ヤマメのサケ型生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン(sGnRH)遺伝子の発現調節機構

野生鳟鱼鲑鱼型促性腺激素释放激素（sGnRH）基因表达的调控

• 批准号: 07740631
• 负责人: 安東 宏徳
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740631/
• 关键词: 生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン; sGnRH; 遺伝子発現; サクラマス; 繁殖行動

サケ型生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン(sGnRH)は、サケ科魚類において性成熟を調節するもっとも上位の制御因子である。また、繁殖行動の一つとして考えられるサケの母川回帰行動の発現の制御にも関わっていると考えられる。sGnRHをコードする遺伝子の発現調節機構を解析することによって、動物の本能行動の一つである繁殖行動の発現の分子機構を明らかにすることができるのではないかという考えのもとに、ヤマメを材料として、次の二つの目標を立てて解析を行った:1.ヤマメのsGnRH遺伝子の構造解析、2.sGnRH遺伝子の発現の制御に関わる環境要因の解析。7年度の研究成果として、この2つの目標に対応して、以下のような研究結果が得られた。1.ヤマメの遺伝子ライブラリーから、二種類のsGnRH遺伝子(sGnRH-I、-II)をクローニングし、5′上流領域を含む、それぞれ4.8と4.5kbの領域の配列を決定した。sGnRH-IとIIは、他の動物のGnRH遺伝子と共通のエクソン、イントロン構造を持っていた。IとIIの間で比較した結果、コード領域は相同性が高いのに対して、5′上流領域は相同性が低く、それぞれ複数のパリンドローム配列が存在していた。これらの結果は、IとIIで発現制御機構が異なることを示していると考えられ、今後、発現制御に関わるパリンドローム配列の機能を解析していきたい。2.自然状態におけるヤマメの成長、性成熟にともなったsGnRH遺伝子の発現量の変化を解析するために、北海道立水産孵化場の協力を得て、稚魚から成熟にいたる各ステージのヤマメの脳、血液などを経時的に計16回にわたって採集した。今後、RT-PCR法、あるいはin situハイブリダイゼーション法を用いてsGnRHのmRNAの定量的解析を行いたいと考えている。

鲑鱼促性腺激素释放激素（sGnRH）是鲑鱼性成熟最重要的调节剂。它还被认为参与控制鲑鱼返回家乡河流的表达，这被认为是繁殖行为之一。基于通过分析sGnRH编码基因的表达调控机制，我们或许能够阐明动物本能行为之一的生殖行为表达的分子机制，以此为材料。进行了以下两个目标的分析：1.野豆中sGnRH基因的结构分析，2.参与调节sGnRH基因表达的环境因素分析。作为第7年的研究成果，针对这两个目标，获得了以下研究成果。 1.从野豆基因文库中克隆了两种sGnRH基因(sGnRH-I和-II)，并分别测定了包括5'上游区域在内的4.8和4.5 kb区域的序列。 sGnRH-I和sGnRH-II与其他动物的GnRH基因具有共同的外显子和内含子结构。比较Ⅰ和Ⅱ发现，编码区同源性较高，但5'上游区同源性较低，各区存在多个回文序列。这些结果似乎表明I和II之间的表达控制机制是不同的，我们希望将来分析参与表达控制的回文序列的功能。 2. 为了分析山目鳟鱼在自然条件下生长和性成熟过程中sGnRH基因表达水平的变化，我们与北海道水产孵化场合作，获取了山目鳟鱼从鱼苗到成熟各个阶段的大脑。随着时间的推移，其他样本被采集了 16 次。未来，我们希望使用RT-PCR或原位杂交对sGnRH mRNA进行定量分析。