca 2+ 动员途径在两种动物中本质上是共同的。尽管两种动物中都存在^3H-QNB的高亲和力结合位点，但没有观察到性质上的显着差异。这些结果表明，Nic受体是在肾上腺为独立器官的动物物种中介导CA分泌的主要受体。此外，刺激牛肾上腺中的Mus受体具有较弱的诱导Cai募集的内在效力，这被认为是刺激Mus受体不导致CA分泌的原因之一。这次，有人提出，蛋白质磷酸化可能相对强烈地参与了Mus受体刺激所刺激的CA分泌机制，但这与大鼠中的报告完全不同，并且似乎暗示了牛中Mus受体机制的磷酸化。有必要考虑未来这种情况的严重程度。