好中球NADPHオキシダーゼの細胞質から膜への信号変換に関する構造生物学的研究

中性粒细胞NADPH氧化酶胞质至胞膜信号转导的结构生物学研究

基本信息

批准号：
17048001
负责人：
小椋賢治
金额：
$ 3.26万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

好中球の活性酸素発生系にて活性酸素発生を触媒するNADPHオキシダーゼは細胞質因子(D47Dhox, p67phox, p40phox)と膜タンパク質(gp91phox, p22phox)の複合体である.NADPHオキシダーゼの活性化には,それぞれの因子の立体構造変化,および,それにより誘起される分子間相互作用の再構成が必須である.研究代表者は,細胞質因子タンパク質と膜タンパク質間において,オキシダーゼ活性化のシグナルが分子間でどのように伝達されていくのか,という間題点に関して,X線結晶構造解析およびNMRの手法を用いて,立体構造およびダイナミクスの見地からの解明を目指している.p47phoxの分子認識機構(論文1および2)好中球の活性酸素発生系にて活性酸素発生を触媒するNADPHオキシダーゼは細胞質因子と膜タンパク質の複合体である.活性酸素発生系の休止状態においては,細胞質因子p47phoxは分子内マスクされており,膜タンパク質p22phoxと結合できないが,細胞刺激にともない分子内マスクが解除され,p22phoxと結合し,活性酸素を発生できるようになる.研究代表者らは,核磁気共鳴の手法を用いて,活性化状態におけるp47phoxの立体構造を解析した.その結果,活性化状態の複合体立体構造において,p22phoxに関して従来考えられていた相互作用必須領域よりもC未端側に10アミノ酸残基程度延長した領域がp47phox-p22phoxタンパク質間相互作用に重要であることがわかった.

NADPH氧化酶催化嗜中性粒细胞，细胞质因子（D47DHOX，p67phox，p40phox）和膜蛋白（GP91PHOX）（NADPH氧化酶复合物是p22phox的复合物和综合因子的相互作用的复合物）的相互作用，促氧化物的相互作用和膜相互作用，催化了每种因子和综合因子，并且相互作用的相互作用是综合的，则构成了综合因子，并且相互作用的相互作用，催化了nadph氧化酶的相互作用。通过它，主要研究者旨在阐明每个因素的构象变化以及在X射线晶体结构分析和NMR技术的构型和动力学的角度上诱导细胞质因子蛋白和膜蛋白之间的分子间相互作用。中性粒细胞中的氧气是细胞质因子和膜蛋白的复合物，在活性氧气产生系统的静止状态下，细胞质因子p47phox被内部掩盖并不能与膜蛋白p22phox结合，但与细胞刺激的蛋白质结合，释放了p.222生成。研究人员使用核磁共振技术分析了激活状态下p47phox的三维结构。结果，他们发现，在激活状态的复杂结构中，一个区域将约10个氨基酸残基延伸到先前考虑的P22Phox的基本相互作用区域的C- untere侧，这对于P47Phox-P22Phox蛋白相互作用很重要。