B細胞分化における免疫グロブリンの品質管理とその破綻

免疫球蛋白质量控制及其在 B 细胞分化过程中的失败

基本信息

批准号：
17047013
负责人：
烏山一
金额：
$ 6.14万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度の研究で確立した、in vitroでのプレB細胞レセプター(preBCR)発現による骨髄プロB細胞の分化誘導システムを用いて、「品質」の異なる種々のIgHμ鎖をμ鎖欠損マウス由来の骨髄プロB細胞に発現させた。導入したμ鎖の代替L鎖との結合能に比例して、preBCRの発現レベル、preBCRからのシグナル強度、プレB細胞の増殖・分化の程度に違いが認められたが、preBCR発現の経時変化は酷似していた。すなわち、preBCR発現は一過性で、μ鎖遺伝子導入後1日目をピークとして、いずれの場合も3日目には発現が消失した。これまでの研究では、preBCRからのシグナルによって代替L鎖遺伝子の転写が抑制される結果preBCRの発現が終焉するとされてきたが、本研究での解析から、転写抑制がおこる以前にすでに蛋白レベルでpreBCRの発現抑制がおきていることが判明した。preBCRのシグナル伝達にかかわるBLNKを欠損するマウスでは、プレB細胞上でのpreBCRの発現停止がおこらず、プレB細胞の白血病化を誘導することが示されている。したがって、プレB細胞の増殖制御には、蛋白レベルでの素早いpreBCRの発現制御が必要なものと考えられる。そこでBLNK欠損プレB細胞株に、発現誘導型のBLNK発現ベクターを導入して、preBCRの発現終焉を誘導できる系を樹立した。その結果、preBCRからのシグナルにより、代替L鎖の転写抑制以前に、preBGRの細胞内への取り込み(internalization)が促進し、細胞表面でのpreBCR発現終焉がこおることがわかった。このpreBCRの発現制御の破綻によりプレB細胞が白血病化すると考えられることから、この系を用いて、現在その分子機構を解析している。

利用去年研究建立的基于体外前B细胞受体（preBCR）表达的骨髓pro-B细胞分化诱导系统，从骨髓pro-B中提取出各种不同“质量”的IgH μ链源自 μ 链缺陷小鼠的细胞，在 B 细胞中表达。观察到preBCR的表达水平、来自preBCR的信号强度以及与引入的μ链与替代L链的结合能力成比例的preB细胞的增殖和分化程度的差异非常相似。也就是说，在所有情况下，preBCR表达都是短暂的，在引入μ链基因后的第一天达到峰值，并在第三天消失。先前的研究表明，preBCR 的表达是由于 preBCR 信号抑制替代 L 链基因的转录而终止的，但本研究的分析表明，在转录抑制发生之前，preBCR 的表达已经在蛋白质水平上受到抑制。结果发现preBCR的表达受到抑制。研究表明，在缺乏参与 preBCR 信号转导的 BLNK 的小鼠中，preBCR 表达不会停止在 preB 细胞上，从而导致 preB 细胞发生白血病转化。因此，在蛋白质水平上快速控制preBCR表达被认为对于控制前B细胞的增殖是必要的。因此，我们将表达诱导的BLNK表达载体引入BLNK缺陷的前B细胞系中，建立可以诱导前BCR表达终止的系统。结果发现，来自preBCR的信号促进preBGR内化到细胞中，然后抑制替代L链的转录，导致细胞表面的preBCR表达终止。由于人们认为前BCR表达调节的破坏会导致前B细胞变成白血病，因此我们目前正在使用该系统来分析分子机制。

项目成果

期刊论文数量（14）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

免疫研究集中マスター

免疫学研究强化硕士

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
影响因子：
0
作者：
Mukai;K.;Matsuoka;K.;Taya;C.;Suzuki;H.;Yokozeki H.;Nishioka;K.;Hirokawa;K.;Etori;M.;Yamashita;M.;Kubota;T.;Minegishi;Y.;Yonekawa;H.;Karasuyama;H.;烏山一;烏山一
通讯作者：
烏山一

生涯教育シリーズ67 日本医師会雑誌特別号分りやすい免疫疾患

终身教育系列67 日本医学会杂志特刊浅显易懂的免疫疾病

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
影响因子：
0
作者：
Mukai;K.;Matsuoka;K.;Taya;C.;Suzuki;H.;Yokozeki H.;Nishioka;K.;Hirokawa;K.;Etori;M.;Yamashita;M.;Kubota;T.;Minegishi;Y.;Yonekawa;H.;Karasuyama;H.;烏山一;烏山一;烏山一
通讯作者：
烏山一

BASH-novel PKC-Raf-1 pathway of pre-BCR signaling induces κ gene rearrangement.

BASH 新型 PKC-Raf-1 前 BCR 信号传导途径诱导 κ 基因重排。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Blood 108
影响因子：
0
作者：
Yamamoto;M.;Hayashi;K.;Nojima;T.;Matsuzaki;Y.;Kawano;Y.;Karasuyama;H.;Goitsuka;R.;Kitamura D.
通讯作者：
Kitamura D.

Dok-1 and Dok-2 are negative regulators of lipopolysaccharide-induced signaling.

DOI：
10.1084/jem.20041817
发表时间：
2005-02-07
期刊：
The Journal of experimental medicine
影响因子：
0
作者：
Shinohara H;Inoue A;Toyama-Sorimachi N;Nagai Y;Yasuda T;Suzuki H;Horai R;Iwakura Y;Yamamoto T;Karasuyama H;Miyake K;Yamanashi Y
通讯作者：
Yamanashi Y

Humanc Tyk2 deficiency reveals requisite roles of Tyk2 in multiple cytokine signals involved in innate and acquired immunity.

Humanc Tyk2 缺陷揭示了 Tyk2 在涉及先天性和获得性免疫的多种细胞因子信号中的必要作用。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Immunity 25
影响因子：
0
作者：
Minegishi;Y.;Saito;M.;Morio;T.;Watanabe;K.;Agematsu;K.;Tsuchiya;S.;Takada;H.;Hara;T.;Kawamura;N.;Ariga;T.;Kaneko;H.;Kondo;N.;Tsuge;T.;Yachie;A.;Sakiyama;Y.;Iwata;T.;Bessho;F.;Ohishi;T.;Joh;K.;Imai;K.;Kogawa;K.;Shi
通讯作者：
Shi