新しいポリエンマクロライド抗生物質の構造と作用機作に関する研究

新型多烯大环内酯类抗生素结构及作用机制研究

基本信息

批准号：
61560108
负责人：
伊崎和夫
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

グルコノバクタ-W-315株の生産する抗生物質AB-315は性質のよく似た一群の抗生物質であり、ペンタエンを部分構造にもつポリエンマクロライド抗生物質である。本抗生物質はポリエン系抗生物質でありながら、細菌にのみ有効であり、眞菌類には殆ど活性を示さないユニークな抗生物質である。この研究においては、培養液中に最も量的に多い画分2について單離精製し、その作用機作の解明を行った。画分2は大腸菌を使用したIu vivoの蛋白合成系に対してのみ著しい阻害が認められ、蛋白合成の阻害が一次作用点と推定された。さらにIu vitroのポリウリジル酸に依存したポリフェニルアラニンの合成が強く阻害される事がわかった。また人工mRNAとしてポリアデニル酸およびポリシチジル酸を用いて、夫々ポリリジン、ポリプロリンの合成に対する阻害をみると、いずれも著しく阻害されることがわかった。これに関連して上記三種類の人工mRNAを用いてMiscodingにたいする画分2の作用を檢討した結果、いずれも影響は認められなかった。また、アミノアシルtRNA合成反応にたいして全く阻害作用を示さないが、フェニルtRNAのリボソームへの結合は著しく阻害した。標識したピューロマイシンを用いたペプチジルピューロマイシンの生成に対し、画分2は阻害せず、従ってペプチド転移反応の阻害作用を有しないと結論した。 GTPに依存した転座反応にたいしても画分2は全く阻害作用を示さなかった。以上の結果より画分2はアミノアシルtRNAのリボソームへの結合を阻害することによる蛋白合成阻害を示し、この阻害が抗菌活性の主要な作用機作であることが判明した。

葡糖杆菌菌株W-315产生的抗生素AB-315是一组性质非常相似的抗生素，是一种以戊烯为部分结构的多烯大环内酯类抗生素。虽然这种抗生素是多烯类抗生素，但它是一种独特的抗生素，仅对细菌有效，对真菌几乎没有活性。在本研究中，分离并纯化了培养液中最丰富的组分2，以阐明其作用机制。发现级分 2 仅显着抑制使用大肠杆菌的 IU 体内蛋白质合成系统，并且推测蛋白质合成的抑制是主要作用点。此外，还发现体外依赖于多聚尿苷酸的多苯丙氨酸合成受到强烈抑制。此外，当使用聚腺苷酸和聚胞苷酸作为人工mRNA分别抑制聚赖氨酸和聚脯氨酸的合成时，发现两者均受到显着抑制。在这方面，我们使用上述三种类型的人工mRNA研究了组分2对Miscoding的影响，结果，在它们中没有观察到任何影响。此外，虽然它对氨酰基-tRNA合成反应没有表现出任何抑制作用，但它显着抑制苯基-tRNA与核糖体的结合。结论是级分2不抑制使用标记嘌呤霉素的肽基嘌呤霉素的产生，因此对转肽反应没有抑制作用。级分 2 也没有表现出对 GTP 依赖性易位反应的抑制作用。由以上结果可知，级分2通过抑制氨酰基-tRNA与核糖体的结合来抑制蛋白质合成，该抑制是抗菌活性的主要作用机制。