エナメル器のヘパラン硫酸プロテオグリカン局在と成長因子に関する免疫組織化学的研究

釉质器官中硫酸乙酰肝素蛋白多糖定位和生长因子的免疫组织化学研究

基本信息

批准号：
05771470
负责人：
中村浩彰
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)が線維芽細胞成長因子(FGF)などのヘパリン結合性成長因子を保持するreservoirして働くことに注目し、ラット下顎切歯におけるHSPGの局在についてそのグリコサミノグリカンに対するモノクロナール抗体を用いて免疫組織化学的に検索するとともに、切片上にてbFGFの結合部位の検討し共焦点走査型レーザー顕微鏡にて観察を行った。HSPGの局在は、分化期には、外エナメル上皮の基底膜に認められ、形成期に近づくにつれ、外エナメル上皮、エナメル髄、中間層細胞の細胞膜にも認められるようになった。形成期になる免疫反応は、中間層細胞の細胞膜にもっとも強い反応が認められたが、エナメル芽細胞においてはHSPGの局在を示す免疫反応はほとんど認められなかった。成熟期にいたると、乳頭層細胞の細胞膜に強い免疫反応が認められ、ruffle-ended ameloblast,smooth-ended ameloblastいずれの成熟期エナメル芽細胞にも免疫反応は陰性であった。また、bFGFの結合部位もHSPGの局在と同様な傾向を示した。以上の結果から、中間層細胞、乳頭層細胞の細胞膜にはヘパラン硫酸鎖が含まれていることが明かとなり、Vainio Thesleff(1989)らが報告している細胞膜型のヘパラン硫酸プロテオグリカンであるシンデカンの局在を反映しているものと考えられた。中間層細胞、乳頭層細胞の細胞膜のヘパラン硫酸鎖は、陰性荷電によりカルシウムなどの陽イオンをトラップすることにより、ミネラルの輸送調節を行っている可能性が考えられる。さらに、ヘパリン結合性成長因子であるbFGF結合することから、中間層細胞、乳頭層細胞は成長因子を局所に貯蔵することにより、エナメル芽細胞の分化、形態変化を制御している可能性も推測される。

我们关注硫酸乙酰肝素蛋白多糖（HSPG）作为肝素结合生长因子（如成纤维细胞生长因子（FGF））的储存库这一事实，并研究了 HSPG 在大鼠下颌切牙中相对于其糖胺聚糖的定位。使用单克隆抗体进行免疫组织化学搜索，在切片上检查 bFGF 的结合位点，并使用共焦扫描激光显微镜观察。在分化阶段，HSPG存在于外釉质上皮的基底膜中，随着形成阶段的临近，HSPG也存在于外釉质上皮、釉质髓和中间层细胞的细胞膜中。在中间层细胞的细胞膜中观察到形成阶段最强的免疫反应，但在成釉细胞中几乎没有观察到表明HSPG定位的免疫反应。在成熟阶段，在乳头层细胞的细胞膜中观察到强烈的免疫反应性，而在皱边端和光滑端的成釉细胞中观察到阴性免疫反应性。此外，bFGF 的结合位点也表现出与 HSPG 类似的定位趋势。从以上结果可以清楚地看出，中间层细胞和乳头层细胞的细胞膜含有硫酸乙酰肝素链和Vainio Thesleff(1989)等报道的细胞膜型硫酸乙酰肝素蛋白多糖syndecan，这被认为反映了这一点。本土化。据认为，中间层细胞和乳头层细胞的细胞膜中的硫酸乙酰肝素链可以通过捕获阳离子（例如钙）的负电荷来调节矿物质运输。此外，由于它们结合bFGF（一种肝素结合生长因子），推测中间层细胞和乳头层细胞可能通过局部储存生长因子来控制成釉细胞的分化和形态变化。