亜致死及び潜在的致死障害回復の分子機構

亚致死和潜在致命伤害恢复的分子机制

• 批准号: 03152099
• 负责人: 安徳 重敏
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03152099/
• 关键词: 亜致死障害; 潜在的致死障害; 回復の分子機構; DNA切断と再結合; 中性フイルタ-溶出法; ネオカルチノスタチン; 高張液

放射線障害からの回復は,放射線治寮の成績に影響を及ぼす重要な生物学的因子の1つである。この回復の機構を明らかにする目的で,放射線によるONA主鎖切断とその再結合を調べた。ラット胎児由来の培養細胞3YI系を用い, ^<14>CーサイミジンでDNAを標識し,20〜80Gyの200KVpX線を照射し,中性フイルタ-溶出法でDNA2重鎖切断を測定した。無処置細胞の切断されずに残っている2重鎖DNAは20Gyで80%,40Gyで49%,60Gyで25%,80Gyで11%と線量効果関係がみられた。放射線照射細胞の致死効果を増強させることが知られているネオカルチノスタチン(NCS)を照射後添加し,20分間0℃にて放置しておくとDNA切断数が50%増加した。潜在的致死障害(PLD)を発現させる0.5M NaCl高張液の処理では,NCSにみられるような切断数の増加はみられなかった。照射後37℃で培養すると2重鎖切断の再結合がみられ,約60分間培養で飽和に達し,80Gy照射で2重鎖DNAは11%から67%になるが完全に再結合することはなかった。PLDを発現させるNCS,高張液とPLD回復を促進させるHanks balanced salt液中で37℃で培養すると無処置群と同様に切断の再結合がみられ,60分培養では,いづれの群ともに残存切断数には有意の差はみられなかった。PLDを発現させる処理での再結合は,誤まった再結合をすることも考えられるが,本研究の結果は,NCSによる初期切断数の増加を除いて,コロニ-形成能からみた細胞の致死効果にみられるPLDの発現,回復とDNA切断とその再結合には相関関係はみられず,分子レベルでの結果との関係を明らかにすることはできなかった。現在再結合の速度等について詳細な研究を続けている。

从辐射损伤中恢复是影响辐射治疗宿舍性能的重要生物学因素之一。为了阐明这种恢复的机制，我们研究了ONA主链断裂及其通过辐射的重组。使用源自胎儿大鼠的培养细胞的3YI系统，用 ^<14> c-胸苷标记DNA，用20-80 Gy的200kVp X射线辐照，并使用中性滤波器渗出方法测量DNA双链断裂。观察到未处理细胞中未接收的双链DNA之间的剂量效应关系，剂量效应的关系为20％时的剂量效应关系为80％，40 Gy时为49％，在40 Gy时为25％，在60 Gy时为25％，在80 Gy时为11％。已知可以增强辐照细胞的致命作用的Neocartinototin（NCS）在照射后加入，并在0°C下静置20分钟，以使DNA切割数量增加50％。表达潜在致命损伤（PLD）的0.5m NaCl高渗溶液的处理未显示出NCS所见的裂解数量的增加。辐照后，在37°C培养时观察到双链断裂的重组，并在大约60分钟后达到饱和度，80 Gy的照射显示双链DNA为11％至67％，但没有完全重组。当在表达PLD的NCs中在37°C培养时，高渗溶液和HANKS平衡盐溶液促进PLD恢复时，裂解的重组的重组方式与未经处理的组相同，并且在60分钟的培养中，在两组中剩余切割的数量均无显着差异。尽管在表达PLD的治疗过程中的重组可能会导致错误的重组，但这项研究的结果表明，除了由于NCS引起的最初裂解数量增加，在表达，PLD的恢复，DNA裂解及其重组之间没有相关性，这在细胞成分能力的杀伤力效果中都无法澄清，这是毫无疑问的。我们目前正在继续对重组速度进行详细研究。

项目成果

Katsumasa Nakamura: "Repair of Sublethal and Potentially Lethal Damage and Fixation of Damage by Neocarzinostatin in Cultured Cells" Radiarion Research.

Katsumasa Nakamura：“培养细胞中新制癌菌素对亚致死和潜在致死损伤的修复和损伤固定”Radariion Research。