神経系のシナプス形成に係る胎児型グリシン受容体チャネルの役割

胚胎甘氨酸受体通道在神经系统突触形成中的作用

基本信息

批准号：
07279206
负责人：
赤木宏行
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07279206/
关键词：
グリシン受容体イオンチャネル in situ hybridization

项目摘要

グリシン受容体チャネルの主要サブユニットαには分子多様性があり,α1からα4に分類されているが,このうち神経系に豊富に存在するものはα1とα2である.ノーザンブロット解析の結果,α1とα2の神経系における発現時期に違いがあることが明らかとなった.即ち,α1が成熟動物の中枢神経系(主として延髄,脊髄)に豊富に発現するのに対し,α2は胎生期・幼若期の神経組織に分布し,動物の発育と共に消失する.本研究では胎生中期から成熟期(生後50日齢)のラット脊髄におけるα1およびα2mRNAの発現様式を組織化学的手法を用いて検討し,両者を比較することを試みた.胎生(E)12-14,18,生後(P)0.5.10.21.50日齢のWistar系ラット脊髄をエーテル麻酔下に摘出し,5μmの既固定凍結切片を作製した.α1及びα2cRNAをプローブに用いてin situ hybridizationを行い以下の結果を得た.1)P21および50の組織においてα1アンチセンスプ-ブと結合するRNAの発現を示す強いシグナルが観察された.α1mRNAの発現はラットの生後発達とともに増加する傾向を示した.3)α2mRNAはE14からP0までの時期の脊髄において強いシグナルとして検出された.E14では外套層(前角),POでは灰白質前後角全域に渡ってほぼ均一に分布していた.P5以降,α2の発現量は減少する傾向を示し,P50では著しく弱いシグナルしか観察されなかった.しかし,この時期においても,後角の一部の細胞(主にLamina IとV層の細胞)からは比較的強いα2シグナルが検出された.このことから,ある種の成熟ニューロンにおいてα2サブユニットもグリシン受容体の構成タンパクとして関与しうることが示唆される.

甘氨酸受体通道的主要亚基α具有分子多样性，分为α1至α4，其中α1和α2在神经系统中含量丰富。Northern blot分析结果显示，α1和α2在神经系统中含量丰富。已经清楚的是，α2在神经系统中的表达时间存在差异，即，α1在成年动物的中枢神经系统（主要是延髓和脊髓）中大量表达，而α2大量表达。存在于成年动物的中枢神经系统（主要是延髓和脊髓），而分布于动物的神经组织中。在本研究中，我们采用组织化学方法检测了大鼠脊髓从胚胎中期到成年期（出生后50天）α1和α2 mRNA的表达模式，并试图比较两者的胚胎（E. ）12-14,18，出生后0.5、10、21、50天（P）的Wistar大鼠在乙醚麻醉下切除脊髓，制备5μm预固定的α1和α2 cRNA冰冻切片。用作探针。现场我们进行杂交并获得以下结果： 1) 在 P21 和 50 的组织中观察到表明与 α1 反义探针结合的 RNA 表达的强信号。α1 mRNA 表达随着大鼠出生后的发育而趋于增加。 3) α2 mRNA。存在于脊髓中从 E14 到 P0 的区域。在E14，它被检测为强信号，在E14，它几乎均匀地分布在大脑皮层（腹角），并且在P0，它在P5之后几乎均匀地分布在整个灰质的前角和后角。，α2的表达水平呈现下降的趋势，并且在P50时，即使在这个阶段，背角中的一些细胞（主要是椎板）从 I 层和 V 层的细胞中检测到相对较强的 α2 信号。这表明 α2 亚基也可能作为某些成熟神经元中甘氨酸受体的组成蛋白。