血液凝固・線溶調節因子の分子生物学的研究

凝血纤溶调节剂的分子生物学研究

基本信息

批准号：
63637001
负责人：
青木延雄
金额：
$ 15.36万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.線溶制御因子アルファ2プラスミンインヒビター(PI)の遺伝子構造を明らかにし、さらに先天性PI欠損症の一家系についてその遺伝子の変異を究明した。その家系のホモ接合体の解析で、遺伝子に再構成や大きな欠落はみとめられず、唯一の変化としてC末端部をコードする領域にシチジンが1ケ挿入されていた。その結果、フレームシフトが起り、C末端12のアミノ酸の置換と166のアミノ酸の附加によるペプチド鎖の延長が起ることが判明した。発現実験でもそれが確認された。PIの遺伝子の染色体上の局在も18p11.2→q11.2と決定された。2.凝固線溶制御調節因1ヒスチジンリッチ糖蛋白(HRG)の正常遺伝子を解析し、約11キロ塩基対の大きさで9ケのエクソンと8ケのイントロンからなることが明らかになった。HRGのN末端領域の2ケのシスタチン様ドメインはいずれも3ケづつのエクソンで構成され、各イントロンの介在位置はキニノーゲンの3ケのシスタチン様ドメインのそれと同じであり、両遺伝子は共にシスタチンスーパー遺伝子ファミリーに属するものであることが判明した。3.凝固のプロテインCを介する制御系において、補酵素的役割を果す血管内皮膜の蛋白トロンボモデュリン(TM)が血小板にも存在することが明らかになった。血小板TMは分子量、機能とも血管内皮細胞のTMと全く同様であり、血小板TMは、血管傷害部位に凝集した血小板上で凝固制御に関与すると考えられる。活性化プロテインCの抗凝固作用を促進するプロテインS(PS)の補体系成分C4bpとの結合部位を解析し、C4bpのC末端近傍にPSが結合することが明らかになった。4.凝固線溶の阻止にも働くアルファ2マクログロブリン(MG)の遺伝子のプロモーター領域の配列を決定し、他の急性相蛋白との比較から、急性相蛋白遺伝子と相同性の高い配列が見出された。この配列に特異的に結合する蛋白を肝細胞核蛋白より精製した。

1. 我们阐明了纤溶调节因子α2纤溶酶抑制剂（PI）的基因结构，并在先天性PI缺陷家系中调查了该基因的突变情况。对该家族中纯合子的分析显示该基因没有重排或重大缺失，唯一的变化是在编码 C 末端的区域插入了单个胞苷。结果发现发生了移码，导致C端12个氨基酸被取代，并增加了166个氨基酸，导致肽链延长。这在表达实验中也得到了证实。 PI基因的染色体位置也确定为18p11.2→q11.2。 2. 富含组氨酸糖蛋白（HRG）（凝血和纤溶调节因子）的正常基因经分析显示大小约为 11 KB 对，由 9 个外显子和 8 个内含子组成。 HRG N末端区域的两个半胱氨酸蛋白酶抑制剂样结构域各由三个外显子组成，并且每个内含子的插入位置与激肽原的三个半胱氨酸蛋白酶抑制剂样结构域的插入位置相同。属于一个基因家族。 3.据揭示，血栓调节蛋白（TM）是血管内皮膜中的一种蛋白质，在蛋白C介导的凝血控制系统中发挥辅酶作用，也存在于血小板中。血小板TM具有与血管内皮细胞TM完全相同的分子量和功能，并且血小板TM被认为参与对聚集在血管损伤部位的血小板的凝血控制。对蛋白 S (PS) 与补体系统成分 C4bp 的结合位点进行分析表明，PS 结合在 C4bp 的 C 末端附近，该蛋白可促进活化蛋白 C 的抗凝血作用。 4. 我们确定了α-2巨球蛋白（MG）基因的启动子区序列，该基因也具有预防凝血和纤溶作用，通过与其他急性期蛋白基因的比较，发现了与急性期蛋白基因高度同源的序列。相蛋白。从肝细胞核蛋白中纯化出与该序列特异性结合的蛋白质。