DNA合成と損傷をモニターするチェックポイント機構

监测 DNA 合成和损伤的检查点机制

基本信息

批准号：
07255202
负责人：
村上浩士
金额：
$ 0.96万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07255202/
关键词：
細胞周期チェックポイント DNA複数酵素 cds1^+cds2^+

项目摘要

チェックポイント機構とは細胞周期を順序正しく進行することを保証する機構である。たとえば、真核生物にはDNA合成が完了するまでM期に進ませないという機構が存在している。また、DNAに損傷がおこると、損傷を修復するまで細胞周期を停止させるという機構も存在する。分裂酵母では、細胞周期を進行するのに必須な遺伝子と、細胞周期を順序正しく保つのに必須な遺伝子(チェックポイント遺伝子)が存在することが知られている。しかし、どのようにDNAが合成しているのかを検知し、そのシグナルがどのように細胞分裂を制御しているcdc2キナーゼに伝達しているのかは全くわかっていない。我々はDNAポリメラーゼαの温度感受性変異株を樹立し、これがチェックポイント機構に関与していることを明らかにした。次に、この株を宿主として新しいプロテインキナーゼ(cds1^+)をクローニングした。いろいろな解析の結果CdslキナーゼはDNAポリメラーゼαと結合し、DNA合成をモニターし、そのシグナルをcdc2キナーゼに伝達する機能を持つと結論した。この研究よりDNA複製装置とチェックポイント遺伝子のつながりがはじめて明らかになった。また、cds1^+は非常に特異的に機能することが明らかになり、新しいチェックポイント遺伝子であることが解明された。

检查点机制是确保细胞周期有序进展的机制。例如，真核生物有一种机制可以阻止它们进入 M 期，直到 DNA 合成完成。此外，当 DNA 受损时，有一种机制会暂停细胞周期，直到损伤得到修复。在裂殖酵母中，已知存在细胞周期进展所必需的基因和维持有序细胞周期所必需的基因（检查点基因）。然而，我们完全不知道 DNA 合成是如何检测的，以及信号是如何传递到控制细胞分裂的 CDC2 激酶的。我们建立了 DNA 聚合酶 α 的温度敏感突变株，并揭示其参与检查点机制。接下来，我们使用该菌株作为宿主克隆了一种新的蛋白激酶（cds1^+）。各种分析的结果得出结论，Cdsl激酶具有与DNA聚合酶α结合、监测DNA合成并将信号传递给CDC2激酶的功能。这项研究首次揭示了DNA复制机制与检查点基因之间的联系。此外，还发现cds1^+以非常特殊的方式发挥作用，并已阐明它是一个新的检查点基因。