癌の細胞膜糖鎖変化の機構と応用に関する研究

细胞膜糖链变化在癌症中的作用机制及应用研究

基本信息

批准号：
62010002
负责人：
牧田章
金额：
$ 14.4万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.癌ウィルスで形質転換した細胞の糖脂質変化は癌遺伝子以外の影響も受けている. そこで癌遺伝子自体を導入した細胞の糖脂質を調べたところ, 核内型遺伝子はGM3が減少しGD3を発現した. 他方, 核内型遺伝子ではネオラクト系ガングリオシドを発現した. 核内型遺伝子は糖蛋白のGlcNAc→4と1→6分枝構造を増加させ, 1→6分枝の増加は造腫瘍性と相関していた.2.GD3は種々の癌で発現されるので, GD3合成酵素の部分精製, characterizationを行った. この酵素はGM3のみを基質とし, 肝癌では活性が亢進していた. 癌では糖鎖の硫酸化やリン酸化の多様な修飾を受ることが分ってきた. ヒト腎臓癌では増加する硫酸化酵素を精製した. その癌性変化を調べている. ムコ多糖の硫酸化酵素は幾つか存在するが, それらは精製されていないので動物胎児血清で分画を行っている. ムコ多糖糖鎖の分解に働くリソゾームのスルファターゼBやβーグルクロニダーゼはヒト肺癌や肝癌で, 酵素に結合する糖鎖にリン酸エステルが増加するのみならず, その蛋白部分もリン酸化されていることを見出した. これらリソゾーム酵素は正常組織でも蛋白リン酸化があるが, 癌とはリン酸化部位が異っていた. cAMP依存性蛋白キナーゼがこれらのリン酸化に働くことが分ったが, 癌ではこのキナーゼ亜型が正常とは違っていた.3.ヒト消化器癌で発現される異種抗原, GM3(NeuGc)に対するヒトのモノクロン抗体(IgM)作製した. IgMをin vitroでIgGに変換することを試みている. 癌関連ガングリオシド抗体はそれのみで癌抑制効果があるので, このヒトモノクロン抗体の癌治療への応用が期待される. その他, 数種の癌関連モノクロン抗体が確立され, 血清診断の有効性を検討中である.4.癌マーカーCEAは癌細胞膜の糖スファチジルイノシトール(PI)ー糖鎖ーリン酸エタノルアミンを介して共有結合しており, PI特異的ホスホリパーゼCでCEAを解離することを見出した.

1. 癌病毒转化的细胞中的糖脂变化受到癌基因以外的因素的影响当我们检查导入癌基因本身的细胞中的糖脂时，我们发现核型基因中的GM3减少，GD3增加。另一方面，核型基因表达新乳神经节苷脂，核型基因增加糖蛋白的GlcNAc→4和1→6分支结构， 1→6分支的增加与致瘤性相关。2.由于GD3在多种癌症中表达，我们对GD3合酶进行了部分纯化和表征。该酶仅使用GM3作为底物，其活性在肝癌中增强。人们发现，在癌症中，糖链会发生硫酸化和磷酸化等各种修饰。我们纯化了硫酸化酶，该酶在人类肾癌中增加，我们正在研究这种变化。有多种粘多糖硫酸化酶，但由于它们未经纯化，因此使用动物胎儿血清进行分离。溶酶体硫酸酯酶 B 和 β-葡萄糖醛酸酶可降解粘多糖糖链，与人类肺癌患者有关。和肝癌中，我们发现不仅磷酸酯与酶结合的糖链增加，而且这些溶酶体酶的蛋白质部分也被磷酸化。磷酸化位点与癌症中的不同。研究发现，cAMP 依赖性蛋白激酶在这些磷酸化中发挥作用，但该激酶在癌症中的亚型与正常情况不同。 3. 人类消化系统我们创建了人类单克隆抗体。（IgM）针对癌症中表达的异源抗原 GM3（NeuGc），我们正在尝试在体外将 IgM 转化为 IgG，仅癌症相关神经节苷脂抗体就具有癌症抑制作用。这种人类单克隆抗体在癌症治疗中的应用值得期待。此外，已经建立了几种与癌症相关的单克隆抗体，目前正在研究它们在血清诊断中的有效性。 4.癌症标志物CEA是一种糖。磷脂酰肌醇 (PI)、糖链和乙醇胺磷酸盐彼此共价键合，并且 CEA 被 PI 特异性磷脂酶 C 解离。