細胞間接着制御系の網羅的解析

细胞间粘附控制系统综合分析

基本信息

批准号：
14014217
负责人：
深田正紀
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014217/
关键词：
細胞間接着カドヘリン Rho IQGAP1 CLIP-170

项目摘要

個体発生過程や組織の再構築時にはcadherinを介した細胞間接着のダイナミックな再構築が重要な役割を果たしている。このような細胞間接着の再構築には、空間的位置情報と時間情報が正確に細胞内に伝達、統合され、接着装置が再構築されることが必須である。しかし、その分子メカニズムは長らく不明であった。本研究では細胞間接着の分子基盤をより網羅的に明らかにすることを目的とした。本年度は細胞間接着を自由に再構築することのできるassay系(Ca2+スイッチ法、およびHepatocyte Growth Factor (HGF)によるcell scattering:細胞分散)を用いて、細胞間接着の各ステージ(接着初期、接着維持期、接着破壊時)に特異的なcadherin, catenins, IQGAP1および低分子量G蛋白質Rhoファミリー結合蛋白質をアフィニティーカラムや免疫沈降により同定した。とりわけIQGAP1結合蛋白質として同定したCLIP-170は微小管のプラス端に濃縮する蛋白質で、IQGAP1はCLIP-170との結合を介して微小管を細胞表層で捕捉することが明らかとなった(Fukata et al., Cell 2002)。IQGAP1はCLIP-170に誘導された微小管を細胞間接着部位にリクルートし、細胞間接着を形成するのに必要な蛋白質やvesicleを輸送する足場を提供している可能性が考えられる。さらに、β-catenin結合蛋白質としてPDZドメインを5個有するスキャフォールディング蛋白質KIAA0705とKIAA0705を介してβ-cateninに結合する蛋白質として低分子量G蛋白質Rap1の活性制御蛋白質PDZ-GEFを同定した。したがって、本年度の研究計画はほぼ達成することができたと考えている。

钙粘蛋白介导的细胞间粘附的动态重建在个体发育和组织重建过程中发挥着重要作用。为了重建这种细胞间粘附，必须将空间位置信息和时间信息准确地传递并整合到细胞中，并且重建粘附装置。然而，长期以来，其分子机制仍不清楚。本研究的目的是更全面地阐明细胞间粘附的分子基础。今年，我们将使用可自由重建细胞间粘附的检测系统（Ca2+转换法和使用肝细胞生长因子（HGF）的细胞散射）来分析细胞间粘附的各个阶段（初始粘附、粘附钙粘蛋白、连环蛋白、通过亲和柱和免疫沉淀鉴定了对维持期和粘附失败具有特异性的 IQGAP1 和低分子量 G 蛋白 Rho 家族结合蛋白。特别是，被鉴定为IQGAP1结合蛋白的CLIP-170是集中在微管正端的蛋白质，并且发现IQGAP1通过与CLIP-170结合捕获细胞表面的微管（Fukata等）等人，细胞2002）。 IQGAP1 可能会将 CLIP-170 诱导的微管募集到细胞间粘附位点，并为运输形成细胞间粘附所需的蛋白质和囊泡提供支架。此外，我们还鉴定了一种支架蛋白 KIAA0705，它具有 5 个 PDZ 结构域，作为 β-连环蛋白结合蛋白；以及一种蛋白 PDZ-GEF，它调节低分子量 G 蛋白 Rap1 的活性，作为与 β 结合的蛋白。 -连环蛋白，来自 KIAA0705。因此，我相信我们今年的研究计划已经基本完成了。