マウス鰓弓内で遠近軸情報を規定するDlx3遺伝子の発現調節機構の解析

决定小鼠鳃弓近轴信息的Dlx3基因表达调控机制分析

基本信息

批准号：
16027253
负责人：
隅山健太
金额：
$ 2.5万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

1)鰓弓特異的エンハンサーI37-2エレメントについて、より詳細なデリーション解析を行った結果、250bpよりも領域を狭めた場合にはエンハンサー活性が失われることが判明した。この領域に含まれる転写因子結合配列は複数のホメオボックス因子結合配列とbHLH転写因子結合配列E-boxであったことから、これらの因子が鰓弓発現に必須の因子であることが示唆された。このほか、新たに11種のほ乳類からDlx3-7クラスター全長を含むBAC配列をスクリーニングし、配列を決定し既存の配列を含め多種間比較した。我々が用いたヒト、ヒヒ、キツネザル、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ウシ、ブタ、コウモリ、ヘッジホッグ、アルマジロ、オポッサムの比較では、すべての種に鰓弓特異的エンハンサーI37-2が保存しているのが確認された。ところが単孔類のカモノハシについてはこのエレメントが存在しないことがわかった。魚類ゲノムにはI37-2エレメントが存在しないことと考え合わせると、I37-2はほ乳類で進化した鰓弓由来の頭蓋形態発生に必要なエレメントである可能性が示唆される。現在この結果を投稿準備中である。2)Dlx3-7クラスターの遺伝子間領域約20kbには、I37-2以外にも複数のエンハンサー候補領域があるが、そのうちの一つI37-1からI37-3を含むDlx3遺伝子の下流約2.2kbの領域が、四肢でのDlx3遺伝子の発現を制御する領域であり、このエレメント中には指間領域およびAER両方の発現制御領域が含まれていることを明らかにした。現在このエレメントのエンハンサー活性と進化に関する論文の投稿準備中である。

1) 对鳃弓特异性增强子 I37-2 元件进行更详细的删除分析表明，当该区域缩小到小于 250 bp 时，增强子活性就会丧失。该区域包含的转录因子结合序列是多个同源框因子结合序列和bHLH转录因子结合序列E-box，表明这些因子对于鳃弓表达是必需的。此外，我们从 11 个新的哺乳动物物种中筛选了包含全长 Dlx3-7 簇的 BAC 序列，确定了序列，并对多个物种（包括现有序列）进行了比较。在我们对人类、狒狒、狐猴、小鼠、大鼠、兔子、狗、牛、猪、蝙蝠、刺猬、犰狳和负鼠的比较中，我们发现鳃弓特异性增强子 I37-2 在所有物种中都是保守的。已经确认有。然而，人们发现单孔类鸭嘴兽中不存在这种元素。考虑到鱼类基因组中缺乏 I37-2 元件，这表明 I37-2 可能是源自哺乳动物进化的鳃弓的颅骨形态发生所需的元件。我们目前正在准备发布结果。 2)在Dlx3-7簇的约20kb基因间区域中，存在除I37-2之外的多个增强子候选区域，其中一个位于Dlx3基因下游约2.2kb处，包括I37-1至I37-3。研究表明，该区域控制四肢中 Dlx3 基因的表达，并且该元件包含指间区域和 AER 的表达控制区域。我们目前正在准备提交一篇关于该元素的增强子活性和进化的论文。