酵母のビタミンB∪依存性酵素に関する系統的研究

酵母中维生素B∪依赖性酶的系统研究

基本信息

批准号：
61560125
负责人：
八木年晴
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究課題の実施計画に沿って研究を遂行し、次の結果を得た。1.パン酵母(Saccharonyces cerevisiae)の粗抽出液中に存在する各種【B_6】酵素の活性を測定した。α-トランスアミナーゼとしてアスパラギン酸トランスアミナーゼ(AAT)、ω-トランスアミナーゼとしてリジントランスアミナーゼ、ラセマーゼとしてアスパラギン酸ラセマーゼ、デカルボキシラーゼとしてシスティンスルフィン酸(CSA)デカルボキシラーゼの各々の活性を測定し、比較したところ、AAT活性が最も強く、その他は非常にわずかな活性しか認められなかった。2.各種酵母中に存在するAAT活性をスクリーニングした。(1)リンゴ酸脱水素酵素共役法によるアッセイで、各種酵母中のAAT含量は、属により大きな差のあることがわかった。Candida属の活性が最も高く、湿菌体1g当り30単位の活性を示すものがあった。次いでTorulopsis属、Saccharomyces属の活性が高かった。一方、Hansenula属の活性は低く、最も低いものでは1.4(単位1g菌体)であった。(2)CSA-テトラゾリウム法による活性染色により、AAT活性の電気泳動パターンを明らかにした。各種酵母は1〜3本のAATバンドを示し、これらのうちの主バンドの移動度は同属の酵母でほぼ共通していたが、バンドの本数は同属の酵母であっても同一ではなかった。3.Torulopsis属のAATを精製し、その性質を明らかにした。Torulopsis candidaの粗抽出液から各種クロマトグラフィーと等速電気泳動により、均一なAAT標品が得られた。分子量や吸収スペクトル等の性質は動物の細胞質の酵素と良く一致した。ウサギ抗血清も調製中である。4.T.candidaにおけるAATの局在性を調べた。局在性については更に詳細な検討が必要である。

该研究是根据本研究的实施计划进行的，并获得了以下结果。 1。在酿酒酵母的粗糙提取中存在各种[B_6]酶活性。测量α-转化器（AAT）的活性为α-跨性别酶（AAT），赖氨酸转化酶作为赖氨酸TRANE RASEMASE和DECALBO CHILL酶的活性。 2。筛查在各种酵母中存在的AAT活动。（1）在苹果氢酶体质法的测定中，发现各种酵母中的AAT含量取决于该属的显着差异。念珠菌属的活性最高，表明每 / 1克湿细菌30单位。环虫和糖疗法的活性很高。另一方面，Hansenula属的活性低，最低为1.4（1G细菌）。（2）AAT活性通过CSA四唑法进行主动染色揭示了电动游泳模式。各种酵母表明一到三个AAT带，其中主带的运动在同一酵母菌属中几乎相同，但是即使酵母相同，乐队的数量也不相同。 3。纯化了曲托的AAT并揭示了其特性。通过曲托念珠菌的粗糙提取，通过各种色谱和速度电子游泳获得了一个均匀的AAT靶标。分子量和吸收光谱的特性与动物细胞质的酶非常一致。还准备了兔抗甲状化。 4。我检查了AAT在T.Candida中的定位。有必要考虑更详细的本地化。