長期増強に関連して発現するラット海馬の未知の遺伝子のクローニング

与长时程增强相关的未知大鼠海马基因的克隆

基本信息

批准号：
07278247
负责人：
丸山敬
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07278247/
关键词：
長期増強差分法海馬転写調節因子

项目摘要

ラットの海馬スライスにおける反復刺激後に神経細胞の反応性が上昇する現象:長期増強(LTP)は、過去の電気信号が未来の神経活動に影響を及ぼすという意味で、記憶の実験モデルとして注目されている。LTPの分子機構の解明は、各種のインヒビターやアゴニストの効果、あるいは既知のタンパク質の変化を中心に研究が進められている。しかし、本研究では、Kチャンネル阻害剤tetraethylammonium(TEA)によって誘因されるラット海馬スライスの長期増強に関連して発現される未知の遺伝子を差分法とin situ hybridization(ISH)を用いて検索し、LTPに関連した未知の機構の解明をめざす。TEA処理した海馬スライス由来のメッセージから大脳皮質由来のメッセージで差分を行って差分ライブラリを作成した。そして、各クローンを一個ずつISHでスクリーニングし、神経に特有に発現されるクローンを検索した。その中の3個はデーターベースの検索では未知の遺伝子であった。そのなかの一つKW8がコードするアミノ酸配列には、MyoDやNeuroDなど文化関連遺伝子に共通に存在するヘリックス・ループ・ヘリックスドメイン(HLH)が存在した。HLHのアミノ酸配列はほとんど保存されていたが、その前後のアミノ酸配列はこれまでに報告されているHLHタンパク質とは全く異なっていた。KW8は分化が終了した神経組織において発現している。LTPの維持に、あるいは記憶の機構には新たな神経回路の形成が考えられる。従って、KW8によって一連の遺伝子群が活性化されて新しいシナプスが誘導されることが考えられる。平成8年度は、この観点を中心にKW8の機能の解明を目指す。

大鼠海马切片重复刺激后神经元反应性增加的现象：长时程增强（LTP）作为一种记忆实验模型而引起人们的关注，因为过去的电信号会影响未来的神经活动。目前正在进行研究以阐明 LTP 的分子机制，重点关注各种抑制剂和激动剂的作用以及已知蛋白质的变化。然而，在本研究中，我们使用差异方法和原位杂交（ISH）来寻找与K通道抑制剂四乙铵（TEA）诱导的大鼠海马切片中的长期增强相关的未知基因，旨在阐明未知的机制。与LTP有关。通过从 TEA 处理的海马切片的信息中减去来自大脑皮层的信息来创建差异库。然后，使用ISH对每个克隆进行一一筛选，以寻找在神经中特异性表达的克隆。其中三个是数据库检索中的未知基因。其中之一 KW8 编码的氨基酸序列包含螺旋-环-螺旋结构域 (HLH)，该结构域通常存在于培养相关基因（例如 MyoD 和 NeuroD）中。虽然HLH的氨基酸序列大部分是保守的，但其前后的氨基酸序列与之前报道的HLH蛋白完全不同。 KW8在已完成分化的神经组织中表达。新神经回路的形成被认为与 LTP 或记忆机制的维持有关。因此，人们认为KW8激活了一系列基因并诱导新的突触。 1996年，我们将围绕这个角度来阐明KW8的功能。