c-fos遺伝子転写制御のシグナル

调节 c-fos 基因转录的信号

基本信息

批准号：
63620504
负责人：
野瀬清
金额：
$ 0.96万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63620504/
关键词：
がん遺伝子骨芽細胞発がんプロモーター c-fos ras

项目摘要

各種の細胞刺激により誘導されるc-fos遺伝子は、最近他の遺伝子の転写を制御する転写因子であることが明らかにされた。本研究では、c-fos発現を修飾する条件を検索し、またc-fosの標的遺伝子を同定することにより、転写制御におけるc-fosの機能を明らかにすることを目的とした。1.c-fosの誘導は、多くの細胞株で普遍的に見られる現象であるが、本研究において、rasで形態転換したマウス骨芽細胞においては、いずれの誘導物資によってもc-fos誘導が低下していることが見出された。この誘導低下は、mRNAレベル、蛋白レベルで確認された。c-fos遺伝子の転写は遺伝子上流の特異配列により制御されるので、c-fos遺伝子上流の転写制御領域のDNA断片を用い、この結合蛋白の変化を検討した。その結果、rasで形質転換した細胞ではすべて、このDNAと結合する核蛋白が減少または質的変化を受けていることが示された。従って、転写制御領域に結合する因子がrasにより修飾され、結合活性が変化したことが誘導低下の原因と考えられた。2.c-fos遺伝子産物により転写制御される遺伝子を分離するため、マウス骨芽細胞をc-fos誘導物資TPAで4時間処理し、cDNAライブラリーを作製した。スクリーニングの結果、TPAにより誘導される8個の遺伝子がクローニングされ、塩基配列決定からこのうち3個はメタロチオネイン、1個はオステオポンチン、残り4個は未知の遺伝子であることが判明した。c-fos発現を人工的に制御できるプラスミッドを作製し、細胞に導入してc-fosの発現だけを上昇させて上の遺伝子発現の変化を検討したところ、分離した新規の遺伝子の一つ(OTS-8)の発現は、c-fos遺伝子産物により制御されることが示唆された。以上の結果から、増殖シグナルと転写制御の相関の一端が明らかとなった。

由各种细胞刺激诱导的c-fos基因最近被证明是控制其他基因转录的转录因子。在本研究中，我们旨在通过寻找修饰c-fos表达的条件并鉴定c-fos的靶基因来阐明c-fos在转录调控中的功能。 1. c-fos的诱导是许多细胞系中常见的现象，但在本研究中，发现ras形态转化的小鼠成骨细胞中c-fos没有被诱导减少。这种诱导的减少在 mRNA 和蛋白质水平上得到了证实。由于 c-fos 基因的转录是由该基因上游的特定序列控制的，因此我们使用 c-fos 基因上游转录控制区的 DNA 片段研究了该结合蛋白的变化。结果显示，在所有用ras转化的细胞中，与该DNA结合的核蛋白均减少或发生质变。因此，认为诱导降低的原因是与转录控制区结合的因子被ras修饰，导致结合活性发生变化。 2.为了分离受c-fos基因产物转录调节的基因，用c-fos诱导剂TPA处理小鼠成骨细胞4小时以创建cDNA文库。筛选结果克隆了TPA诱导的8个基因，碱基测序显示其中3个是金属硫蛋白，1个是骨桥蛋白，其余4个是未知基因。当我们创建了一种可以人为控制c-fos表达的质粒并将其引入细胞中以仅增加c-fos表达时，我们检查了上述基因表达的变化，并发现分离出的新基因之一被认为是。 (OTS-8) 的表达受 c-fos 基因产物调节。上述结果揭示了增殖信号与转录调控之间的相关性。