熱帯熱マラリア原虫の細胞内寄生成立における抗酸化酵素系の役割の解明
阐明抗氧化酶系统在恶性疟原虫细胞内寄生虫产生中的作用
基本信息
- 批准号:14021137
- 负责人:
- 金额:$ 3.84万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
熱帯熱マラリア原虫細胞内寄生成立におけるペルオキシレドキシン(Prx)の役割を知る目的で、原虫2-Cys型Prxの生理機能を調べた。まず、2-Cys型Prxの遺伝子発現パターンをリアルタイム定量RT-PCR法によって解析したところ、同遺伝子は原虫の赤血球侵入直後から発現の亢進が始まり、その後赤血球内期全体にわたりほぼ構成的に発現していることが示された。これは1-Cys型Prx遺伝子の発現がトロホゾイト期に特徴的な亢進を示すことと対照的である。続いて2-Cys型Prxの原虫生体内での役割を知るため遺伝子欠損マラリア原虫を作製した。遺伝子欠損用プラスミドを培養熱帯熱マラリア原虫FCR-3株に導入、スクリーニング、クローニングを経て2-Cys型Prx遺伝子欠損株のクローン成立をゲノムレベルおよびタンパク質発現レベルの両方で確認した。得られた2-Cys型Prx欠損原虫株の表現型を調べる目的で、パラコート(O_2^-の負荷)及びニトロプルシドナトリウム(NOの負荷)を原虫培養中に加え増殖率を調べたところ、2-Cys型Prx欠損原虫株ではいずれに対しても親株と比較して感受性の上昇が認められた。以上の結果は2-Cys型Prxが、赤血球内寄生に起因して原虫細胞内に派生する活性酸素種の解毒のみならず、活性窒素種の解毒をも行っていることを示唆している。
为了了解过氧化还原蛋白(Prx)在恶性疟原虫细胞内寄生虫形成中的作用,我们研究了恶性疟原虫中2-Cys型Prx的生理功能。首先,我们利用实时定量RT-PCR分析了2-Cys型Prx的基因表达模式,发现该基因的表达在寄生虫侵入红细胞后立即开始增加,然后几乎在整个过程中持续表达。结果表明,红细胞期。这与1-Cys型Prx基因的表达显示滋养体阶段的增加特征的事实相反。接下来,为了了解 2-Cys 型 Prx 在寄生虫中的作用,我们创建了基因缺陷的疟疾寄生虫。将基因缺失质粒导入培养的恶性疟原虫FCR-3菌株中,并进行筛选和克隆,在基因组水平和蛋白表达水平上证实了2-Cys型Prx基因缺失菌株的建立。为了研究获得的2-Cys型Prx缺陷型原生动物菌株的表型,我们在原生动物培养物中添加百草枯(O_2^-负载)和硝普钠(NO负载)并检查生长率。与亲本菌株相比,缺陷型原生动物菌株对这两种菌株的敏感性增加。这些结果表明,2-Cys型Prx不仅可以解毒由于红细胞内寄生而在原生动物细胞内产生的活性氧,而且还可以解毒活性氮。
项目成果
期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Mizuno, Y. et al.: "Plasmodium falciparum : effect of jasplakinolide on the growth, invasion, and actin cytoskeleton"Parasitology Research. 88. 844-848 (2002)
Mizuno, Y. 等人:“恶性疟原虫:jasplakinolide 对生长、侵袭和肌动蛋白细胞骨架的影响”寄生虫学研究。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kabututu, Z. et al.: "Prostaglandin production from arachidonic acid andevidence for a 9,11-endoperoxide prostaglandin H(2) reductase in Leishmania"International Journal for. Parasitology. 33. 221-228 (2003)
Kabututu, Z. 等人:“从花生四烯酸生产前列腺素以及利什曼原虫中 9,11-内过氧化物前列腺素 H(2) 还原酶的证据”国际期刊。
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- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Mizuno, Y. et al.: "In-vitro uptake of vitamin A by Plasmodium falciparum"Annals of Tropical Medicine & Parasitology. 97(印刷中). (2003)
Mizuno, Y. 等人:“恶性疟原虫对维生素 A 的体外摄取”《热带医学与寄生虫学年鉴》97(印刷中)。
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