CD28を介した補助刺激の構造を基にしたシグナル伝達機構の解明

基于CD28介导的共刺激结构阐明信号转导机制

基本信息

批准号：
14021101
负责人：
池水信二
金额：
$ 4.1万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021101/
关键词：
補助刺激分子シグナル伝達構造生物学

项目摘要

ナイーブT細胞の成熟には、主要組織適合抗原(MHC)/T細胞受容体(TCR)複合体を介した抗原特異的なシグナルとB7/CD28複合体を介した補助刺激と呼ばれる抗原非特異的なシグナルの両方が必要である。我々は、前者のシグナル関わる分子として、MHCクラス2(Nature Immunology,2002)、LFA-3(Proc. Natl. Acad. Sci. USA,1999)の構造解析を行った。また後者の補助刺激の構造を基にした知見を得るため、B7-1細胞外ドメインの構造(Immunity,2000)、及びB7-1/CTLA-4複合体の結晶構造(Nature,2001)を明らかにした。更に補助刺激の構造を基にした知見を得る為、補助のシグナル伝達機構の構造を基にした解明を計画した。CD28の構造解析を試みているが、重度に糖修飾を受けている為、結晶構造解析に適した試料は得られていない。Wurzburg大学のグループがCD28に結合する9種の抗体を作成し、これらがTCRシグナルに依存して補助刺激を与えるものと、TCRシグナルのない状態でT細胞を活性化するものに大別されることを明らかにした。これらの抗体認識部位の同定を、Oxford大学及びWurzburg大学との共同研究で行った。構造既知であったCTLA-4からヒトCD28のモデルを作成し、その情報を基にマウスとラットのキメラCD28を作成して抗体の結合部位を同定した。この結果については、論文をJ. Exp. Med.に発表予定である。また、MHC/TCR複合体,CD2/LFA-3複合体,B7-1/CTLA-4複合体に関する認識機構についてNature ImmunologyにReviewを発表した。

初始 T 细胞成熟涉及通过主要组织相容性抗原 (MHC)/T 细胞受体 (TCR) 复合物发出的抗原特异性信号和通过 B7/CD28 复合物发出的称为共刺激的抗原非特异性信号。我们对 MHC 2 类（Nature Immunology，2002）和 LFA-3（Proc. Natl. Acad. Sci. USA，1999）作为参与前一信号的分子进行了结构分析。为了获得基于后者共刺激结构的知识，我们揭示了B7-1胞外结构域的结构（Immunity，2000）和B7-1/CTLA-4复合物的晶体结构（Nature，2001）。我做到了。此外，为了获得基于辅助刺激结构的知识，我们计划阐明辅助信号转导机制的结构。人们尝试分析CD28的结构，但由于其经过大量糖修饰，因此尚未获得适合晶体结构分析的样品。维尔茨堡大学的一个研究小组创建了九种与 CD28 结合的抗体，这些抗体大致可分为依赖 TCR 信号提供共刺激的抗体和在没有 TCR 信号的情况下激活 T 细胞的抗体。这些抗体识别位点的鉴定是与牛津大学和维尔茨堡大学合作进行的。根据结构已知的 CTLA-4 创建人类 CD28 模型，并根据该信息创建嵌合小鼠和大鼠 CD28，并鉴定抗体结合位点。我们计划在《J. Exp Med》上发表一篇关于这一结果的论文。我们还在《自然免疫学》上发表了关于 MHC/TCR 复合物、CD2/LFA-3 复合物和 B7-1/CTLA-4 复合物识别机制的综述。