S.mutansの蛋白質抗原におけるT細胞エピトープおよびアグレトープの解析

变形链球菌蛋白抗原中T细胞表位和聚集位的分析

基本信息

批准号：
05771537
负责人：
泉福英信
金额：
$ 0.58万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771537/
关键词：
ペプチドワクチン免疫 S.mutans アグレトープ T細胞エピトープう蝕 T細胞

项目摘要

う蝕発症に重要に関わるS.mutansの菌体表層蛋白質抗原(PAc)は、う蝕用ワクチンの候補として注目されている。そこで申請者は、このPAcを用いてより最小単位で免疫原性の強く安全性の高いうう蝕用ワクチンを開発することを目的とし実験を行った。 PAc遺伝子工学的手法を用いて7つに分割しその断片中に存在するT細胞エピトープの解析を行なった。その結果アラニンの豊富な繰り返し領域を含むPAc-2フラグメントに、多数のT細胞エピトープが存在していることが認められた。アラニンの豊富な繰り返し領域はう蝕発症の起点となるS.mutansの歯への付着に関わっているという他のグループによる報告もあることから、この領域をカバーするアミノ酸残基4個をオーバーラップしたアミノ酸残基19個のペプチドを合成し、その合成ペプチドに存在するT細胞エピトープの検討を行なった。 PAcの自然抗体を有する被験者由来の末梢血単核細胞と合成ペプチドを用いてT細胞の増殖実験を行なうと、PAc(アミノ酸残基番号,196-214),PAc(211-229),PAc(241-259),PAc(301-319),PAc(407-425)の5つのペプチドにおいてT細胞の増殖活性が認められた。 5つのペプチドのアミノ酸配列の共通性を検討すると、Y-AKL--YQ、NAAN-A-YQ、NA-AKAAY--AVAAN の3つの共通アミノ認められた。よって合成ペプチドにはこの共通アミノ酸配列を含んだT細胞エピトープが存在していることが示唆された。また同時にこの共通アミノ酸配列を含むアグレトープも存在していることが示唆された。このようなT細胞エピトープとアグレトープおよび申請者より解析中であるB細胞エピトープを含めてアミノ酸配列を設計することにより、目的としたより最小単位で免疫原性の高く安全性の高いう蝕用ワクチンを開発することができる。今後より詳細な検討のために、この共通アミノ酸配列を含んだペプチドを合成し、T細胞エピトープとアグレトープの解析を行う予定である。

对龋齿发育很重要的S. utans的表面蛋白抗原（PAC）吸引了作为龋齿疫苗的候选者的注意。因此，申请人进行了一个实验，目的是使用该PAC开发更小的单位，高度免疫原性和高度安全的龋齿疫苗。使用PAC基因工程，将T细胞表位分为七个部分，并在片段中进行分析。结果，观察到PAC-2片段中有许多T细胞表位，其中包含富含丙氨酸的重复区域。其他小组报告说，富含丙氨酸的重复区域参与了龋齿的链球菌的附着，这是龋齿的起源，因此我们合成了肽的肽，其中19个氨基酸残基重叠了覆盖该区域的四个氨基酸残基，并检查了合成肽中存在的T细胞表位。当使用携带天然PAC抗体的受试者的外周血单核细胞和合成肽进行T细胞增殖实验时，在五种肽中观察到T细胞增殖活性：PAC（氨基酸残基号，196-214），PAC（211-229），Pac（211-229），Pac（241-259），Pac（241-259），Pac（301-31-31-31-4），和44.-45-4（301-31）。在检查五个肽的氨基酸序列的共识时，发现了三个常见的氨基氨基菌：y-akl - yq，naan-a-yq和na-akaay-avaan。因此，建议在合成肽中有一个T细胞表位，其中包含这种常见的氨基酸序列。还提出了一个包含这种常见氨基酸序列的aggretop。通过设计包括申请人分析的T细胞表位和Aggretopes和B细胞表位的氨基酸序列，可以在最小的单位中开发高度免疫原性和安全的Caries疫苗。为了进行进一步的详细研究，我们计划合成一个含有这种常见氨基酸序列的肽并分析T细胞表位和脂肪。