移動中の神経細胞の挙動制御

迁移过程中神经元行为的控制

• 批准号: 17023039
• 负责人: 仲嶋 一範
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17023039/
• 关键词: 多極性移動細胞; シグナルシークエンストラップ; HiCEP法; 大脳皮質; 軸索ガイダンス; 電気穿孔法

マウス発生期大脳皮質における多極性移動細胞がいかなる細胞外シグナルを受容し、その挙動が制御されているのかを明らかにするため、これらの細胞に発現し分泌シグナルを有する蛋白質(膜貫通蛋白質または分泌蛋白質。以下略してS/TMと記す)を同定することを目指した。そのため、まずは多極性移動細胞を多く含む部位をマウス大脳皮質から実体顕微鏡下でほぼ正確に切り出す手法を確立し、シグナルシークエンストラップ法(SST)によるS/TMの検索を行った。これまでに103クローンを得て、うち96クローンのin situ hybridizationを終えた。また、SSTと並行して、HiCEP法を使った検索も行った。すなわち、子宮内マウス胎児脳への電気穿孔法による遺伝子導入で緑色蛍光蛋白質(GFP)発現プラスミドを脳室面に導入し、多極性細胞が多くラベルされる時期、及び、その前段階として脳室帯細胞が多くラベルされる時期を検討した。次に、各々の時期に該当部位を切り出し、セルソーターで蛍光ラベルされた細胞をそれぞれ濃縮した。それらからRNAを抽出し、HiCEP法を用いて両者のトランスクリプトームを比較することにより、多極性細胞を多く含む画分に強く発現するピークを検索した。その結果、「多極性細胞画分」で5倍以上高いピークを示すクローン273個を同定した。HiCEPデータベースで各ピークを予測して得た2960遺伝子のうち、S/TMに絞って、計271のうち249遺伝子のin situ hybridizationを終えた。以上の結果、多極性細胞が多く局在する脳室下帯に発現する遺伝子を13個同定することができた。その内、受容体型膜蛋白質が5個、分泌蛋白質が1個であった。これらいずれの分子も、軸索ガイダンスに関わると推定されるものであった。以上の結果から、多極性移動細胞は、脳室下帯において軸索ガイダンスに深く関わっている可能性が考えられた。

为了澄清小鼠脑皮层中的细胞外信号多极迁移细胞接收并受到调节的行为，我们旨在鉴定这些细胞中表达的蛋白质（跨膜蛋白或分泌蛋白，以下称为S/TM），并具有分泌的信号。因此，我们首先建立了一种方法，几乎​​在立体显微镜下几乎准确地从小鼠脑皮质中切出了许多多极迁移细胞，并使用信号测序链（SST）搜索了S/TM。到目前为止，我已经获得了103个克隆，并且已经完成了其中96个克隆。另外，使用与SST并行的HICEP方法进行搜索。换句话说，我们研究了通过转染到子宫小鼠的胎儿大脑以及将许多多极细胞标记的时期以及许多心室区细胞被标记为初步步骤时，将绿色荧光蛋白（GFP）表达质粒引入心室表面。接下来，在每个时间段内切除相应的位点，并富含用细胞分落者标记的荧光。从它们中提取RNA，并使用HICEP方法比较两者的转录组，以搜索在许多多息肉细胞的馏分中强烈表达的峰。结果，在“多极细胞分数”中表现出273个克隆的峰值超过五倍以上。在通过预测HICEP数据库中的每个峰获得的2960个基因中，我们缩小到S/TM，并在总共271中完成249个基因的原位杂交。由于上述13个基因，在亚语区域中表达的13个基因，在其中确定了许多多极细胞，在其中确定了许多多极细胞。其中，发现了五种受体型膜蛋白，并发现了一种分泌的蛋白质。这两个分子都被认为参与了轴突引导。从以上结果来看，可以认为多极迁移细胞可能与脑室下区域中的轴突引导深深涉及。

项目成果

Neuronal migration in cortical development

• DOI: 10.1177/08830738050200040201
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: JOURNAL OF CHILD NEUROLOGY
• 影响因子: 1.9
• 作者: Kanatani, S;Tabata, H;Nakajima, K
• 通讯作者: Nakajima, K

神経細胞の移動と皮質の構築 改訂第二版 脳神経科学イラストレイテッド(森寿, 真鍋俊也, 渡辺雅彦, 岡野栄之, 宮川剛 編)

神经元的迁移和皮质的构建，修订版第二版，《神经科学图解》（由 Hisashi Mori、Toshiya Manabe、Masahiko Watanabe、Hideyuki Okano 和 Tsuyoshi Miyakawa 编辑）

• 发表时间: 2006
• 作者: Aramaki S;Hatta K.;Itsuki Ajioka;Shigeaki Kanatani;Chikako Kudo;Itsuki Ajioka;Masato Yozu;Itsuki Ajioka;Atsushi Kamiya;仲嶋一範;仲嶋一範
• 通讯作者: 仲嶋一範

Disrupted-in-Schizophrenia-1 in development of the cerebral cortex : perturbation by its schizophrenia-associated mutation

大脑皮层发育中的精神分裂症1被破坏：精神分裂症相关突变的干扰

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nature Cell Biol. 7(12)
• 作者: Aramaki S;Hatta K.;Itsuki Ajioka;Shigeaki Kanatani;Chikako Kudo;Itsuki Ajioka;Masato Yozu;Itsuki Ajioka;Atsushi Kamiya
• 通讯作者: Atsushi Kamiya

神経系の後期発生 -脳皮質構造の形成- 脳神経外科学大系 第一巻「神経科学」(河瀬斌 編)

神经系统的后期发育-脑皮质结构的形成-神经外科第1卷《神经科学》（河濑彬编）

• 发表时间: 2006
• 作者: Aramaki S;Hatta K.;Itsuki Ajioka;Shigeaki Kanatani;Chikako Kudo;Itsuki Ajioka;Masato Yozu;Itsuki Ajioka;Atsushi Kamiya;仲嶋一範
• 通讯作者: 仲嶋一範

Expression profiles of EphA3 at both the RNA and protein level in the developing mammalian forebrain

• DOI: 10.1002/cne.20551
• 发表时间: 2005-07-04
• 期刊: JOURNAL OF COMPARATIVE NEUROLOGY
• 影响因子: 2.5
• 作者: Kudo, C;Ajioka, I;Nakajima, K
• 通讯作者: Nakajima, K