免疫細胞の機能制御に関与する転写因子

参与调节免疫细胞功能的转录因子

基本信息

批准号：
08282238
负责人：
石井俊輔
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08282238/
关键词：
Myb 転写制御コアクティベータ-シグナル伝達細胞増殖

项目摘要

myb遺伝子産物(Myb)は未分化造血系細胞やT細胞の増殖に必須であると考えられている。本研究ではMybの活性制御機構や標的遺伝子などについて解析し、Mybによる遺伝子発現制御機構を明らかにすることを目的とした。Mybの活性制御機構を遺伝学的手法で解析することを目的として、ショウジョウバエmyb(D-myb)変異体を分離するためのスクリーニングを行った。この過程で、D-myb変異体と共に、D-mybと類似のβ-gal発現パターンを示すXクロモソーム上のPエレメント挿入変異体をいくつか分離できた。そのうちのひとつの変異体におけるPエレメント挿入部位の遺伝子の構造を決定してみると、マウスCBPと高いホモロジーを有していた。CBPはもともとcAMP経路上で機能する転写因子CREBに結合するコアクティベータ-として分離・同定されたものである。コアクティベータ-はプロモーター上流のエンハンサー結合因子と基本転写因子(TBPなど)とのブリッジ役として機能すると考えられている。この遺伝子産物はショウジョウバエCREB(dCREB)とPKA依存的に結合し、dCREBによる転写活性化を促進することからショウジョウバエCBP(dCBP)であることが示された。この結果はCBPがc-Mybのコアクティベータ-としても機能する可能性を示唆したので、一連の解析を行った。その結果、マウスCBPはマウスc-Mybにリン酸化依存的に結合し、c-Mybによる転写活性化に必須であることが示された。このようにCBPはCREBばかりではなくc-Mybのコアクティベータ-としても機能することが明かとなった。c-Mybとリン酸化CREBはCBP分子内のN端側の同じ領域に結合するので、c-MybとCREBのCBPへの結合は競合する。このことは細胞内でcAMP経路がMyb活性と競合的に作用することを示唆している。

myb 基因产物 (Myb) 被认为对于未分化造血细胞和 T 细胞的增殖至关重要。本研究对Myb的活性控制机制和靶基因进行分析，旨在阐明Myb的基因表达控制机制。我们对果蝇 myb (D-myb) 突变体进行了筛选，目的是利用遗传学方法分析 Myb 活性的调控机制。与 D-myb 突变体一起，我们能够在 X 染色体上分离出几个 P 元件插入突变体，这些突变体表现出与 D-myb 类似的 β-gal 表达模式。当我们确定其中一个突变体的P元件插入位点的基因结构时，我们发现它与小鼠CBP具有高度同源性。 CBP 最初被分离并鉴定为与转录因子 CREB 结合的共激活剂，CREB 在 cAMP 通路上发挥作用。共激活子被认为充当启动子上游增强子结合因子和基本转录因子（TBP 等）之间的桥梁。该基因产物被证明是果蝇 CBP (dCBP)，因为它以 PKA 依赖性方式与果蝇 CREB (dCREB) 结合，并促进 dCREB 的转录激活。这一结果表明CBP也可能充当c-Myb的共激活剂，因此我们进行了一系列分析。结果表明，小鼠 CBP 以磷酸化依赖性方式与小鼠 c-Myb 结合，并且对于 c-Myb 的转录激活至关重要。因此，已揭示CBP不仅作为CREB的共激活剂起作用，而且还作为c-Myb的共激活剂起作用。由于c-Myb和磷酸化CREB结合到CBP分子N末端侧的相同区域，因此c-Myb和CREB竞争结合CBP。这表明 cAMP 途径与细胞内的 Myb 活性竞争。