CNRカドヘリン分子群の分子間相互作用の解析

CNR-钙粘蛋白分子的分子间相互作用分析

基本信息

批准号：
16048233
负责人：
先崎浩次
金额：
$ 2.3万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16048233/
关键词：
接着分子カドヘリンインテグリン分子多様性神経発生

项目摘要

CNRカドヘリン分子群は、高次脳機能に重要なFynチロシンリン酸化酵素の結合分子である多様化したカドヘリン型の受容体ファミリーである。CNRカドヘリン分子群はマウス脳に広く発現しており、神経細胞分画法および免疫電顕法によりシナプス部位に存在する。また、神経細胞ごとに組み合わせをもってCNR遺伝子が発現することが示されている。マウス個体発生過程においては大脳皮質皮質板における発現が認められ、大脳皮質形成機構に重要なReelinの受容体の一つとしての役割を担っている。CNRカドヘリン分子群はそのアミノ酸構造から接着分子としての機能が想定されるが、これまでCNRカドヘリン分子の細胞接着活性は明らかではなかった。そこで、CNR1をHEK293T細胞に強制発現させホモフィリックな細胞接着活性を調べたところCNR1を発現させた細胞においてカルシウム依存的な細胞接着能が認められ、また、その機能ドメインはReelin結合領域と同じEC1領域に存在した。しかしながら、CNR1の細胞接着能はCNR1を発現させていないHEK293T細胞との間にもみとめられ、ホモフィリックな結合性ではない可能性が示唆された。そこで、CNR1と結合するHEK293T細胞に既存のタンパク質の同定を試みβ1インテグリンとのヘテロフィリックな結合性が示された。また、マウス発生段階の小脳においてCNRタンパク質とβ1インテグリンタンパク質との局在の一致が認められ、マウス生体内においてもCNR分子とβ1インテグリン分子が結合して機能していることが示唆された。以上の結果はCNR分子がβ1インテグリン分子とヘテロフィリックな結合により細胞接着能を有すること、および、CNR分子がβ1インテグリン分子との結合により機能していることを示す。この結果を論文にまとめ報告した(Mutoh et al.,2004)。

CNR-钙粘蛋白分子家族是一个多样化的钙粘蛋白型受体家族，可结合 Fyn 酪氨酸激酶，这对于高级脑功能非常重要。 CNR-钙粘蛋白分子在小鼠大脑中广泛表达，通过神经元分级和免疫电子显微镜在突触位点发现。研究还表明，CNR 基因在每个神经元中组合表达。在小鼠个体发育过程中观察到在大脑皮层皮质板中的表达，并且它作为Reelin受体之一发挥作用，Reelin在大脑皮层的形成机制中非常重要。尽管基于其氨基酸结构，CNR-钙粘蛋白分子被认为具有粘附分子的功能，但迄今为止，CNR-钙粘蛋白分子的细胞粘附活性尚未阐明。因此，当CNR1在HEK293T细胞中强制表达并检查同源细胞粘附活性时，在表达CNR1的细胞中观察到钙依赖性细胞粘附能力。然而，在不表达 CNR1 的 HEK293T 细胞中也观察到了 CNR1 的细胞粘附能力，表明这种结合可能不是同亲的。因此，我们试图鉴定HEK293T细胞中存在的一种与CNR1结合的蛋白质，并发现它与β1整合素具有异嗜性结合。此外，在小鼠发育过程中，CNR蛋白和β1整合素蛋白在小脑中的定位是一致的，这表明CNR分子和β1整合素分子即使在小鼠体内也可以组合发挥作用。上述结果表明CNR分子通过与β1整联蛋白分子异嗜性结合而具有细胞粘附能力，CNR分子通过与β1整联蛋白分子结合发挥功能。结果在一篇论文中进行了总结和报告（Mutoh 等，2004）。