Gタンパク質を介する神経細胞死モデルを用いた情報伝達分子の解析

使用G蛋白介导的神经元细胞死亡模型分析信息转导分子

• 批准号: 06272208
• 负责人: 本田 善一郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06272208/
• 关键词: 三量体Gタンパク質; Gq; 脱感作; カルシウム; IP3受容体

本研究の目的は、三量体G蛋白質の下流にプログラムされた神経細胞死のメカニズムを解明することにある。我々はPC12モデル神経細胞に活性型Gqを発現させる実験から、Gq経路の活性化が神経突起の成長(細胞分化)--神経細胞死を誘導することを見い出した。本年度はまず、1)Gq、Gq連関受容体の下流のシグナルの分析、2)Gq発現によってもたらされる細胞生存に不利な機能素子修飾の検索、を行った。1)線維芽細胞においては活性型Gq、Gq連関型受容体は分化の上位因子であるMAP kinase,MAP kinase kinaseを強く活性化した(Honda,et al.(1994)J.Biol.Chem.269,2307-15,Watanabe,Waga,Honda,et al.J.Biol.Chem.in press)が、活性型Gqを誘導的に発現したPC12細胞ではフォスフォリパーゼC活性化はみられるもののMAP kinase活性は変化していない(未発表)。現在他の機能素子修飾を探索中である。2)モデル細胞として頻用されるXenopus oocyte遺伝子発現システムを用い、Gq経路がIP3受容体のdown regulationを通して種々の受容体からのカルシウムシグナルを完全に遮断することを見い出した(Honda,et al.J.Biol.Chem.in press)。各種増殖因子受容体の発する増殖シグナルには細胞内カルシウムが重要な役割を果たすことがよく知られている。Gq--IP3受容体消失というメカニズムは上記の三量体G蛋白質の下流にプログラムされた細胞生存に不利な機能素子修飾の一部を説明する可能性が高い。

本研究的目的是阐明三聚体 G 蛋白下游神经元细胞死亡的机制。通过在 PC12 模型神经元中表达激活的 Gq 的实验，我们发现 Gq 通路的激活会诱导神经突生长（细胞分化）和神经元细胞死亡。今年，我们首先进行了1）Gq和Gq相关受体下游信号的分析，2）寻找Gq表达带来的不利于细胞存活的功能元件修饰。 1) 在成纤维细胞中，活化的 Gq 和 Gq 连接受体强烈活化 MAP 激酶和 MAP 激酶激酶，它们是分化的首要因素（Honda, et al. (1994) J. Biol. Chem. 269,2307-15,Watanabe, Waga,Honda,et al.J.Biol.Chem.in Press），但在诱导表达活性 Gq 的 PC12 细胞中，观察到磷脂酶 C 激活，但 MAP 激酶活性保持不变（未发表）。我们目前正在探索其他功能元素的修改。 2）使用经常用作模型细胞的非洲爪蟾卵母细胞基因表达系统，我们发现Gq途径通过下调IP3受体完全阻断来自各种受体的钙信号（Honda等人.Biol.Chem.正在出版）。众所周知，细胞内钙在各种生长因子受体发出的生长信号中起着重要作用。 Gq-IP3受体丧失的机制可能解释了上述三聚体G蛋白下游编程的一些不利于细胞存活的功能元件修饰。

项目成果

渡辺,和賀,本田,他: "Prostaglandin F2α stimuletes for mation of the P21^<ras>-GTP conplex and mitogen-activated protein kinase activity in NIH-3T3 cells." The Journal of Biological Chemistry. (in press). (1995)

Watanabe、Waga、Honda 等人：“前列腺素 F2α 刺激 NIH-3T3 细胞中 P21^<ras>-GTP 复合物的形成和丝裂原激活的蛋白激酶活性。” 1995）

本田,他: "Transfected platelet-activating factor receptor activates mitogen-activated protein(MAP)kinese,and MAP kinase kinase" The Journal of Biological Chemistry. 269. 2307-2315 (1994)

Honda 等人：“转染的血小板激活因子受体激活丝裂原激活蛋白 (MAP) 激酶和 MAP 激酶激酶”《生物化学杂志》269. 2307-2315 (1994)。

和賀,中村,本田,他: "Two distinct signal transduction pathways for the activation of gvinea pig macrophage sand neutropholes by endtoin" Biochem.Biophys.Res.Comnun.197. 465-472 (1994)

Waga、Nakamura、Honda 等人：“内毒素激活豚鼠巨噬细胞和中性粒细胞的两种不同的信号转导途径”Biochem.Biophys.Res.Comnun.197（1994）。

高野,本田,他: "Role of cytoplasmic tail Phosphory lat ion site of platelet-activating factor receptor in agomist-induced desensitization" The Journal of Biological Chemistry. 269. 12722-12730 (1994)

Takano，Honda 等人：“血小板激活因子受体的细胞质尾部磷酸化位点在激动剂诱导的脱敏中的作用”《生物化学杂志》269。12722-12730 (1994)。