染色体恒常性維持における新規DNAモータータンパク質の機能

新型DNA马达蛋白在维持染色体稳态中的功能

基本信息

  • 批准号:
    18058013
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.82万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

DNA損傷、障害によって引き起こされるDNA複製阻害を回避する機構には、DNA修復、DNA相同組i換え、DNA損傷チェックポイント、ヒストン修飾など多様な核内機構が連携して複雑なネットワークを形成している。本研究では、これらネットワーク形成に関与するDNAモータータンパク質(出芽酵母Mgs1、分裂酵母Fbh1)の機能解析を行い、以下のような結果を得た。1.大腸菌からヒトまで保存されたMgs1の解析から、 Mgs1がDNAクランプ(PCNA)と物理的相互作用することを発見した。さらに、この結合が、RAD6(DNA損傷トレランス)経路に依存したPCNAのユビキチン化を負に制御することで、通常増殖期におけるRAD6経路の不適切な活性化に伴うゲノム不安定化を抑える働きをしていることを明らかにした。2.分裂酵母Fbh1は、N末にユビキチンE3リガーゼであるSCF複合体形成に必要なF-boxドメイン、 C末にRep/UvrDタイプDNAヘリカーゼドメインを持っている。F-box変異体を用いた研究から、F-boxドメインが、DNA損傷に依存したフォーカス形成に必須であることを発見した。さらに、このF-boxドメインの変異体は、核内への移行に欠損が生じていることを見いだし、SCF(Fbh1)複合体の形成が核移行に必須であることを明らかにした。今回の2つのゲノム安定性に関わるモータータンパク質の研究から、SUMO/ユビキチン修飾経路がこれらのタンパク質を適切な場所ヘリクルートする動態制御因子として機能していることが明らかになった.
避免DNA损伤和损伤引起的DNA复制抑制的机制包括多种核机制,例如DNA修复,DNA同源重组,DNA损伤检查点和组蛋白修饰,以形成复杂的网络。在这项研究中,对参与这些网络形成的DNA运动蛋白进行了功能分析(MGS1,FBH1,FBH1),并获得结果如下。 1。从大肠杆菌到人类保守的MGS1分析表明,MGS1与DNA夹(PCNA)物理相互作用。此外,我们已经揭示了这种结合对PCNA的泛素化的调节,这取决于RAD6(DNA损伤耐受性)途径,从而抑制了正常增殖阶段中RAD6途径不适当激活的基因组不稳定。 2。裂变酵母FBH1具有形成SCF复合物,N末端的泛素E3连接酶的F-box域,以及C端子上的Rep/UVRD类型DNA旋转酶结构域。使用F-box突变体的研究发现,F-box结构域对于DNA损伤依赖性聚焦形成至关重要。此外,F-box结构域中的突变体在易位进入细胞核中存在缺陷,表明SCF(FBH1)复合物的形成对于核易位至关重要。目前对两种基因组稳定性相关运动蛋白的研究表明,Sumo/ubiquitin修饰途径是适当栖息的这些蛋白质的动力学调节剂。

项目成果

期刊论文数量(14)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Essential and distinct roles of the F-box and helicase domains of Fbhl in DNA damage repair.
Fbhl 的 F-box 和解旋酶结构域在 DNA 损伤修复中具有重要而独特的作用。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Sakaguchi;C.;et;al.
  • 通讯作者:
    al.
生化学
生物化学
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    前田礼男;穂積俊矢;谷口喜一郎;奥村高志;松野健治
  • 通讯作者:
    松野健治
Cooperative roles of vertebrate Fbh1 and Blm DNA helicases in avoidance of crossovers during recombination initiated by replication fork collapse
  • DOI:
    10.1128/mcb.02043-06
  • 发表时间:
    2007-04-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    5.3
  • 作者:
    Kohzaki, Masaoki;Hatanaka, Atsushi;Takeda, Shunichi
  • 通讯作者:
    Takeda, Shunichi
Direct observation of DNA rotation during branch migration of Holliday junction DNA by Escherichia coli RuvA-RuvB protein complex
A SUMO-like domain protein, Esc2, is required for genome integrity and sister chromatid cohesion in Saccharomyces cerevisiae
  • DOI:
    10.1534/genetics.107.086249
  • 发表时间:
    2008-09-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.3
  • 作者:
    Ohya, Tomoko;Arai, Hirokazu;Hishida, Takashi
  • 通讯作者:
    Hishida, Takashi
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  • 通讯作者:
    菱田 卓
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  • 通讯作者:
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