糖鎖修飾による小胞体品質管理の制御機構

糖基化内质网质量控制的控制机制

• 批准号: 15040210
• 负责人: 西川 周一
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15040210/
• 关键词: 小胞体; 品質管理; 糖鎖修飾; O-結合型糖鎖; N-結合型糖鎖; 出芽酵母

本研究では,糖鎖修飾による小胞体品質管理制御のメカニズムを明らかにすることを目的としている.マンノース転移酵素Pmt2pによる異常タンパク質のO-マンノシル化は,小胞体におけるタンパク質の変性修復の機構のひとつであると考えられる.われわれはこれまでに,2種類の異常タンパク質をO-マンノシル化の基質として同定したが,これらはともに可溶性タンパク質の変異体であった.本年度は,Pmt2p依存にO-マンノシル化を受ける異常タンパク質として,出芽酵母Nep98pの温度感受性変異体を新たに同定した.Nep98pは膜貫通領域をひとつ持つ膜内在性の核膜タンパク質であり,温度感受性変異は内腔側領域に存在する.以上の結果は,高次構造に異常を示す領域が内腔側に存在することがO-マンノシル化を受けるためには必要であり,O-マンノシル化と基質の膜への結合性との間に関連がないことを示唆している.本研究では,マウスEDEMの酵母ホモログであり.ERADシグナルとなる糖鎖構造を認識する因子の有力な候補であるMnl1pの機能解析も目的としている.われわれは,ゲノム配列の解析から,シロイヌナズナのMnl1pホモログを見いだし,その機能が多細胞生物の個体レベルでどのような意義を持つかについても解析を行なっている.本年度は,シロイヌナズナのMnl1pホモログの機能について,酵母mnl1変異体のERAD欠損の相補能を指標として検討した.しかし,シロイヌナズナMnl1pホモログは,同時にその活性の検討を行ったマウスEDEMと共に,酵母mnl1変異体のERAD欠損の相補能を持たないことが明らかとなった.

本研究的目的是阐明通过甘露糖基转移酶 Pmt2p 对异常蛋白质进行糖链修饰来控制内质网质量的机制是修复内质网蛋白质变性的机制之一。作为 O-甘露糖基化底物的异常蛋白质类型，两者都是可溶性蛋白质。今年，我们新鉴定了酿酒酵母的温度敏感突变体Nep98p，它是一种以Pmt2p依赖性方式进行O-甘露糖基化的异常蛋白，Nep98p是一种具有一个跨膜结构域的完整膜蛋白，并且是一种核膜蛋白。上述结果表明，在管腔区域中存在表现出异常高阶结构的区域，因为它经历了O-甘露糖基化。是必要的，这表明 O-甘露糖基化与膜上的底物结合之间没有关系。我们还旨在分析 Mnl1p 的功能，通过基因组序列分析，Mnl1p 是识别人体的一个强有力的候选因子。发现了拟南芥Mnl1p同源物，并发现其功能可以与多细胞生物的个体水平进行比较。今年，我们以补充酵母 mnl1 突变体中 ERAD 缺陷的能力为指标，研究了拟南芥 Mnl1p 同源物的功能，然而，拟南芥 Mnl1p 同源物与同时检测其活性的小鼠 EDEM 一起进行了研究。表明它不具有补充酵母 mnl1 突变体的 ERAD 缺陷的能力。

项目成果

江崎雅俊: "Tom-40 protein import channel binds to non-native proteins and prevents their aggregation"Nature Structural Biology. 10. 988-994 (2003)

Masatoshi Ezaki：“Tom-40 蛋白质导入通道与非天然蛋白质结合并防止其聚集”《自然结构生物学》10. 988-994 (2003)。

ミトコンドリアへの輸送とフォールディング

运输并折叠进入线粒体

• 发表时间: 2004
• 期刊: 細胞工学 23
• 作者: Saito;C.;佐藤健大
• 通讯作者: 佐藤健大