マウス鰓弓内で遠近軸情報を規定するDlx3遺伝子の発現調節機構の解析

决定小鼠鳃弓近轴信息的Dlx3基因表达调控机制分析

基本信息

批准号：
16027253
负责人：
隅山健太
金额：
$ 2.5万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

1)鰓弓特異的エンハンサーI37-2エレメントについて、より詳細なデリーション解析を行った結果、250bpよりも領域を狭めた場合にはエンハンサー活性が失われることが判明した。この領域に含まれる転写因子結合配列は複数のホメオボックス因子結合配列とbHLH転写因子結合配列E-boxであったことから、これらの因子が鰓弓発現に必須の因子であることが示唆された。このほか、新たに11種のほ乳類からDlx3-7クラスター全長を含むBAC配列をスクリーニングし、配列を決定し既存の配列を含め多種間比較した。我々が用いたヒト、ヒヒ、キツネザル、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ウシ、ブタ、コウモリ、ヘッジホッグ、アルマジロ、オポッサムの比較では、すべての種に鰓弓特異的エンハンサーI37-2が保存しているのが確認された。ところが単孔類のカモノハシについてはこのエレメントが存在しないことがわかった。魚類ゲノムにはI37-2エレメントが存在しないことと考え合わせると、I37-2はほ乳類で進化した鰓弓由来の頭蓋形態発生に必要なエレメントである可能性が示唆される。現在この結果を投稿準備中である。2)Dlx3-7クラスターの遺伝子間領域約20kbには、I37-2以外にも複数のエンハンサー候補領域があるが、そのうちの一つI37-1からI37-3を含むDlx3遺伝子の下流約2.2kbの領域が、四肢でのDlx3遺伝子の発現を制御する領域であり、このエレメント中には指間領域およびAER両方の発現制御領域が含まれていることを明らかにした。現在このエレメントのエンハンサー活性と進化に関する論文の投稿準備中である。

1）对Gill Arch特异性增强子I37-2元素进行更详细的缺失分析表明，当该区域范围缩小到250 bp以下时，增强子活动丢失了。该区域中包含的转录因子结合序列是多个同源蛋白蛋白因子结合序列和BHLH转录因子结合序列e-box，这表明这些因子是Gill Arch表达的基本因素。此外，从11个新哺乳动物中筛选了11个包含DLX3-7簇的全长的新BAC序列，确定了序列，并进行了多次比较，包括现有序列。我们比较人类，狒狒，狐猴，小鼠，大鼠，兔子，狗，牛，猪，蝙蝠，刺猬，舰队和负鼠证实了所有物种中吉尔支架特异性增强剂i37-2的保存。但是，发现单孔鸭嘴兽不存在此元素。考虑到鱼类基因组中缺乏I37-2元素，它表明I37-2可能是gill弓从哺乳动物中演变的颅骨形成所必需的元素。我们目前正在准备提交此结果。 2）除i37-2外，DLX3-7簇的基因间区域还有几个可能的增强区域，并且发现DLX3基因下游的大约2.2 kb的区域，包括I37-1至i37-3的一个区域，它是一个调节DLX3基因的区域，以及该元素的表达，并构成了该元素中的互为，并构成了该元素的相互作用。当前，正在准备有关增强子活动和进化的论文。