マウスTL抗原を標的とした免疫療法モデルの開発

小鼠TL抗原免疫治疗模型的开发

基本信息

批准号：
12217170
负责人：
高橋利忠
金额：
$ 42.37万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)組み換え技術を用いて、TL抗原特異的エフェクターT細胞株を樹立すべく、TL特異的細胞傷害性T細胞(CTL)クローンからT細胞レセプター(TCR)遺伝子を、また抗TL抗体産生ハイブリドーマから抗体遺伝子の単離を行った。単離したTCRおよび抗体遺伝子が単鎖構造を取るような組み換え遺伝子を構築し、さらにシグナル伝達分子であるCD3ζ遺伝子の細胞内ドメインとタンデムに結合させたキメラ遺伝子を作成した。このうち、抗体キメラ分子については、活性化T細胞表面に発現できることを確認した。(2)C3HとB6マウスに化学発がん剤NBUを経口投与すると、C3HにおけるTL陽性腫瘍の発症時期がB6に比べて遅延した(統計学的には有為差は無い)。また、C3Hが同系のTL遺伝子導入マウス由来のTL陽性皮膚を拒絶するのに対し、B6では拒絶が見られなかった。In vivo抗TL活性の異なるC3HとB6を解析し、H-2K^b分子の発現により、TL特異的CTLの不活化が起こることを示唆した。また、TLテトラマー陽性細胞率および血清中の抗TL抗体活性はB6よりC3Hにおいて高く、in vivoの抗TL活性との相関が見られたが、(B6×C3H)F_1マウスをrecipientとして用いた各個体レベルでの検索では、これらin vitroの成績とin vivo抗TL活性とには明らかな一致が見られなかった。

（1）使用重组技术，从TL特异性细胞毒性T细胞（CTL）克隆中分离出T细胞受体（TCR）基因，以及来自抗TL抗体产生杂交杂交瘤的抗体基因，以建立TL抗原特异性效应T细胞系。构建了重组基因，其中分离的TCR和抗体基因采用单链结构，并进一步构建了嵌合基因，其中CD3ζ基因的细胞内结构域（信号转导分子）结合到串联。其中，可以证实抗体嵌合分子可以在活化的T细胞表面表达。（2）当C3H和B6小鼠口服化学致癌剂NBU时，与B6相比，C3H中TL阳性肿瘤的发作被延迟（从统计学上讲，自然界没有差异）。此外，C3H拒绝了Syngeneic TL转导的小鼠的TL阳性皮肤，而B6没有显示排斥。我们分析了体内抗TL活性不同的C3H和B6，这表明H-2K^B分子的表达导致TL特异性CTL失活。此外，C3H的TL四聚体阳性细胞速率和血清抗TL抗体的活性高于B6，并且与体内抗TL活性的相关性观察到相关性，但是使用（B6×C3H）F_1小鼠在每个个体水平上进行搜索，因为受益者没有表现出这些Intitro Antro Antro Antro Antro Antro Antro Antro Anto Anto Attro Attivo and Vivo Anti anti-tl Into and vivo Anti and Ini Into anti-TL活性。