移動中の神経細胞の挙動制御

迁移过程中神经元行为的控制

• 批准号: 17023039
• 负责人: 仲嶋 一範
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17023039/
• 关键词: 多極性移動細胞; シグナルシークエンストラップ; HiCEP法; 大脳皮質; 軸索ガイダンス; 電気穿孔法

マウス発生期大脳皮質における多極性移動細胞がいかなる細胞外シグナルを受容し、その挙動が制御されているのかを明らかにするため、これらの細胞に発現し分泌シグナルを有する蛋白質(膜貫通蛋白質または分泌蛋白質。以下略してS/TMと記す)を同定することを目指した。そのため、まずは多極性移動細胞を多く含む部位をマウス大脳皮質から実体顕微鏡下でほぼ正確に切り出す手法を確立し、シグナルシークエンストラップ法(SST)によるS/TMの検索を行った。これまでに103クローンを得て、うち96クローンのin situ hybridizationを終えた。また、SSTと並行して、HiCEP法を使った検索も行った。すなわち、子宮内マウス胎児脳への電気穿孔法による遺伝子導入で緑色蛍光蛋白質(GFP)発現プラスミドを脳室面に導入し、多極性細胞が多くラベルされる時期、及び、その前段階として脳室帯細胞が多くラベルされる時期を検討した。次に、各々の時期に該当部位を切り出し、セルソーターで蛍光ラベルされた細胞をそれぞれ濃縮した。それらからRNAを抽出し、HiCEP法を用いて両者のトランスクリプトームを比較することにより、多極性細胞を多く含む画分に強く発現するピークを検索した。その結果、「多極性細胞画分」で5倍以上高いピークを示すクローン273個を同定した。HiCEPデータベースで各ピークを予測して得た2960遺伝子のうち、S/TMに絞って、計271のうち249遺伝子のin situ hybridizationを終えた。以上の結果、多極性細胞が多く局在する脳室下帯に発現する遺伝子を13個同定することができた。その内、受容体型膜蛋白質が5個、分泌蛋白質が1個であった。これらいずれの分子も、軸索ガイダンスに関わると推定されるものであった。以上の結果から、多極性移動細胞は、脳室下帯において軸索ガイダンスに深く関わっている可能性が考えられた。

为了阐明发育中的小鼠大脑皮层中的多极迁移细胞接收什么样的细胞外信号以及它们的行为是如何控制的，我们研究了这些细胞中表达的具有分泌信号的蛋白质（跨膜蛋白或分泌蛋白）。蛋白质（以下缩写为S/TM）。为此，我们首先建立了一种在立体显微镜下从小鼠大脑皮层精确切除含有许多多极迁移细胞的区域的方法，然后使用信号序列捕获（SST）来寻找S/TM。到目前为止，我们已获得103个克隆，其中完成了96个克隆的原位杂交。此外，在 SST 的同时，我们还使用 HiCEP 方法进行了搜索。即，通过电穿孔将表达绿色荧光蛋白(GFP)的质粒导入到子宫内的小鼠胎脑的脑室表面，在许多多极细胞被标记时，作为前期，我们研究了许多带状细胞被标记的时间。接下来，在每个阶段切除相关位点，并使用细胞分选仪浓缩荧光标记的细胞。通过从中提取 RNA 并使用 HiCEP 方法比较它们的转录组，我们搜索了在含有许多多极细胞的级分中强烈表达的峰。结果，我们鉴定出了 273 个克隆，它们在“多极细胞部分”中显示出五倍或更高的峰值。在使用HiCEP数据库预测每个峰获得的2960个基因中，我们将范围缩小到S/TM，并完成了总共271个基因中的249个基因的原位杂交。结果，我们能够鉴定出 13 个在脑室下区表达的基因，该区域分布着许多多极细胞。其中，5 个是受体型膜蛋白，1 个是分泌蛋白。所有这些分子都被认为参与轴突引导。这些结果表明多极迁移细胞可能深入参与室下区的轴突引导。

项目成果

Neuronal migration in cortical development

• DOI: 10.1177/08830738050200040201
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: JOURNAL OF CHILD NEUROLOGY
• 影响因子: 1.9
• 作者: Kanatani, S;Tabata, H;Nakajima, K
• 通讯作者: Nakajima, K

神経細胞の移動と皮質の構築 改訂第二版 脳神経科学イラストレイテッド(森寿, 真鍋俊也, 渡辺雅彦, 岡野栄之, 宮川剛 編)

神经元的迁移和皮质的构建，修订版第二版，《神经科学图解》（由 Hisashi Mori、Toshiya Manabe、Masahiko Watanabe、Hideyuki Okano 和 Tsuyoshi Miyakawa 编辑）

• 发表时间: 2006
• 作者: Aramaki S;Hatta K.;Itsuki Ajioka;Shigeaki Kanatani;Chikako Kudo;Itsuki Ajioka;Masato Yozu;Itsuki Ajioka;Atsushi Kamiya;仲嶋一範;仲嶋一範
• 通讯作者: 仲嶋一範

Disrupted-in-Schizophrenia-1 in development of the cerebral cortex : perturbation by its schizophrenia-associated mutation

大脑皮层发育中的精神分裂症1被破坏：精神分裂症相关突变的干扰

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nature Cell Biol. 7(12)
• 作者: Aramaki S;Hatta K.;Itsuki Ajioka;Shigeaki Kanatani;Chikako Kudo;Itsuki Ajioka;Masato Yozu;Itsuki Ajioka;Atsushi Kamiya
• 通讯作者: Atsushi Kamiya

神経系の後期発生 -脳皮質構造の形成- 脳神経外科学大系 第一巻「神経科学」(河瀬斌 編)

神经系统的后期发育-脑皮质结构的形成-神经外科第1卷《神经科学》（河濑彬编）

• 发表时间: 2006
• 作者: Aramaki S;Hatta K.;Itsuki Ajioka;Shigeaki Kanatani;Chikako Kudo;Itsuki Ajioka;Masato Yozu;Itsuki Ajioka;Atsushi Kamiya;仲嶋一範
• 通讯作者: 仲嶋一範

Expression profiles of EphA3 at both the RNA and protein level in the developing mammalian forebrain

• DOI: 10.1002/cne.20551
• 发表时间: 2005-07-04
• 期刊: JOURNAL OF COMPARATIVE NEUROLOGY
• 影响因子: 2.5
• 作者: Kudo, C;Ajioka, I;Nakajima, K
• 通讯作者: Nakajima, K