ABC蛋白スーパーファミリーによる異物排出機構の解析

ABC蛋白超家族分析异物排泄机制

基本信息

批准号：
10217202
负责人：
鈴木洋史
金额：
$ 28.93万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はすでに異物解毒に関与するMRP(ABCC)ファミリーについて検討を加え、これらが細胞内で生成されたグルクロン酸抱合体・グルタチオン抱合体の排出に関与することを示してきた。今年度は特にMRP2および3の機能についても検討を加えたが、現在まで未解明であった硫酸抱合体の排出機構についても検討を加えた。我々はbreast cancer resistance protein(BCRP/ABCG2)が正常細胞のapical側膜に発現することに着目し、この蛋白質の機能について検討を加えた。その結果、BCRPが生体内因化合物estrone-3-sulfateやdehydroepiandrosterone sulfateを基質とすることを見出した。これはABCトランスポーターが硫酸抱合体を基質とすることを示した始めての例である。さらに、estrone-3-sulfateに対する阻害実験を行ったところ、一連の硫酸抱合体は低いIC_<50>値により阻害をかけたのに対し、グルクロン酸抱合体やグルタチオン抱合体はより高いIC_<50>値を示した。さらに、4-methylumbelliferone sulfateやE3040 sulfateはBCRPにより顕著に取り込まれた。一方、4-methylumbelliferone glucuronideやE3040 glucuronideはBCRPにより有意に取り込まれるものの、取り込みの絶対値は硫酸抱合体に比べて顕著に低いものであった。これらの結果は、BCRPが硫酸抱合体の排出に関与することを示している。MRPがグルクロン酸抱合体・グルタチオン抱合体を基質とすることから、これらのトランスポーターは互いに相補的に機能することにより、異物解毒に関与することが示唆された。

我们已经研究了参与异物排毒的MRP（ABCC）家族，并表明它们参与了细胞内产生的葡萄糖醛酸酯和谷胱甘肽结合物的排泄。今年，我们还检查了MRP2和3的功能，但还检查了疏散硫酸盐缀合物的机制，直到现在迄今为止才尚未理解。我们专注于正常细胞的顶膜上乳腺癌抗性蛋白（BCRP/ABCG2）的表达，并研究了该蛋白的功能。结果，发现BCRP使用体内化合物雌酮-3-硫酸盐和脱氢表硫酸盐硫酸盐作为底物。这是ABC转运蛋白显示硫酸盐偶联物作为底物的第一个例子。此外，对雌酮-3-硫酸盐的抑制实验表明，一系列硫酸盐偶联物被低IC_ <50>值抑制，而葡萄糖醛酸酯和谷胱甘肽结合物显示出更高的IC_ <50>值。此外，BCRP显着掺入了4-甲基木纤维酮和硫酸E3040硫酸盐。另一方面，尽管BCRP显着掺入了4-甲基木酮糖酮和E3040糖苷，但摄取的绝对值显着低于硫酸盐偶联物。这些结果表明BCRP参与硫酸盐结合物排泄。由于MRP使用葡萄糖醛酸/谷胱甘肽结合物作为底物，因此建议这些转运蛋白相互补充，并参与异物排毒。