天蚕の前幼虫態休眠における新内分泌系の機能解析と分子機構

天然蚕幼体滞育期间新内分泌系统的功能分析及分子机制

• 批准号: 09265202
• 负责人: 鈴木 幸一
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Iwate University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09265202/
• 关键词: 天蚕; 前幼虫休眠; 抑制因子(RF); 成熟因子(MF); KK-42結合タンパク質

イミダゾール化合物で天蚕の人工ふ化に成功している。また実験形態学的手法により、この前幼虫態休眠は中胸に存在する抑制因子(RF)で維持され、第2〜5腹節に存在する成熟因子(MF)で後休眠期が進行すると考えられている。本研究は、これらの全貌を理解するために、RFとMFを単離し、イミダゾール系化合物処理と結合するタンパク質の解析から検討することにした。また、二つの因子の分泌器官を推定するために、数種の抗体を利用し免疫組織化学的に観察した。その結果,(1)FMRFamide抗体に反応する口胃神経系のニューロン前腸と中腸の境界部で、また分泌細胞は中腸皮膜細胞で観察された。この結果、RFとMFの分泌部分にはペプチド分泌細胞の存在が示唆された。(2)これまでの方法(1994)を改変し、酸メタノール溶液で両因子を抽出し、逆相HPLCで分析したところ、従来より簡便で多量の活性画分を得ることができた。このことから、両因子の単離の可能性が一層高まった。(3)休眠期に特異的な7.5kDa(N末端ブッロク)、休眠覚醒にともなっては6.2kDaと5.6kDaのペプチドが強く発現することが明らかになり、それぞれを単離することができた。また、休眠期からはKK-42結合タンパク質を単離することができた。さらに、前幼虫でも活性を有するAny-PPを5齢幼虫血液から単離し構造決定した。これによって、イミダゾール化合物や長期低温による休眠覚醒機構の糸口をとらえることができた。以上のことから、前幼虫態休眠の制御系には上述した分子群が深く関与するものと考えられる。

咪唑醇化合物在蚕的人造拥堵中取得了成功。另外，过去的垂死性在胸部中间存在的抑制因子（RF）中保持了，并且在第二至第五腹节点（MF）中的休眠因子（MF）正在发展。为了了解整个情况，这项研究决定在RF和MF之间进行塑造，并分析与咪唑化合物治疗结合的蛋白质。为了估计这两个因素的分泌器官，我们观察到了观察免疫组织化学物质的几种类型的抗体。结果，（1）在对FMRFAMIDE抗体反应的正畸神经系统的神经元前后边界中观察到分泌细胞。结果，在RF和MF的分泌中提出了肽分泌的细胞的存在。 （2）当该方法（1994）迄今已修改时，用酸甲醇溶液提取了两个因子，并在反相HPLC中进行了分析，则获得了更简单，更活跃的油漆。结果，两个因素隔离的可能性进一步增加了。 （3）很明显，有强烈表达的6.2kDa和5.6kDa的肽特有的特定于休眠时期（N末端Bulroku）和休眠觉醒，并且可以分离出来。另外，将KK-42结合蛋白与休眠期分离。此外，在前幼虫中活跃的Any-PP是从5岁的幼虫血液中造成的，并被确定。结果，可以捕获咪唑醇化合物的线索以及由于长期低温而引起的休眠唤醒机制。基于上述，人们认为上述分子群与前幼虫休眠系统的控制系统深深涉及。

项目成果

北城敬子・千田美智子・佐藤由美子 鈴木幸一: "天蚕の前幼虫態休眠を制御する二つの因子の単離工程(2)" 東北蚕糸研究報告. 22. 29 (1997)

Keiko Kitajiro、Michiko Senda、Yumiko Sato、Koichi Suzuki：“控制天然蚕幼虫前休眠的两个因素的分离过程（2）”东北丝绸研究报告。

An Y., Nakajima T. and Suzuki K.: "Immunohistochemical demonstration of mammalian-and FMRFamide-like peptides in the gut ixmervation and endocrine cells of the wild pilkmoth,Antheraea yamamai" Eur.F.Entomol.95(in press). (1998)

An Y.、Nakajima T. 和 Suzuki K.：“野生毛蛾 Antheraea yamamai 的肠道混合和内分泌细胞中哺乳动物和 FMRFamide 样肽的免疫组织化学演示”Eur.F.Entomol.95（印刷中）。

清野 敦・鈴木幸一: "タンパク質レベルから解析した天蚕前幼虫の休眠機構" 東北蚕糸研究報告. 22. 30 (1997)

Atsushi Seino 和 Koichi Suzuki：“从蛋白质水平分析前腹腔蚕幼虫的休眠机制”东北丝绸研究报告。 22. 30 (1997)。