酸化刺激から見たAZTによるエイズウイルスの活性化

从氧化刺激角度探讨AZT对艾滋病病毒的激活作用

基本信息

批准号：
07277207
负责人：
倉田俊一
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07277207/
关键词：
H_2O_2 HIV-1 HIV-1プロモーター活性化

项目摘要

アジドチミジン(AZT)をエイズ患者に長期投与すると特に肝細胞のミトコンドリアDNAが8-OH型に変化する突然変異が出現することは良く知られている。この変化は酸化刺激による突然変異の結果と考えられるのでAZTには酸化刺激の側面があるものと考えられた。そこで、HIV-1LTRにクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)を連結したプラスミドをヒトリンパ球細胞に導入したパ-マネント変異株を用いて、長期のAZT処理を行ったところ、処理期間が長くなるに伴いCAT活性が上昇した。この結果、HIV-1プロモーターがAZT処理によって活性化されることが判明した。この活性化はNAC等の還元剤による抑制を受けること、NF-κBの活性化を伴うことなどからAZT処理によってNF-κBを介したHIVプロモーターの活性化が起こることが示された。同様の検討の低濃度(0.01mM)H_2O_2を用いた長期処理で行ったところ、約1ケ月の0.01mMH_2O_2処理によってAZTの場合と同様活性化NF-κBを介したHIV-1プロモーターの活性化が見られた。HIV-1は初期感染ののち長期間患者の細胞DNAにインテグレートされてlatentな状態のまま過ごす。生体内では種々の酸化刺激となる物質の産生が日常的に行われていることを考えると、上記のlatentな状態からHIVの活性化に弱い長期の酸化刺激が重要な意味をもつことが考えられ興味深い。

众所周知，艾滋病患者长期服用叠氮胸苷（AZT）会导致肝细胞线粒体DNA发生突变，变成8-OH型。由于这种变化被认为是氧化刺激引起的突变的结果，因此AZT被认为具有氧化刺激方面。因此，当我们使用永久突变株进行长期AZT治疗时，其中将含有与HIV-1LTR连接的氯霉素乙酰转移酶（CAT）的质粒导入人淋巴细胞中，我们发现，随着治疗时间的延长，CAT活动增加。结果表明，AZT 治疗可激活 HIV-1 启动子。这种激活被 NAC 等还原剂抑制，并伴随着 NF-κB 的激活，表明 AZT 治疗通过 NF-κB 引起 HIV 启动子的激活。在一项使用低浓度（0.01mM）H_2O_2长期治疗的类似研究中，发现用0.01mMMH_2O_2治疗约1个月会导致通过激活的NF-κB激活HIV-1启动子，与情况类似AZT 被看见了。初次感染后，HIV-1 会长期处于潜伏状态，整合到患者的细胞 DNA 中。考虑到体内经常产生各种氧化刺激物质，因此认为由于上述潜伏状态而容易被HIV激活的长期氧化刺激具有重要意义。