ABC蛋白スーパーファミリーによる異物排出機構の解析

ABC蛋白超家族分析异物排泄机制

基本信息

批准号：
10217202
负责人：
鈴木洋史
金额：
$ 28.93万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はすでに異物解毒に関与するMRP(ABCC)ファミリーについて検討を加え、これらが細胞内で生成されたグルクロン酸抱合体・グルタチオン抱合体の排出に関与することを示してきた。今年度は特にMRP2および3の機能についても検討を加えたが、現在まで未解明であった硫酸抱合体の排出機構についても検討を加えた。我々はbreast cancer resistance protein(BCRP/ABCG2)が正常細胞のapical側膜に発現することに着目し、この蛋白質の機能について検討を加えた。その結果、BCRPが生体内因化合物estrone-3-sulfateやdehydroepiandrosterone sulfateを基質とすることを見出した。これはABCトランスポーターが硫酸抱合体を基質とすることを示した始めての例である。さらに、estrone-3-sulfateに対する阻害実験を行ったところ、一連の硫酸抱合体は低いIC_<50>値により阻害をかけたのに対し、グルクロン酸抱合体やグルタチオン抱合体はより高いIC_<50>値を示した。さらに、4-methylumbelliferone sulfateやE3040 sulfateはBCRPにより顕著に取り込まれた。一方、4-methylumbelliferone glucuronideやE3040 glucuronideはBCRPにより有意に取り込まれるものの、取り込みの絶対値は硫酸抱合体に比べて顕著に低いものであった。これらの結果は、BCRPが硫酸抱合体の排出に関与することを示している。MRPがグルクロン酸抱合体・グルタチオン抱合体を基質とすることから、これらのトランスポーターは互いに相補的に機能することにより、異物解毒に関与することが示唆された。

我们已经研究了参与异物解毒的 MRP (ABCC) 家族，并表明它们参与细胞内产生的葡萄糖醛酸和谷胱甘肽结合物的排泄。今年，我们特别研究了MRP2和3的功能，还研究了迄今为止尚未阐明的硫酸盐结合物的排泄机制。我们关注乳腺癌抗性蛋白（BCRP/ABCG2）在正常细胞顶膜中表达的事实，并研究了该蛋白的功能。结果，我们发现BCRP使用内源性化合物雌酮-3-硫酸盐和脱氢表雄酮硫酸盐作为底物。这是 ABC 转运蛋白使用硫酸盐结合物作为底物的首次证明。此外，针对雌酮-3-硫酸盐的抑制实验表明，一系列硫酸盐缀合物以较低的IC_<50>值发挥抑制作用，而葡糖苷酸和谷胱甘肽缀合物则表现出较高的IC_<50>值。此外，4-甲基伞形酮硫酸盐和E3040硫酸盐被BCRP显着吸收。另一方面，虽然4-甲基伞形酮葡萄糖醛酸和E3040葡萄糖醛酸被BCRP显着摄取，但它们摄取的绝对值显着低于硫酸盐缀合物。这些结果表明BCRP参与硫酸盐缀合物的排泄。由于MRP使用葡萄糖醛酸结合物和谷胱甘肽结合物作为底物，因此表明这些转运蛋白的功能彼此互补并参与异物解毒。