レトロウイルス感染による自己免疫疾患誘導の機構解明

阐明逆转录病毒感染诱发自身免疫性疾病的机制

基本信息

批准号：
06770238
负责人：
善本隆之
金额：
$ 0.58万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770238/
关键词：
マウス乳癌ウイルススーパー抗原実験的アレルギー性脳炎

项目摘要

まず、最近私達がクローニングした外来性マウス乳癌ウイルスのスーパー抗原MMTV(FM)のT細胞レセプターTCR Vβの特異性についてBALB/cマウスを用いて検討した。このウイルスをBALB/cマウスのFootpadに皮下投与すると、Vβ8.2^+ CD4^+ T細胞の割合が4-6日をピークに増大することがFACS及びRT-PCRにより明かになった。他のVβの割合の変化はほとんど見られなかった。また、ミルクを介した新生児期の感染によっては、Vβ8.2^+ CD4^+ T細胞のみならずVβ2^+,6^+,8.1^+,8.3^+,14^+ CD4^+ T細胞の割合が程度の差はあるが減少した。以上の結果よりこのスーパー抗原は、比較的広範なT細胞レパトアに反応性を有することが明かとなった。次に、EAEの発症実験に用いる(PL/JxSJL)F1マウスのFootpadにこのウイルスを皮下投与すると、投与5日後にはBALB/cマウスと同様にVβ8.2^+ CD4^+ T細胞の割合の著名な増大が観察された。他のVβの割合の増加はほとんど見られなかった。これらの結果より、このウイルスの投与によりEAE発症に関与するVβ8.2^+ CD4^+ T細胞を選択的に活性化できる可能性が示唆された。そこで、塩基性ミエリン蛋白質の抗原ペプタイド(Ac1-11)を合成し、(PL/JxSJL)F1マウスに感作しEAE発症の動物実験系の確立を試みた。その結果約63%(雄約100%、雌約31%)の確率でEAEを発症させることが可能となった。まず既報(Nature365,642-644,1993)通り、EAEが発症寛解したマウスに細菌性スーパー抗原SEBを投与しEAEの誘発を試みたところ、EAEを誘発できなかった。次にウイルスを投与したが、やはりEAEを誘発できなかった。論文通りSEBによりEAEを誘発できなかった理由は不明である。そこで現在、当初の目的とは異なるが逆にこのウイルス感染によるVβ8.2^+ CD4^+ T細胞の除去によるEAE発症の阻害を目的に、ミルクを介した新生児期感染(PL/JxSJL)F1マウスを作成しEAE発症への影響について検討を試みている。

首先，我们使用 BALB/c 小鼠研究了我们最近克隆的外源性鼠乳腺肿瘤病毒超抗原 MMTV (FM) 的 T 细胞受体 TCR Vβ 的特异性。当将该病毒皮下注射到 BALB/c 小鼠的足垫时，FACS 和 RT-PCR 显示 Vβ8.2^+ CD4^+ T 细胞的百分比增加，并在 4-6 天时达到峰值。其他 Vβ 的比例几乎没有观察到变化。此外，根据新生儿期通过乳汁的感染，不仅有Vβ8.2^+ CD4^+ T细胞，还有Vβ2^+,6^+,8.1^+,8.3^+,14^+ CD4^+ T细胞细胞残疾人比例均有不同程度下降。上述结果表明，这种超级抗原在相对广泛的 T 细胞库中具有反应活性。接下来，当将该病毒皮下注射至用于EAE发病实验的(PL/JxSJL)F1小鼠的足垫时，给药后5天，Vβ8.2^+CD4^+T细胞的比例与BALB/中相同。 c 小鼠显着增加。观察到其他 Vβ 的比例几乎没有增加。这些结果表明，施用该病毒可以选择性地激活参与 EAE 发展的 Vβ8.2^+ CD4^+ T 细胞。因此，我们合成了碱性髓磷脂蛋白抗原肽（Ac1-11）并将其致敏于（PL/JxSJL）F1小鼠，试图建立发生EAE的动物实验体系。结果，发生EAE的可能性约为63%（男性约为100%，女性约为31%）。首先，如之前报道的（Nature 365, 642-644, 1993），我们尝试通过给EAE已经缓解的小鼠施用细菌超抗原SEB来诱导EAE，但我们无法诱导EAE。接下来，注射了病毒，但仍然未能诱发 EAE。目前还不清楚为什么 SEB 不能如论文中所述诱导 EAE。因此，尽管与最初的目的不同，我们目前正在尝试通过消除这种病毒感染引起的Vβ8.2^+ CD4^+ T细胞来抑制EAE的发展，我们正在尝试创建小鼠并检查对发病的影响。的 EAE。