小脳求心性投射の形成と安定化の分子機構

小脑传入投射形成和稳定的分子机制

• 批准号: 07279244
• 负责人: 湯浅 茂樹
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07279244/
• 关键词: 小脳発生; Bergmannグリア; アストログリア; tenascin; プルキンエ細胞; 帯状構造; rhombotin; リーラーミュータントマウス; 小脳発生; Bergmannグリア; アストログリア; tenascin; プルキンエ細胞; 帯状構造; rhombotin; リーラーミュータントマウス

小脳求心性回路形成の分子機構を明らかにするため、小脳皮質形成においてプルキンエ細胞の配列の位置情報を呈示すると考えられるBergmannグリアの発生機構の解析を行なった。さらに、求心性投射の標的であるプルキンエ細胞の帯状分化の機構を解明するため、プルキンエ細胞の正常分化過程ならびに小脳皮質の遺伝的形成障害を示すリーラーミュータントマウスにおけるプルキンエ細胞-アストログリアの細胞間相互作用について検討した。1.Bergmannグリアの発生機構:細胞外基質接着因子tenascinが胎生期放射状グリアならびに幼若アストログリアに発現することから、tenascin遺伝子発現を早期の指標としてin situ hybridization、免疫組織化学により小脳Bergmannグリアの発生を形態学的に検討した。tenascin免疫陽性の胎生期放射状グリアはプルキンエ細胞の皮質への移動をガイドしたのち突起を短縮した。そして、tenascin遺伝子を発現した細胞体は皮質へと放射状に移動しプルキンエ細胞層に配列した。これらの細胞は生後、アストログリアマーカーであるglial fibrillary acidic protein(GFAP)陽性のBergmannグリアに分化した。2.プルキンエ細胞の帯状分化:プルキンエ細胞マーカーとしてL7遺伝子発現を指標としてin situ hybridizationにより正常分化過程を検討すると、プルキンエ細胞が移動中である胎生15日にすでに帯状分化が認められ、皮質に配列後も帯状の発現様式を示した。また、生後小脳外顆粒層では転写因子rhombotin遺伝子の帯状発現が認められた。リーラーミュータントの生後小脳では、L7遺伝子を発現したプルキンエ細胞は皮質下に帯状の集塊を形成し、tenascin遺伝子を発現したBergmannグリアは皮質に分布して形成異常を示していた。また、アストログリアはプルキンエ細胞塊の内側のものが占める領域ではGFAP陽性を示したが、外側塊の領域ではGFAP陽性であった。以上の所見から、Bergmannグリアは小脳発生において放射状グリアに起源を有し、プルキンエ細胞の皮質への配列過程の制御に関与するとともに、プルキンエ細胞の帯状分化とアストログリア分化に相関のあることが明らかになった。

为了阐明小脑传入电路形成的分子机制，我们分析了伯格曼神经胶质的发育机制，伯格曼神经胶质的发育机制被认为呈现小脑皮层形成过程中珀班吉细胞的位置信息。此外，为了阐明Purkinje细胞的区域分化的机制，即传入投影的靶标，我们研究了Purkinje细胞的正常分化过程和reeler突变小鼠Purkinje细胞的细胞 - 细胞相互作用，在Cerebellar Cortex中表现出遗传缺陷。 1。伯格曼神经胶质的机制：因为细胞外基质粘附因子替氏蛋白在胎儿radial胶质神经胶质和幼年星形胶质细胞中表达，所以我们通过原位杂交和使用Tenascin Gene Gene Gene表达式表达式指示器来研究小脑bergmann胶质形态的发育。 Tenascin免疫阳性radial胶质神经胶质引导Purkinje细胞到皮层，然后缩短突出。表达Tenascin基因的细胞体径向迁移到皮质中并排列在Purkinje细胞层中。出生时，这些细胞分化为星形胶质标记，神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP） - 阳性Bergmann Glia。 2。浦肯野细胞的铬解析：在使用L7基因表达作为purkinje细胞标记的指示剂作为原位杂交检查正常分化过程时，在胚胎寿命的15日已经观察到纬向分化，当Purkinje细胞迁移时，purkinje细胞迁移，并且皮质表现出序列表达模式。此外，在产后脑外颗粒颗粒中观察到转录因子菱形蛋白基因的区域表达。在卷轴突变体的产后小脑中，表达L7基因在皮质下形成纬向聚集的purkinje细胞，表达Tenascin基因的Bergmann Glia分布在皮质中并表现出发育不良。此外，Astroglia在Purkinje细胞质量的内部占据的区域中显示出GFAP阳性，但外部区域的GFAP阳性呈阳性。这些发现表明，伯格曼神经胶质在小脑发育中起源于radial胶质，并参与了珀kinje细胞序列过程中的序列过程中，并与purkinje细胞的区域和星形分化相吻合。