B細胞分化における免疫グロブリンの品質管理とその破綻

免疫球蛋白质量控制及其在 B 细胞分化过程中的失败

• 批准号: 17047013
• 负责人: 烏山 一
• 金额: $ 6.14万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17047013/
• 关键词: B細胞分化; プレB細胞化; 代替L鎖; 品質; 免疫グロブリン; 増殖; 分化; レパートリー; プレB細胞レセプター

昨年度の研究で確立した、in vitroでのプレB細胞レセプター(preBCR)発現による骨髄プロB細胞の分化誘導システムを用いて、「品質」の異なる種々のIgHμ鎖をμ鎖欠損マウス由来の骨髄プロB細胞に発現させた。導入したμ鎖の代替L鎖との結合能に比例して、preBCRの発現レベル、preBCRからのシグナル強度、プレB細胞の増殖・分化の程度に違いが認められたが、preBCR発現の経時変化は酷似していた。すなわち、preBCR発現は一過性で、μ鎖遺伝子導入後1日目をピークとして、いずれの場合も3日目には発現が消失した。これまでの研究では、preBCRからのシグナルによって代替L鎖遺伝子の転写が抑制される結果preBCRの発現が終焉するとされてきたが、本研究での解析から、転写抑制がおこる以前にすでに蛋白レベルでpreBCRの発現抑制がおきていることが判明した。preBCRのシグナル伝達にかかわるBLNKを欠損するマウスでは、プレB細胞上でのpreBCRの発現停止がおこらず、プレB細胞の白血病化を誘導することが示されている。したがって、プレB細胞の増殖制御には、蛋白レベルでの素早いpreBCRの発現制御が必要なものと考えられる。そこでBLNK欠損プレB細胞株に、発現誘導型のBLNK発現ベクターを導入して、preBCRの発現終焉を誘導できる系を樹立した。その結果、preBCRからのシグナルにより、代替L鎖の転写抑制以前に、preBGRの細胞内への取り込み(internalization)が促進し、細胞表面でのpreBCR発現終焉がこおることがわかった。このpreBCRの発現制御の破綻によりプレB細胞が白血病化すると考えられることから、この系を用いて、現在その分子機構を解析している。

使用该系统通过在去年研究中建立的体外Pre-B细胞受体（PREBCR）表达来诱导髓样概率细胞的分化，在MU链缺陷型小鼠的骨髓概率细胞中表达了各种差异质量链的IGHμ链。尽管在PEBCR的表达水平，PERBCR的信号强度以及PreB细胞的增殖程度与引入μ链与替代L链的结合能力成比例的差异，但随着时间的推移，PERBCR表达的变化非常相似。也就是说，prebcr表达是短暂的，在引入μ链基因后的第一天达到峰值，在每种情况下，表达在第三天消失。先前的研究表明，PERBCR通过PREBCR信号抑制了替代L链基因的转录，但是在这项研究中的分析表明，在转录抑制发生之前，PREBCR的表达已经在蛋白质水平上受到抑制。缺乏涉及PREBCR信号传导的BLNK的小鼠不会停止在PERB细胞上表达PREBCR，并且已显示出诱导PERB细胞的白血病。因此，人们认为，蛋白质水平上的快速PREBCR表达控制是Preb细胞控制增殖所必需的。因此，将表达诱导的BLNK表达载体引入了BLNK缺陷的PER-B细胞系中，并建立了一个可以诱导PERBCR表达终结的系统。结果表明，PREBCR的信号在对替代L链的转录抑制之前促进了PREBGR的内部化，从而导致细胞表面上的PreBCR表达结束。人们认为，由于PERBCR的表达控制失败，PERB细胞将成为白血病，因此我们目前正在使用该系统分析其分子机制。

项目成果

免疫研究集中マスター

免疫学研究强化硕士

• 发表时间: 2005
• 作者: Mukai;K.;Matsuoka;K.;Taya;C.;Suzuki;H.;Yokozeki H.;Nishioka;K.;Hirokawa;K.;Etori;M.;Yamashita;M.;Kubota;T.;Minegishi;Y.;Yonekawa;H.;Karasuyama;H.;烏山 一;烏山 一
• 通讯作者: 烏山 一

生涯教育シリーズ67 日本医師会雑誌特別号 分りやすい免疫疾患

终身教育系列67 日本医学会杂志特刊 浅显易懂的免疫疾病

• 发表时间: 2005
• 作者: Mukai;K.;Matsuoka;K.;Taya;C.;Suzuki;H.;Yokozeki H.;Nishioka;K.;Hirokawa;K.;Etori;M.;Yamashita;M.;Kubota;T.;Minegishi;Y.;Yonekawa;H.;Karasuyama;H.;烏山 一;烏山 一;烏山 一
• 通讯作者: 烏山 一

BASH-novel PKC-Raf-1 pathway of pre-BCR signaling induces κ gene rearrangement.

BASH 新型 PKC-Raf-1 前 BCR 信号传导途径诱导 κ 基因重排。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Blood 108
• 作者: Yamamoto;M.;Hayashi;K.;Nojima;T.;Matsuzaki;Y.;Kawano;Y.;Karasuyama;H.;Goitsuka;R.;Kitamura D.
• 通讯作者: Kitamura D.

Dok-1 and Dok-2 are negative regulators of lipopolysaccharide-induced signaling.

• DOI: 10.1084/jem.20041817
• 发表时间: 2005-02-07
• 期刊: The Journal of experimental medicine
• 作者: Shinohara H;Inoue A;Toyama-Sorimachi N;Nagai Y;Yasuda T;Suzuki H;Horai R;Iwakura Y;Yamamoto T;Karasuyama H;Miyake K;Yamanashi Y
• 通讯作者: Yamanashi Y

Humanc Tyk2 deficiency reveals requisite roles of Tyk2 in multiple cytokine signals involved in innate and acquired immunity.

Humanc Tyk2 缺陷揭示了 Tyk2 在涉及先天性和获得性免疫的多种细胞因子信号中的必要作用。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Immunity 25
• 作者: Minegishi;Y.;Saito;M.;Morio;T.;Watanabe;K.;Agematsu;K.;Tsuchiya;S.;Takada;H.;Hara;T.;Kawamura;N.;Ariga;T.;Kaneko;H.;Kondo;N.;Tsuge;T.;Yachie;A.;Sakiyama;Y.;Iwata;T.;Bessho;F.;Ohishi;T.;Joh;K.;Imai;K.;Kogawa;K.;Shi
• 通讯作者: Shi