蛋白質の動的構造解析を目指した結晶内反応追跡システムの開発
开发用于蛋白质动态结构分析的晶内反应跟踪系统
基本信息
- 批准号:06780546
- 负责人:
- 金额:$ 0.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本申請では時間分割X線回析データ測定用に結晶内反応を可視吸収スペクトルによりモニターするシステムを開発し、X線回析データ収集とはオフラインの実態で結晶内反応の追跡を行うことを目的として研究開発を進めた。我々の研究グループでは、以前からミオグロビンなどのヘム蛋白質を試料に用いて溶液条件におけるマイクロ秒からミリ秒領域での光化学反応について検討を行なっており、時間分割可視紫外過渡吸収スペクトル測定および解析システムを完備している。したがって本申請課題において必要な装置の一部については現有装置を流用した。しかし結晶実態でのスペクトル変化を測定するために何ケ所かの改造を行なった。まず通常用いられる単純な球面レンズの組み合わせで光学系を構成すると、色収差が比較的大きく定量的なスペクトルを測定することが出来ない。そこで本申請では色収差の少ない光学系を実現するために、現有の落射蛍光型顕微鏡を蛋白質結晶の可視吸収スペクトル測定装置として改造を行った。顕微鏡の光学系は色収差の小さいアクロマートレンズで構成されており色収差を少なくするという目的に適している。また、結晶の大きさは1辺が100〜500ミクロン程度でありモニター光を結晶に正確にアライメントすることが難しいという問題点を克服しなければならなかった。この点については顕微鏡を目視しながら結晶の位置合わせをすることにより光軸のアライメントを比較的容易に行うことが可能となった。スペクトル測定部については観測光源から発して結晶を透過した光を、顕微鏡のサイドポートから取り出して光ファイバーを通して分光器に導入し、スペクトル測定解析を行うシステムに改造した。以上の改造に必要な光学部品の購入費として消耗品費を充当した。
在此应用程序中,我们开发了一种系统,用于使用可见的吸收光谱监测晶体内反应,以进行时间花费时间,以进行X射线衍射数据测量结果,并进行了研发,目的是在X射线衍射数据收集的离线状态下跟踪晶体内反应。我们的研究小组先前使用血红素蛋白(例如肌红蛋白作为样品)在溶液条件下研究了微秒至毫秒范围内的光化学反应,并具有时间分布的视觉紫外线瞬态吸收光谱测量和分析系统。因此,现有设备已重复使用本应用所需的某些设备。但是,进行了几种修改以测量晶体状态的光谱变化。首先,当使用通常使用的简单球形透镜的组合构建光学系统时,很难用相对较大的色差测量定量光谱。因此,在此应用中,为了实现几乎没有色差的光学系统,现有的落荧光显微镜被修改为用于测量蛋白质晶体可见吸收光谱的装置。显微镜的光学系统由具有较小色差的儿童镜片组成,适合减少色差。此外,晶体的大小在每一侧约为100至500微米,因此很难将监视器的光与晶体准确对齐。在这方面,通过在视觉检查显微镜时对齐晶体,可以对光轴进行相对容易的对齐。光谱测量部分通过从显微镜侧端口的观测光源中提取光线并通过光纤引入光源来转换为进行光谱测量分析的系统。消耗品用于购买上述修改所需的光学零件。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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