c-fos遺伝子転写制御のシグナル

调节 c-fos 基因转录的信号

基本信息

批准号：
63620504
负责人：
野瀬清
金额：
$ 0.96万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63620504/
关键词：
がん遺伝子骨芽細胞発がんプロモーター c-fos ras

项目摘要

各種の細胞刺激により誘導されるc-fos遺伝子は、最近他の遺伝子の転写を制御する転写因子であることが明らかにされた。本研究では、c-fos発現を修飾する条件を検索し、またc-fosの標的遺伝子を同定することにより、転写制御におけるc-fosの機能を明らかにすることを目的とした。1.c-fosの誘導は、多くの細胞株で普遍的に見られる現象であるが、本研究において、rasで形態転換したマウス骨芽細胞においては、いずれの誘導物資によってもc-fos誘導が低下していることが見出された。この誘導低下は、mRNAレベル、蛋白レベルで確認された。c-fos遺伝子の転写は遺伝子上流の特異配列により制御されるので、c-fos遺伝子上流の転写制御領域のDNA断片を用い、この結合蛋白の変化を検討した。その結果、rasで形質転換した細胞ではすべて、このDNAと結合する核蛋白が減少または質的変化を受けていることが示された。従って、転写制御領域に結合する因子がrasにより修飾され、結合活性が変化したことが誘導低下の原因と考えられた。2.c-fos遺伝子産物により転写制御される遺伝子を分離するため、マウス骨芽細胞をc-fos誘導物資TPAで4時間処理し、cDNAライブラリーを作製した。スクリーニングの結果、TPAにより誘導される8個の遺伝子がクローニングされ、塩基配列決定からこのうち3個はメタロチオネイン、1個はオステオポンチン、残り4個は未知の遺伝子であることが判明した。c-fos発現を人工的に制御できるプラスミッドを作製し、細胞に導入してc-fosの発現だけを上昇させて上の遺伝子発現の変化を検討したところ、分離した新規の遺伝子の一つ(OTS-8)の発現は、c-fos遺伝子産物により制御されることが示唆された。以上の結果から、増殖シグナルと転写制御の相関の一端が明らかとなった。

最近已证明由各种细胞刺激诱导的C-FOS基因是调节其他基因转录的转录因子。在这项研究中，目的是通过寻找改变C-FOS表达并识别C-FOS的靶基因的条件来阐明C-FOS在转录调控中的功能。 1。C-FOS诱导是在许多细胞系中普遍看出的一种现象，但是在这项研究中，发现在与RAS形态上转化的小鼠成骨细胞中，任何衍生物都会降低C-FOS诱导。在mRNA和蛋白质水平上证实了这种诱导的还原。由于C-FOS基因的转录由基因上游的特定序列控制，因此使用C-FOS基因上游的转录控制区域中的DNA片段研究了该结合蛋白的变化。结果表明，所有用RAS转化的细胞均经历与该DNA结合的核蛋白的降低或定性变化。因此，人们认为与转录调节区域结合的因素通过RAS修饰，结合活性改变是诱导下降的原因。 2。为了分离受C-FOS基因产物调控的转录基因，用C-FOS衍生物TPA处理小鼠成骨细胞4小时以生成cDNA文库。筛选的结果是克隆了由TPA诱导的八个基因，测序表明其中三个是金属硫硫蛋白，一个是骨桥蛋白，其余四个是未知的基因。创建了能够人为控制C-FOS表达的质粒，并引入细胞以增加C-FOS的表达，并检查了上述基因表达的变化，这表明一种新型分离的基因（OTS-8）的表达受C-Fos基因产物调节。以上结果揭示了增殖信号与转录调控之间的相关性。