遺伝性腎基底膜疾患に関するIV型コラーゲンの分子生物学的研究

IV型胶原与遗传性肾基底膜疾病相关的分子生物学研究

基本信息

批准号：
06770869
负责人：
大橋俊孝
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770869/
关键词：
IV型コラーゲン遺伝性腎糸球体基底膜疾患

项目摘要

申請者は本研究の申請時の目的として、1)α6(IV)鎖,α4(IV)鎖遺伝子構造の決定2)遺伝性腎糸球体基底膜疾患の遺伝子変異の検索を掲げた。その結果、1)α6(IV)鎖全遺伝子を含む重複クローンを単離し、全遺伝子構造を決定した(文献2,3参照)。さらに、その中の最上流の遺伝子断片の解析により、α6(IV)鎖遺伝子(COL4A6)とα5(IV)鎖遺伝子(COL4A5)はbidirectional promoterにより転写制御され、COL4A6はAlternativeなpromoterによって発現制御されることを初めて報告した(文献1参照)。この結果は、従来知られていたα1(IV)鎖遺伝子(COL4A1)とα2(IV)鎖遺伝子(COL4A2)と同様にその他α(IV)鎖遺伝子でもbidirectional promoterにより転写制御されていることを初めて示したものである。また、Alternativeなpromoterの存在はCOL4A6の組織特異的発現に関与すると推測される。2) 1)の結果をもとに、まずα6(IV)鎖遺伝子およびα5(IV)鎖遺伝子の関与する遺伝性疾患の家系解析に有用なマーカーとして(CA)nマーカーを検索した。1)で単離したCOL4A6断片から(CA)n配列を発見し、3つがマーカーとして有効であると判断された(投稿準備中)。また、疾患検索の準備としてPCR-SSCP実験を行なうため、全エキソンをはさむようにプライマーを設計した。これらは遺伝性腎糸球体基底膜疾患のみならず、最近関連性が示唆されたびまん性平滑筋腫の責任遺伝子としてのα6(IV)鎖遺伝子の変異の検索に有効であると思われる。

申请人已在1）α6（iv）链中搜索寻找遗传突变的α4（iv）链遗传结构，作为应用这项研究的目的2）。结果，将包含1）α6（iv）链的重复克隆掉了所有基因以确定整个基因结构（参见文献2,3）。此外，通过分析顶部基因片段，α6（iv）链基因（COL4A6）和α5（IV）链基因（COL4A5）首次向电流启动子传递（请参阅文献1。）。与常规的已知α1（IV）链基因（COL4A1）和α2（IV）链基因（COL4A2）一样，此结果是第一个在其他α（IV）链基因中被双向启动子转录的结果。还假定替代启动子的存在与Col4a6的特定表达有关。基于1）的结果，基于1）的结果，搜索了α6（iv）链基因和α5（iv）链，以搜索（CA）N标记，作为涉及遗传性疾病的家庭分析的有用标记。（在1中分离的Col4a6片段）（CA）N序列，并确定三个是有效的标记（准备发布）。此外，设计底漆是为了进行PCR-SSCP实验，以准备疾病搜索。这些被认为有效地搜索遗传性肾细胞下源性下属，而且还可以作为α6（iv）链物质突变作为最近相关性的负责遗传基因。