t(11;14)型リンパ腫から分離された新しい癌関連遺伝子の構造と機能

从 t(11;14) 淋巴瘤中分离出的新癌症相关基因的结构和功能

基本信息

批准号：
03152063
负责人：
福原資郎
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至 1992
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03152063/
关键词：
14q32転座 t(11;14)(q13;q32)リンパ腫転写活性 bclー1

项目摘要

JHプロ-ブを用いてt(11;14)型細胞株のゲノムのNAをクロ-ニングし、JHとハイブリダイズする3種の制限酵素消化断片を単離した。そのうちの1種では、JH4上流域が未知の非14番染色体領域に置き代っていた。ヒトーマウスハイブリド-マのサザン解析は、これがヒト11番染色体由来であることを示した。さらに、この未知領域をプロ-ブとしてヒト胎盤DNAから胚細胞型11番由来DNA断片を単離した。これらの塩基配列を調べると、JH4への再構成したDQ52に11番染色体が転座していた。さらに、数10bpのNーsequenceを伴うことや、11番染色体部位の近傍に7merおよび9mer認識配列に類似の配列があることからrecombinase errorによる転座が示唆された。転座部位の11番由来断片には数100bpのopen reading frameがあった。この部をプロ-ブとしてt(11;14)型細胞株のRNAノザン解析で、2.0kb,9kb,13Kbのバンドが検出され、転写活性のあることで確認した。t(11;14)型細胞株のpolyA^+RNAより作成したcDNAライブラリ-をスクリ-ニングして異常サイズのCu cDNAクロ-ンを得た。現在、cDNAのスクリ-ニングおよびそのクロ-ンの解析を行っている。今回、単離した11番由来のPNA断片は、塩基配列の比較から既知の遺伝子ではないことがわかった。最近、11q13領域より分離されたcyclin遺伝子のひとつであるPRAD1の塩基配列やmRNAのサイズとも豊っている。今後、bclー1 locusやPRAD1geneとの物理戸位置関係を求め、リンパ腫発生に関わる転座の意色を決定したい。

使用JH探针将T（11; 14）型细胞系的基因组中的Na克隆，并分离出与JH杂交的三个限制酶消化片段。在其中一个物种中，上游JH4区被未知的非14染色体区域所取代。人鼠杂交瘤的南部分析表明，它是从人类染色体11衍生的。此外，将这个未知区域用作探针，从人胎盘DNA中分离出源自生殖细胞11的DNA片段。当检查了这些核苷酸序列时，将11染色体易位到已重构为JH4的DQ52。此外，几十个BP的N序列的存在以及与11号染色体附近7Mer和9mer识别序列相似的序列的存在表明重组酶误差易位。从易位站点的第11号得出的片段具有数百个bp的开放式阅读框。使用该部分作为探针，对T（11; 14）型细胞系的RNA北分析，检测到2.0 kb，9 kb和13 kb的带，使用该区域作为探针，并确认它们具有转录活性。筛选由T（11; 14）型细胞系的Polya^+RNA产生的cDNA库，以获得异常大小的Cu cDNA克隆。当前，正在进行对其克隆的cDNA筛选和分析。这次，发现从第11号衍生的分离的PNA片段是从基本序列的比较中的已知基因。最近，PRAD1的核苷酸序列和mRNA大小，从11q13区域分离的细胞周期蛋白基因之一已富含核苷酸序列和mRNA大小。将来，我们想确定用Bcl-1基因座和Prad1gene的物理门的位置，并确定淋巴瘤发育涉及的易位的重要性。