卵子成熟過程におけるアポトーシスを介した卵子選別機構の解明

阐明卵母细胞成熟过程中细胞凋亡介导的卵母细胞选择机制

基本信息

批准号：
05771226
负责人：
村上節
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771226/
关键词：
卵胞成熟アポトーシス黄体

项目摘要

種々の疾患のため摘出を余儀なくされ、月経周期が正確に判明しているヒト卵巣37例(27〜49歳)を用いて、アポトーシスの指標となるDNA断片を検出し得るTUNEL、及びアポトーシス関連抗原のLeと、さらに加えて細胞増殖関連抗原のKi67、並びにPCNAを連続切片上で免疫組織学的に検出し、卵胞構成細胞のcell turnoverを性周期と関連させて検討した。その結果、細胞増殖マーカーであるPCNAとKi67の陽性細胞数は同一検体でも必ずしも一致せず、卵胞期のPCNA陽性細胞は、顆粒膜・莱膜細胞ともに、排卵しない非優位卵胞よりもアロマターゼ陽性の顆粒膜細胞を有し排卵に向かうと考えられる優位卵胞において顕著であったのに対し、Ki67では両者における発現には有意差を認めなかった。PCNAは、over expressionされる傾向があるという報告を考慮すると、優位卵胞と非優位卵胞の増殖能に差はなく、エストロゲンなどの局所因子が、細胞の増殖だけでは説明しきれない卵の成熟を促している可能性がある。また、黄体期の非優位卵胞の顆粒膜・莱膜細胞において、PCNA、Ki67陽性率に変化はなく、排卵しない卵胞の増殖能は、黄体期においても低下していないことが示唆された。アポトーシスに関連するTUNELの検討では、DNAのfragmentaionはごく小数の細胞に認められるのみであり、ヒト卵巣の卵胞閉鎖にアポトーシスが関与する証拠はられなかった。しかし、機能を終えて間もない黄体では、PCNA、Ki67の陽性率の低下とTUNELの陽性率の増加が認められ、黄体の退縮過程に細胞増殖の停止とアポトーシスが関与することが示唆された。また、消化管などと異なり、卵巣ではLeの発現は、全周期を通じて認められなかった。

Using 37 human ovaries (ages 27-49), who had been forced to remove due to various diseases and whose menstrual cycle was accurately known, TUNEL, which can detect DNA fragments that are indicators of apoptosis, and Le, an apoptosis-associated antigen, and Ki67, a cell proliferation-associated antigen, and PCNA, were immunohistochemically detected on serial与性周期相关研究了卵泡 - 固定细胞的切片和细胞更新。结果，即使在同一样本中，细胞增殖标记的阳性细胞数量也不一定匹配，虽然卵泡阶段的PCNA阳性细胞在主要的卵泡中很突出，而主要的卵泡中很明显，这些细胞是芳香酶阳性颗粒细胞的主要卵泡细胞，并且被认为是呈斑点的细胞，而不是呈斑点，而没有颗粒的细胞。排卵，Ki67在两者中表达没有显着差异。考虑到PCNA往往过表达的报道，主要和非主要卵泡的增殖潜力没有差异，而局部因素（例如雌激素）可能会促进卵成熟，而单独细胞增殖无法解释。此外，在黄体期，非主要卵泡的颗粒和斜膜细胞的PCNA或Ki67阳性速率没有变化，这表明即使在luteal期，非卵泡卵泡的增殖能力也不会降低。在与凋亡有关的TUNEL研究中，仅在分数细胞计数中发现DNA碎片，并且没有证据表明凋亡与人类卵巢的卵泡闭合有关。然而，在黄体语料库中，观察到PCNA和Ki67的正率和TUNEL的正速率降低，这表明细胞增殖停滞和凋亡参与了叶黄素的回归过程。此外，与胃肠道不同，在整个循环中未观察到LE表达。