癌遺伝子の発現とアイソザイムの偏倚

癌基因表达和同工酶偏差

• 批准号: 62015043
• 负责人: 田中 武彦
• 金额: $ 3.01万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 1988
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62015043/
• 关键词: ピルビン酸キナーゼアイソザイム; M遺伝子; L遺伝子; 制御領域; ピルビン酸キナーゼアイソザイム; M遺伝子; L遺伝子; 制御領域

細胞ががん化するとピルビン酸キナーゼのアイソザイムパターンは著明に変化する. すなわち, L型やM_1型は減少し, M_2型が増加する. このような偏倚の機構を遺伝子レベルで調べるために, 今年度はM_1型とM_2型をコードするM遺伝子の第1, エクソンとその上流を含むクローンを単離して, 転写開始点およびプロモーター領域の塩基配列を調べると共に, M遺伝子とL遺伝子(L型とR型のアイソザイムをコードしていて, 両分子種は転写開始点の違いで生成される)の発現の制御領域を調べ, 以下の点を明らかにした. 1.M遺伝子の転写開始点は20スクレオチド内に複数存在するが, これらはM_1型とM_2型で同様に使われていた. この結果はM_1型とM_2型のmRNAがM遺伝子からの同一転写産物のスプライシングの違いで生成するという, これまでの仮説を支持する. 2.M遺伝子のプロモーター領域はGCに富み, GCボックスが数個存在していたが, TATAボックスは認められなかった. 3.CAT検定法によりM遺伝子発現の制御領域を調ベたところ, 転写開始点から上流約1.8kb内に存在することが示唆された. 4.一方, L遺伝子のL型の発現の制御領域をCAT検定法により調べた結果, L型の転写開始点から上流約1.5kb内に存在することが示唆された.

当细胞变成癌症时，丙酮酸激酶的同工酶模式明显变化。换句话说，L和M_1减小，M_2增加。 To investigate the mechanism of such bias at the gene level, this year we isolated clones containing the first and exons of the M genes encoding M_1 and M_2 and their upstream, and examined the nucleotide sequences of the transcriptional origin and promoter region, and examined the regulatory regions of the M gene and L gene (which encode L and R isoenzymes, and both molecular species are produced by the difference in the转录起源），并揭示了以下几点：1。在20个scleotides中有多个M基因的转录起源，但它们以相同的方式在M_1和M_2中使用。该结果支持先前的假设，即M_1和M_2 mRNA是通过M基因的同一转录本的剪接而产生的。 2。M基因的启动子区域富含GC，并且存在几个GC盒，但没有观察到Tata盒。 3。当使用CAT检验调整M基因表达的对照区域时，建议它与转录起始点上游约1.8 kb存在。 4。另一方面，使用CAT检验研究了L基因中L基因表达的控制区域，并建议它与L基因的转录起始点上游大约1.5 kb存在。