精子の融合能におけるメンブレントラフィックの役割

膜运输在精子融合能力中的作用

基本信息

批准号：
18050021
负责人：
井上直和
金额：
$ 3.71万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18050021/
关键词：
受精精子卵子遺伝子改変動物膜融合

项目摘要

受精の融合機構については卵子上の融合因子としてCD9が最近報告されたのみで精子側の必須因子は同定されていなかった。申請者のこれまでの成果として、融合を特異的に阻害するモノクローナル抗体を用いて、世界で始めて精子側の合因子Izumoを発見した(Nature,InoueNetal,2005)。Izumoノックアウト精子は融合の準備段階である先体反応まで正常に進行するが、その後の卵子との融合が完全に阻害される。さらに融合を顕微授精法でバイパスすると正常に発生することから、Izumoはまさに精子と卵子の融合にだけ機能する世界で始めて発見された精子側の融合因子であった。平成19年度は、先体反応に伴う精子の融合因子Izumoの局在変化をmRed融合タンパク質によって可視化することにより、Izumoを指標とした精子のメンブレントラフィックをバイオイメージングできる系を確立することを目的に、この遺伝子をもつTGマウスを作製した。このマウスの精子にカルシウムイオノフォアを処理することで先体反応を誘起し、継時的にIzumoの局在変化を観察すると抗体による観察では見られなかった、先体反応中にIzumoがacrosomalcapからequatorialsegmentに移動し、最終的にtacrosomalregionに蓄積される様子が観察された。これはinvivoで採取された卵透明帯通過後の精子でも同様に観察された。またIzumoノックアウトバックグランドでこのTGを1もつ雄マウスの妊孕性が回復したことから、受精の膜融合の際に機能的なIzumoが正しく局在することを明らかにできた。今後はこれらマウスを用いてさらに詳細なIzumoの局在変化とその意義に関する解析を行う予定である。

对于受精融合机制，CD9最近才据报道是卵子上的融合因子，并且没有确定精子侧的基本因素。到目前为止，由于申请人的结果，他使用单克隆抗体特别抑制融合的单克隆抗体发现了世界上第一个联合因子Izumo（自然，Inouenetal，2005年）。 Izumo敲除精子正常进行尖端反应，这是一个融合准备阶段，但与随后的卵的融合完全抑制。此外，Izumo是仅在仅用于精子和鸡蛋融合的世界中发现的第一个精子融合因子，这是通过麦克风通过微观方法融合的融合。在2007年，建立一个可以用izumo作为izumo的精子的系统，可以通过可视化与该基因的尖端相关的精子融合因子的家用变化。生产。通过将钙离子载体加工到该小鼠的精子中，诱导了尖端反应，并且在抗体中没有看到izumo的局部变化，而izumo在尖端中，而Izumo从Acrosomalcap到赤道。 art骨区。在Invivo收集的透明带后，还观察到了精子。此外，在Izumo敲除背景上恢复了该TG的生育能力，表明功能性Izumo在受精膜融合期间正确地位于正确的位置。将来，我们计划使用这些小鼠来分析更详细的本地变化及其意义。