癌遺伝子の発現とアイソザイムの偏倚

癌基因表达和同工酶偏差

基本信息

批准号：
62015043
负责人：
田中武彦
金额：
$ 3.01万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至 1988
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62015043/
关键词：
ピルビン酸キナーゼアイソザイム M遺伝子 L遺伝子制御領域

项目摘要

細胞ががん化するとピルビン酸キナーゼのアイソザイムパターンは著明に変化する. すなわち, L型やM_1型は減少し, M_2型が増加する. このような偏倚の機構を遺伝子レベルで調べるために, 今年度はM_1型とM_2型をコードするM遺伝子の第1, エクソンとその上流を含むクローンを単離して, 転写開始点およびプロモーター領域の塩基配列を調べると共に, M遺伝子とL遺伝子(L型とR型のアイソザイムをコードしていて, 両分子種は転写開始点の違いで生成される)の発現の制御領域を調べ, 以下の点を明らかにした. 1.M遺伝子の転写開始点は20スクレオチド内に複数存在するが, これらはM_1型とM_2型で同様に使われていた. この結果はM_1型とM_2型のmRNAがM遺伝子からの同一転写産物のスプライシングの違いで生成するという, これまでの仮説を支持する. 2.M遺伝子のプロモーター領域はGCに富み, GCボックスが数個存在していたが, TATAボックスは認められなかった. 3.CAT検定法によりM遺伝子発現の制御領域を調ベたところ, 転写開始点から上流約1.8kb内に存在することが示唆された. 4.一方, L遺伝子のL型の発現の制御領域をCAT検定法により調べた結果, L型の転写開始点から上流約1.5kb内に存在することが示唆された.

当细胞癌变时，丙酮酸激酶的同工酶模式发生显着变化，即L型和M_1型减少，M_2型增加。将分离包含编码M_1和M_2类型的M基因的第一个外显子及其上游区域的克隆，并检查转录起始位点和启动子区域的核苷酸序列。我们研究了M基因和L基因（编码L型和R型同工酶，两种分子种类由不同的转录起始位点产生）的表达控制区，并阐明了以下几点： 1 存在多个转录起始点。 20个核苷酸内的M基因位点，这些位点在M_1和M_2类型中以相同的方式使用。这一结果支持了之前的假设，即M_1型和M_2型mRNA是由M基因的同一个转录物的不同剪接产生的。M基因的启动子区域富含GC，并且GC盒是几个TATA盒。 3.当使用CAT分析研究M基因表达的调节区时，表明该区域存在于转录起始位点上游约1.8kb内。 4.另一方面，使用CAT测定法检查L基因的L型表达控制区的结果表明，其存在于距L型转录起始位点上游约1.5kb的范围内。