新しく見つかった線状体投射ニューロン群の関わる神経回路の構造と機能についての研究

新发现的纹状体投射神经元神经回路的结构和功能研究

基本信息

批准号：
18019017
负责人：
古田貴寛
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18019017/
关键词：
線条体大脳皮質視床 neurokinin vesicular glutamate tra vesicular glutamate transporter

项目摘要

目的:一つ一つの線条体ニューロンに対して大脳皮質及び視床由来の興奮性入力がどのように入力するのかを調べる。ウイルス液を線条体に注入し、単一のニューロンが区別できる密度でニューロンをゴルジ染色様に標識する。GFPで標識されたニューロンがneurokinin B、dynorphin、enkephalinのいずれを発現するニューロンであるかを免疫染色によって分類する。Vesicular Glutamate Transporter 1,2に対する免疫染色を行い、入力神経終末とGFPで標識されたニューロンの樹状突起を高倍率で共焦点レーザー顕微鏡を用いて撮影し、樹状突起に対する興奮性神経終末の近接する数を数えて定量的な所見とし解析を行う。結果:18年度中にレーザー顕微鏡による実験の条件は最適化しデータも相当数集まった。19年度はそのデータ解析と電子顕微鏡による研究を行った。興奮性神経終末が近接する場所を、樹状突起の棘尖端、棘根元、幹の3種類にわけ精密に解析したところ、dynorphinニューロンとenkephalinニューロンの間で差が無かったのに対し、neurokinin Bニューロンに対する入力は他の2つのグループに対する入力よりも少ないことが分かった。樹状突起の単位長さあたりの棘の数と近接する興奮性神経終末の数を比べると、線条体中型有棘ニューロンのほとんどの棘には大脳皮質あるいは視床からの興奮性入力が入っていることは示唆された。また、レーザー顕微鏡で観察した樹状突起と神経終末の接触が実際にシナプス形成しているかどうかを確かめるために電子顕微鏡で観察を行った。その結果、GFPで標識された樹状突起に興奮性神経終末がシナプス結合しているところが観察された。より確実な解析のため電子顕微鏡写真から三次元再構築を試みているところである

目的：调查如何在每个线神经元中输入大脑皮层和eLlium衍生的娱乐。将病毒溶液注入线中，并用一个可以通过单个神经元区分的密度标记神经元。 GFP指示的神经元是通过免疫测定法表达神经蛋白B，dynorphin或Enkephalin的神经元。囊泡谷氨酸转运蛋白免疫 - 延伸，输入神经的末端和使用高磁化物在GFP中标记的神经元的投影，使用CO-焦点激光显微镜射击到兴奋的端口末端，以造成树枝状预测的兴奋性进行分析作为定量发现。结果：在2018年，优化了使用激光显微镜的实验条件，并大量收集了数据。在FY19中，进行了使用电子显微镜的数据分析和研究。兴奋性神经系统末端的地方接近动态投影的末端，三种类型的树干，一个躯干，但是Dynorphin神经元和Enkephalin神经元之间没有区别神经元小于其他两组的输入。将树突投影的每单位长度的刺数与接近销钉末端的兴奋神经的数量进行比较，介质大的神经元中的大多数刺都进入了大脑皮层或令人振奋的输入那是。此外，使用电子显微镜进行电子显微镜，以确定是否实际形成了用激光显微镜观察到的树突状和神经端的接触。结果，观察到，令人兴奋的神经以GFP标记的树突状突起的sinaps结合而结束。我们正在尝试从电子显微照片构建三维重建，以进行更可靠的分析。