S.mutansの蛋白質抗原におけるT細胞エピトープおよびアグレトープの解析

变形链球菌蛋白抗原中T细胞表位和聚集位的分析

基本信息

批准号：
05771537
负责人：
泉福英信
金额：
$ 0.58万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771537/
关键词：
ペプチドワクチン免疫 S.mutans アグレトープ T細胞エピトープう蝕 T細胞

项目摘要

う蝕発症に重要に関わるS.mutansの菌体表層蛋白質抗原(PAc)は、う蝕用ワクチンの候補として注目されている。そこで申請者は、このPAcを用いてより最小単位で免疫原性の強く安全性の高いうう蝕用ワクチンを開発することを目的とし実験を行った。 PAc遺伝子工学的手法を用いて7つに分割しその断片中に存在するT細胞エピトープの解析を行なった。その結果アラニンの豊富な繰り返し領域を含むPAc-2フラグメントに、多数のT細胞エピトープが存在していることが認められた。アラニンの豊富な繰り返し領域はう蝕発症の起点となるS.mutansの歯への付着に関わっているという他のグループによる報告もあることから、この領域をカバーするアミノ酸残基4個をオーバーラップしたアミノ酸残基19個のペプチドを合成し、その合成ペプチドに存在するT細胞エピトープの検討を行なった。 PAcの自然抗体を有する被験者由来の末梢血単核細胞と合成ペプチドを用いてT細胞の増殖実験を行なうと、PAc(アミノ酸残基番号,196-214),PAc(211-229),PAc(241-259),PAc(301-319),PAc(407-425)の5つのペプチドにおいてT細胞の増殖活性が認められた。 5つのペプチドのアミノ酸配列の共通性を検討すると、Y-AKL--YQ、NAAN-A-YQ、NA-AKAAY--AVAAN の3つの共通アミノ認められた。よって合成ペプチドにはこの共通アミノ酸配列を含んだT細胞エピトープが存在していることが示唆された。また同時にこの共通アミノ酸配列を含むアグレトープも存在していることが示唆された。このようなT細胞エピトープとアグレトープおよび申請者より解析中であるB細胞エピトープを含めてアミノ酸配列を設計することにより、目的としたより最小単位で免疫原性の高く安全性の高いう蝕用ワクチンを開発することができる。今後より詳細な検討のために、この共通アミノ酸配列を含んだペプチドを合成し、T細胞エピトープとアグレトープの解析を行う予定である。

变形链球菌的细菌表面蛋白抗原（PAc）在龋齿发展中发挥着重要作用，作为龋齿疫苗的候选者而受到关注。因此，申请人使用该PAc进行了实验，目的是开发一种在较小单位内具有高免疫原性和高安全性的龋齿疫苗。利用基因工程技术将PAc分成七个部分，并对片段中存在的T细胞表位进行分析。结果发现，含有富含丙氨酸重复区域的PAc-2片段中存在大量T细胞表位。正如其他小组报道的那样，富含丙氨酸的重复区域参与变形链球菌与牙齿的附着，这是龋齿发展的起点，我们将覆盖该区域的四个氨基酸残基与 19 个氨基酸的 A 肽重叠。合成了残基，并研究了合成肽中存在的 T 细胞表位。使用合成肽和来自具有天然PAc抗体的受试者的外周血单核细胞进行T细胞增殖实验时，观察到PAc（氨基酸残基数，196-214）、PAc（211-229）、PAc（T细胞增殖活性）五种肽：PAc(241-259)、PAc(301-319) 和 PAc(407-425)。当检查五种肽的氨基酸序列的共性时，发现了三种常见的氨基酸：Y-AKL--YQ、NAAN-A-YQ和NA-AKAAY--AVAAN。这表明合成肽含有含有这种常见氨基酸序列的 T 细胞表位。还表明也存在含有这种共同氨基酸序列的聚集位。通过设计包括申请人目前正在分析的此类T细胞表位和Aggretope以及B细胞表位的氨基酸序列，我们可以在尽可能小的单位中创建具有高免疫原性和高安全性的龋齿疫苗。得到开发。为了进行更详细的研究，我们计划合成含有这种常见氨基酸序列的肽并分析T细胞表位和聚集位。