ユビキチンシステムのインビボイメージング法の開発

泛素系统体内成像方法的开发

基本信息

批准号：
19044045
负责人：
今村健志
金额：
$ 4.22万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19044045/
关键词：
バイオテクノロジーシグナル伝達酵素生体分子細胞・組織

项目摘要

本研究の目的は、TGF-β/BMPシグナルを調節するユビキチンシステムをin vivoで可視化し、その薬物や核酸医薬に対する反応性を生体で評価することである。具体的には、細胞の中で、1)基質(TGF-β/BMP レセプターとシグナル伝達分子Smad)とそのユビキチンリガーゼ(E3)であるSmurfl/2、Arkadiaの結合、2)基質のユビキチン化を、SplitGFP(蛍光)とSplitルシフェラーゼ(発光)の系を用いて検出し、さらに、それを生きているマウスの中で解析することで、ユビキチン化の時空間的シグナル制御とその薬剤に対する反応性を明らかにする。さらに、ユビキチンリガーゼの生理的病的意義やその制御メカニズムを明らかにする。本年度は、SplitGFPのシステムを用いてTGF-β/BMPのシグナル伝達分子SmadとHECT型E3リガーゼSmurfl/2およびRING型E3リガーゼArkadiaの結合を細胞レベルで可視化することに成功した。それぞれの結合には、Split GFPと目的蛋白の間のリンカー部分の長さが重要なことを明らかにし、その指摘条件を探った。一方、ユビキチンリガーゼの制御メカニズムについては、HECT型E3リガーゼSmurflによるSmadのユビキチン化・分解がイソメラーゼPinlによって制御されていることを明らかにし、さらに、Smurflがファミリー分子Smurf2によって分解制御を受けることを解明した。また、RING型E3リガーゼArkadiaが筋分化の制御にか係っていることを示した。

本研究的目的是可视化体内调节 TGF-β/BMP 信号的泛素系统，并评估其对体内药物和核酸药物的反应性。具体来说，在细胞中，1）底物（TGF-β/BMP受体和信号转导分子Smad)及其泛素连接酶(E3)Smurfl/2和Arkadia，2)底物的泛素化的结合使用Split GFP(荧光)和Split荧光素酶(发光)系统检测。通过在活体小鼠中进行分析，我们将阐明泛素化的时空信号控制及其对药物的反应。此外，我们还将阐明泛素连接酶的生理和病理意义及其调控机制。今年，我们使用SplitGFP系统成功地在细胞水平上可视化了TGF-β/BMP信号转导分子Smad与HECT型E3连接酶Smurfl/2和RING型E3连接酶Arkadia的结合。我们阐明了 Split GFP 和目标蛋白之间的接头长度对于每个键都很重要，并研究了其条件。另一方面，关于泛素连接酶的控制机制，我们揭示了HECT型E3连接酶Smurfl对Smad的泛素化和降解是由异构酶Pinl控制的，并进一步揭示了Smurfl的降解是由家族控制的分子 Smurf2 做到了。我们还表明，RING 型 E3 连接酶 Arkadia 参与肌肉分化的调节。

项目成果

期刊论文数量（15）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Arkadia induces degradation of SnoN and c-Ski to enhance transforming growth factor-β signaling

DOI：
10.1074/jbc.m701294200
发表时间：
2007-07-13
期刊：
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
影响因子：
4.8
作者：
Nagano, Yoshiko;Mavrakis, Konstantinos J.;Miyazawa, Keiji
通讯作者：
Miyazawa, Keiji

癌研究におけるインビボバイオイメージングの応用

体内生物成像在癌症研究中的应用

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Moren A;Imamura T (他3名;2番目);Takeshi Imamura;Takeshi Imamura;今村健志;今村健志
通讯作者：
今村健志

Transforming growth factor-β promotes survival of mammary carcinoma cells through induction of antiapoptotic transcription factor DEC1

DOI：
10.1158/0008-5472.can-07-1522
发表时间：
2007-10-15
期刊：
CANCER RESEARCH
影响因子：
11.2
作者：
Ehata, Shogo;Hanyu, Aki;Miyazono, Kohei
通讯作者：
Miyazono, Kohei

光を利用した骨・血管と癌のin vivoリアルタイムイメージング

利用光对骨骼、血管和癌症进行体内实时成像

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Moren A;Imamura T (他3名;2番目);Takeshi Imamura;Takeshi Imamura;今村健志;今村健志;今村健志;今村健志;今村健志;今村健志;今村健志
通讯作者：
今村健志

癌微小環境のインビボ光イメージング

癌症微环境的体内光学成像

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Moren A;Imamura T (他3名;2番目);Takeshi Imamura;Takeshi Imamura;今村健志;今村健志;今村健志;今村健志;今村健志
通讯作者：
今村健志

DOI：
{{ item.doi }}
发表时间：
{{ item.publish_year }}
期刊：
{{ item.journal_name }}
影响因子：
{{ item.factor }}
作者：
{{ item.authors }}
通讯作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ journalArticles.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ monograph.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ sciAawards.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ conferencePapers.updateTime }}

作者：
{{ item.author }}

数据更新时间：{{ patent.updateTime }}

今村健志其他文献

生命のダイナミズム・不均一性・確率性・〜個体で細胞を「みて」「知る」-

生命的动态性、异质性和随机性——“看到”和“了解”细胞作为个体——

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
中島利博;八木下尚子他2名;Ito I et al.;Kimura A et al.;Kashiwagi Y et al.;Hanyu A et al.;Koinuma D at al.;Kido S et al.;Nakano A et al.;Takahata et al.;Tominaga H et al.;Horiguchi K et al.;Koinuma D et al.;Yuzawa H et al.;Fuknnaga E et al.;Tominaga H et al.;Inoue Y et al.;Katsuno Y et al.;今村健志;今村健志;今村健志;今村健志;今村健志;Takeshi Imamura;Takeshi Imamura;今村健志;今村健志;今村健志
通讯作者：
今村健志