フィロウイルスの細胞侵入機構と病原性発現に関する研究

丝状病毒细胞侵袭机制及致病性研究

• 批准号: 19041001
• 负责人: 高田 礼人
• 金额: $ 6.53万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19041001/
• 关键词: ウイルス; 感染症; 病原性; レセプター; 細胞侵入機構; フィロウイルス; 表面糖蛋白質; 抗体; レクチン; 細胞侵入

フィロウイルスは霊長類に重篤な出血熱を引き起こし、その致死率は90%近くに及ぶこともある。マクロファージや樹状細胞および肝細胞はウイルスの生体内における標的細胞であり、これらの細胞への感染が病原性発現に関与していると考えられている。フィロウイルスの表面糖蛋白質GPはこれらの細胞に発現しているC型レクチンと結合してウイルスの侵入効率を上げることが知られている。本研究では、フィロウイルスのプロトタイプであるマールブルグウイルス(MARV)のC型レクチン介在性細胞侵入機構について、病原性の異なる2つの株を用いて解析を行った。MARVのGPを持つシュードタイプウイルスを、ヒトのガラクトース型C型レクチンhMGLまたは樹状細胞に発現するC型レクチンDC-SIGNを発現させたK562細胞に接種し、フローサイトメーターを用いてGFP陽性のウイルス感染細胞数から各細胞に対する感染価を測定した。霊長類に強い病原性を示すAngola株のGPを持つシュードタイプウイルスは、比較的弱い病原性のMusoke株のGPを持つものよりもレクチン発現細胞への感染性が高いことが判明した。また、547番目のアミノ酸(Angola株 : グリシン、Musoke株 : バリン)がレクチン介在性の細胞侵入効率を決定していることが明らかとなった。MARVの病原性とレクチン発現細胞への感染性との間に相関が見られたことから、C型レクチン介在性の細胞侵入効率はMARVの病原性に関与する因子の一つである可能性がある。同定された547番目のアミノ酸は細胞への吸着に重要とされているレセプター結合領域とは離れているが、fusion peptideの近傍である。したがって、レクチン介在性細胞侵入において、このアミノ酸がfusion peptideが露出するための立体構造変化や膜融合活性に重要であることが示唆された。

丝状病毒会引起灵长类动物严重出血热，死亡率可达90%。巨噬细胞、树突状细胞和肝细胞是病毒体内的靶细胞，这些细胞的感染被认为参与了致病性的表达。已知丝状病毒表面糖蛋白GP与这些细胞中表达的C型凝集素结合并提高病毒进入效率。在本研究中，我们使用两种具有不同致病性的毒株分析了马尔堡病毒（MARV）（一种原型丝状病毒）的C型凝集素介导的细胞侵袭机制。将携带MARV GP的假型病毒接种到树突状细胞中表达人半乳糖型C型凝集素hMGL或C型凝集素DC-SIGN的K562细胞中，使用流式细胞仪检测GFP阳性细胞的感染滴度。细胞数是根据病毒感染细胞的数量来确定的。结果发现，带有对灵长类动物高致病性的安哥拉株GP的假型病毒，比带有致病性相对较弱的Musoke株GP的假型病毒对凝集素表达细胞的感染性更强。还揭示了氨基酸编号547（安哥拉菌株：甘氨酸，Musoke菌株：缬氨酸）决定了凝集素介导的细胞侵袭效率。由于观察到MARV致病性和对凝集素表达细胞的感染性之间存在相关性，因此C型凝集素介导的细胞进入效率可能是涉及MARV致病性的因素之一。鉴定出的氨基酸编号547远离被认为对于细胞吸附很重要的受体结合区域，但靠近融合肽。因此，表明该氨基酸对于凝集素介导的细胞侵袭中融合肽的暴露和膜融合活性的构象变化很重要。

项目成果

Characterization of H3N6 avian influenza virus isolated from a wild white pelican in Zambia

从赞比亚野生白鹈鹕中分离出的 H3N6 禽流感病毒的特征

• DOI: 10.1007/s00705-009-0467-9
• 发表时间: 2009
• 期刊: Arch Virol
• 影响因子: 2.7
• 作者: Simulundu E;Mweene A;Tomabechi D;Hang' ombe B;Ishii A;Suzuki Y;Nakamura I;Sawa H;Sugimoto C;Ito K;Kida H;Saiwana L;Takada A
• 通讯作者: Takada A

Epitopes required for antibody-dependent enhancement of Ebola virusinfection

埃博拉病毒感染的抗体依赖性增强所需的表位

• 发表时间: 2007
• 期刊: J. Infect. Dis. 196(Suppl2)
• 作者: Takada;A.;Ebihara;H.;Feldmann;H.;Geisbert;T.W.;Kawaoka Y.
• 通讯作者: Kawaoka Y.

Genetically destined potentials for N-linked glycosylation of influenza virus hemagglutinin

• DOI: 10.1016/j.virol.2008.03.036
• 发表时间: 2008-07-05
• 期刊: VIROLOGY
• 影响因子: 3.7
• 作者: Igarashi, Manabu;Ito, Kimihito;Takada, Ayato
• 通讯作者: Takada, Ayato

インフルエンザウイルスのPB2タンパク質に会合する宿主細胞タンパクの検索とその機能解析

流感病毒PB2蛋白相关宿主细胞蛋白的寻找及其功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 塩崎 拓也;岩井 淳;河岡 義裕;高田 礼人;喜田 宏;宮崎 忠昭
• 通讯作者: 宮崎 忠昭

Identification of the Molecular Determinants Required for Duck H9N2 Influenza Virus Replication in Chickens

鸭 H9N2 流感病毒在鸡体内复制所需的分子决定因素的鉴定

• 发表时间: 2008
• 期刊: Options for the control of influenza VI 1
• 作者: 藤井克樹;早坂大輔;小池 智;北浦一考;高崎智彦;鈴木隆二;倉根一郎;早坂 大輔;Reiko Yoshida;早坂 大輔;Manabu Igarashi;早坂 大輔;Noriko Kishida
• 通讯作者: Noriko Kishida