亜硝酸塩の心筋虚血誘発性不整脈に対する急性期抑制効果の機序解明

亚硝酸盐对心肌缺血性心律失常的急性抑制作用机制

• 批准号: 26861525
• 负责人: 丸山 大介
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26861525/
• 关键词: 亜硝酸塩; 虚血再灌流傷害; 不整脈

【研究方法】Wistarラットを用いて、生理食塩水（Control）、Nitrite（0.015, 0.15, 1.5 mg/kg）、Nitrite 0.15 mg/kgと共にcPTIOあるいはAllopurinolを腹腔内投与した。次に冠動脈左前下行枝（LAD）を30分間結紮することで心虚血モデルとし、不整脈の重症度を先行研究に従いスコア化（高いほど重症）し評価した。またNitriteの抗不整脈作用機序を明らかにするために、心筋Gap Junctionの主要蛋白であるコネキシン43（Cx43）に着目し、虚血傷害によるCx43脱リン酸化をウエスタンブロット法にて評価した。【結果及び考察】Nitrite 0.15 mg/kg群の不整脈スコアは、Control群・Nitrite 0.015 mg/kg群およびNitrite 1.5 mg/kg群に比して有意に低下した。これらの結果から、Nitriteは虚血誘発性心室性不整脈を抑制することと、その効果－濃度関係は、他臓器に対する保護効果で示されているのと同様に、直線ではなくU-shape状の関係を示すことが明らかになった。さらにこの抗不整脈作用は、cPTIOおよびAllopurinolの投与によって棄却されたことから、XORを介してNitriteから還元されたNOによって発揮されていることが示唆される。またリン酸化Cx43はControl群に比して0.15 mg/kg Nitrite群で有意に保たれた。よってNitriteの抗不整脈作用は、虚血によるCx43の脱リン酸化すなわちGap Junctionの質的変化を抑制するという機序が考えられた。【結論】Nitrite（0.15 mg/kg）はCx43蛋白の脱リン酸化を防ぎ、ラット虚血誘発性心室性不整脈を抑制する。その機序として、XORによって還元されたNOの作用が示唆された。

[研究方法] 使用Wistar大鼠，将cPTIO或别嘌呤醇与生理盐水(对照)、亚硝酸盐(0.015、0.15、1.5mg/kg)和亚硝酸盐0.15mg/kg一起腹腔内施用。接下来，结扎左冠状动脉前降支（LAD）30分钟，制作心脏缺血模型，根据既往研究对心律失常的严重程度进行评分（严重程度越高）。为了阐明亚硝酸盐的抗心律失常机制，我们重点关注心肌间隙连接的主要蛋白连接蛋白43（Cx43），并使用Western blotting评估了缺血性损伤引起的Cx43去磷酸化。 [结果与讨论]亚硝酸盐0.15 mg/kg组的心律失常评分显着低于对照组、亚硝酸盐0.015 mg/kg组和亚硝酸盐1.5 mg/kg组。这些结果表明，亚硝酸盐可抑制缺血引起的室性心律失常，并且效果与浓度的关系不是线性的而是U形的，类似于对其他器官的保护作用，已经清楚存在这种关系。此外，这种抗心律失常作用被cPTIO和别嘌呤醇消除，表明它是由亚硝酸盐通过XOR还原成NO而发挥的。此外，与对照组相比，0.15 mg/kg 亚硝酸盐组中磷酸化的 Cx43 显着维持。因此，亚硝酸盐的抗心律失常作用被认为是由于抑制缺血引起的Cx43去磷酸化，即间隙连接质变的机制所致。 [结论]亚硝酸盐(0.15 mg/kg)可防止Cx43蛋白去磷酸化，抑制大鼠缺血性室性心律失常。其机制被认为是异或还原NO的作用。

项目成果

Nitrite Reduces Ischemia-Induced Ventricular Arrhythmias via Preservation of Connexin 43 Protein in Rats.

亚硝酸盐通过保存大鼠体内的连接蛋白 43 蛋白来减少缺血引起的室性心律失常。

• 发表时间: 2014
• 作者: Maruyama D;Hirata N;Miyashita R;Kawaguchi R;Yoshikawa Y;Yamakage M.
• 通讯作者: Yamakage M.