神経系のシナプス形成に係る胎児型グリシン受容体チャネルの役割

胚胎甘氨酸受体通道在神经系统突触形成中的作用

基本信息

批准号：
07279206
负责人：
赤木宏行
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07279206/
关键词：
グリシン受容体イオンチャネル in situ hybridization

项目摘要

グリシン受容体チャネルの主要サブユニットαには分子多様性があり,α1からα4に分類されているが,このうち神経系に豊富に存在するものはα1とα2である.ノーザンブロット解析の結果,α1とα2の神経系における発現時期に違いがあることが明らかとなった.即ち,α1が成熟動物の中枢神経系(主として延髄,脊髄)に豊富に発現するのに対し,α2は胎生期・幼若期の神経組織に分布し,動物の発育と共に消失する.本研究では胎生中期から成熟期(生後50日齢)のラット脊髄におけるα1およびα2mRNAの発現様式を組織化学的手法を用いて検討し,両者を比較することを試みた.胎生(E)12-14,18,生後(P)0.5.10.21.50日齢のWistar系ラット脊髄をエーテル麻酔下に摘出し,5μmの既固定凍結切片を作製した.α1及びα2cRNAをプローブに用いてin situ hybridizationを行い以下の結果を得た.1)P21および50の組織においてα1アンチセンスプ-ブと結合するRNAの発現を示す強いシグナルが観察された.α1mRNAの発現はラットの生後発達とともに増加する傾向を示した.3)α2mRNAはE14からP0までの時期の脊髄において強いシグナルとして検出された.E14では外套層(前角),POでは灰白質前後角全域に渡ってほぼ均一に分布していた.P5以降,α2の発現量は減少する傾向を示し,P50では著しく弱いシグナルしか観察されなかった.しかし,この時期においても,後角の一部の細胞(主にLamina IとV層の細胞)からは比較的強いα2シグナルが検出された.このことから,ある種の成熟ニューロンにおいてα2サブユニットもグリシン受容体の構成タンパクとして関与しうることが示唆される.

甘氨酸受体通道的主要亚基α具有分子多样性，并被分类为α1至α4，其中神经系统中的大量为α1和α2。 Northern印迹分析表明，神经系统中α1和α2表达时间有所不同。也就是说，α1在中枢神经系统（主要是成熟动物的髓质长颈，脊髓）中表达，而α2分布在胎儿和年轻阶段的神经组织中，而动物的表达是α1和α2mRNA的表达。比较两个。在易醚麻醉下切除了胎生（e）12-14、18和产后（P）0.5.10.21.50天的脊髓，并制备了5μm固定冷冻切片。 α1和α2CRNA用作诱导植物大鼠的脊髓的探针。 1）强信号表明在p21和50的组织中观察到RNA与α1反义丙烯的表达。α1mRNA的表达显示出随着大鼠的结构而增加的α1mRNA的趋势。3）α2mRNA在E14至p0的脊柱脊髓中被视为α2mRNA。在E14中，它几乎均匀地分布在地幔层（一个前角），而在PO中，它几乎均匀地分布在整个灰色前角。 P5后，α2表达水平显示出降低的趋势，并且在P50处仅观察到明显弱的信号。但是，即使在此时，背角中的一些细胞（主要是薄片）。在I和V层的细胞中检测到相对强的α2信号，这表明在某些成熟的神经元中，α2亚基也可以作为甘氨酸受体的成分蛋白涉及。