O-結合型糖鎖合成に関与するシアル酸転移酵素遺伝子郡の発現解析

参与O-连接糖链合成的唾液酸转移酶基因的表达分析

基本信息

批准号：
07780613
负责人：
黒澤信幸
金额：
$ 0.58万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780613/
关键词：
シアル酸転移酵素ゲノム構造解析

项目摘要

報告者らによりクローニングされた2種類のニワトリシアル酸転移酵素(ST6GalNAcII及びST6GalNAcI)の塩基配列を基に、マウスホモログcDNAをクローニングした。更にこれらをプローブとしてコスミドライブラリーをスクリーニングし、両遺伝子のゲノムクローンを得た。ST6GalNAcII遺伝子は、弱いmRNAの発現がほぼ全ての臓器で認められ、また精巣、乳腺では強いmRNAの発現が認められた。本遺伝子のゲノム構造を解析した結果、ST6GalNAcII遺伝子は8つのエクソンよりなる、ゲノムサイズ約25kbの遺伝子であることが明かとなった。本遺伝子のプロモーター領域には、SP1,AP-2,ATFの結合部位が存在した。ルシフェラーゼをレポーター遺伝子として用いたプロモーター解析の結果、本遺伝子は転写開始点上流200bp内に存在するSP1結合部位が転写活性に重要であることが明らかになった。またAP-2,ATF結合部位を含む領域は転写増強作用のあることが明らかになった。ST6GalNAcI遺伝子は、非常に弱いmRNAの発現がほぼ全ての臓器で認められた。本遺伝子のゲノム構造を解析した結果、ST6GalNAcI遺伝子は8つのエクソンよりなる、ゲノムサイズ約12kbの遺伝子であることが明かとなった。興味深いことに、ST6GalNAcI及びST6GalNAcII両遺伝子のゲノム構造は非常に類似していた。本遺伝子のプロモーター領域には、Myc,Etsの結合部位が存在した。現在ヒト並びにニワトリ遺伝子のプロモーター領域のクローニングを終了し、ルシフェラーゼをレポーター遺伝子として用いたプロモーター解析を行っている。

基于记者克隆的两种类型的肾上腺酸性囊泡（ST6GALNACII和ST6GALNACI）的基本序列克隆小鼠同源cDNA。此外，我们将COSMI驱动器库筛选为探针，并获得了两个基因的基因组克隆。几乎所有具有弱mRNA表达的器官都识别了ST6Galnacii基因，睾丸和乳腺是强烈的mRNA。由于分析了基因的基因组结构，ST6Galnacii基因是一个约25kb的基因组大小的基因，它超过八个exonson。在该基因的启动子区域，有一个SP1，AP-2和ATF的连接位点。使用荧光素酶作为报告基因的启动子分析表明，该基因对于传递起点上游上游上游200 bp中的SP1结合位点中的转录活性很重要。还揭示了包含AP-2和ATF加入站点的区域具有转移增强效果。几乎所有器官表达了非常弱的mRNA，ST6GALNACI基因都被识别。由于分析了该基因的基因组结构，ST6GALNACI基因是八个以上的exonson，这是一个约12KB的基因组大小。有趣的是，ST6GALNACI和ST6GALNACII双基因的基因组结构非常相似。在该基因的启动子区域，MYC和ETS之间有一个连接位点。目前，停用了人类和鸡基因的启动子区域的克隆，并使用荧光素酶作为记者基因进行了启动子分析。