酵母のビタミンB∪依存性酵素に関する系統的研究

酵母中维生素B∪依赖性酶的系统研究

基本信息

批准号：
61560125
负责人：
八木年晴
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究課題の実施計画に沿って研究を遂行し、次の結果を得た。1.パン酵母(Saccharonyces cerevisiae)の粗抽出液中に存在する各種【B_6】酵素の活性を測定した。α-トランスアミナーゼとしてアスパラギン酸トランスアミナーゼ(AAT)、ω-トランスアミナーゼとしてリジントランスアミナーゼ、ラセマーゼとしてアスパラギン酸ラセマーゼ、デカルボキシラーゼとしてシスティンスルフィン酸(CSA)デカルボキシラーゼの各々の活性を測定し、比較したところ、AAT活性が最も強く、その他は非常にわずかな活性しか認められなかった。2.各種酵母中に存在するAAT活性をスクリーニングした。(1)リンゴ酸脱水素酵素共役法によるアッセイで、各種酵母中のAAT含量は、属により大きな差のあることがわかった。Candida属の活性が最も高く、湿菌体1g当り30単位の活性を示すものがあった。次いでTorulopsis属、Saccharomyces属の活性が高かった。一方、Hansenula属の活性は低く、最も低いものでは1.4(単位1g菌体)であった。(2)CSA-テトラゾリウム法による活性染色により、AAT活性の電気泳動パターンを明らかにした。各種酵母は1〜3本のAATバンドを示し、これらのうちの主バンドの移動度は同属の酵母でほぼ共通していたが、バンドの本数は同属の酵母であっても同一ではなかった。3.Torulopsis属のAATを精製し、その性質を明らかにした。Torulopsis candidaの粗抽出液から各種クロマトグラフィーと等速電気泳動により、均一なAAT標品が得られた。分子量や吸収スペクトル等の性質は動物の細胞質の酵素と良く一致した。ウサギ抗血清も調製中である。4.T.candidaにおけるAATの局在性を調べた。局在性については更に詳細な検討が必要である。

该研究是根据本研究主题的实施计划进行的，并获得了以下结果。 1。测量了贝克酵母（酿酒酵母）粗提取物中存在各种[B_6]酶的活性。天冬氨酸转氨酶（AAT）作为α-转氨酸酶，赖氨酸转氨酸酶作为ω-转氨酶，天冬氨酸种族友作为种族友酶和囊蛋白硫酸氨基氨基氨酸酶（CSA）脱羧酶作为十二羧化酶的活性是测量和比较的，而AAT的活性很强。 2。筛选在各种酵母中存在的AAT活动。（1）在使用苹果酸脱氢酶偶联的测定中，发现各种酵母中的AAT含量取决于属的不同。一些念珠菌属的活性最高，显示每克湿细菌的活性30单位。接下来，环虫属和糖果属具有很高的活性。另一方面，Hansenula属的活性很低，最低为1.4（单位1G单元）。（2）通过CSA四唑法进行主动染色揭示了AAT活性的电泳模式。各种酵母表现出1-3个AAT带，尽管它们的主要带的迁移率几乎与同一属的酵母相同，但即使对于同一属的酵母，带的数量也不相同。 3。纯化的属属属以揭示其特性。通过各种色谱和同性恋疗法从Torulopsis念珠菌的粗提取物获得均匀的AAT制备。诸如分子量和吸收光谱之类的特性与动物细胞质中的酶一致。还准备兔抗血清。 4。研究了AAT在T.念珠菌中的定位。需要更详细地检查本地化。