免疫系担当細胞の発生・分化に関与するリンホカイン及びその受容体の解析

参与免疫系统细胞发育和分化的淋巴因子及其受体的分析

• 批准号: 03258235
• 负责人: 高津 聖志
• 金额: $ 7.68万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03258235/
• 关键词: IL‐5; ヒトIL‐5レセプタ-; IL‐3レセプタ-; GM‐CSFレセプタ-; 好酸球

マウスIL‐5レセプタ-α鎖(IL‐5結合分子)cDNAをプロ-ブに、プラ-クハイブリダイゼイション法により、ヒト好酸球cDNAライブラリ-よりヒトIL‐5レセプタ-α鎖のcDNAを単離しその全構造の決定をした。ヒトIL‐5レセプタ-α鎖も膜貫通型のものと可溶性型の2種類あり、そのいづれもメッセ-ジが好酸球で発現していることが確かめられた。リコンビナント ヒトIL‐5レセプタ-α鎖はマウスのα鎖とよく類似しており(アミノ酸レベルで約60%の類似性あり)、細胞質外トメイン、膜貫通部分、および細胞質内ドメインより構成されていた。細胞質外ドメインには4コのシスティン残基モチ-フWS×WSモチ-フがそれぞれ保存されており、サイトカインレセプタ-に共通の構造をしていた。細胞質内ドメインは比較的短かく、チロシンキナ-ゼドメインやキナ-ゼのカタリティックドメインは存在せず、α鎖単独ではIL‐5シグナルが伝わらないことを予測させた。このcDNAをCOS細胞に発現させると比較的高い親和性でIL‐5と結合する分子が発現した。又IL‐3依存性FDC‐P1にヒトIL‐5レセプタ-α鎖を発現させるとヒトIL‐5に応答性を獲得しDNA合成を示した。このことよりヒトIL‐5レセプタ-α鎖もマウスIL‐5セレプタ-β鎖(Alc2B)と会合し、IL‐5に応答性を付与させうると考えられ、ヒトα鎖もヒトβ鎖と会合し機能的IL‐5レセプタ-を構築していると予測された。リコンビナントIL‐5α鎖の分子量は約60〓であった。今後はヒトIL‐5レセプタ-β鎖の同定とそのシグナル伝達の解析が必須と思われる。

使用小鼠IL-5受体α链(IL-5结合分子)cDNA作为探针，通过噬菌斑杂交从人嗜酸性粒细胞cDNA文库中提取人IL-5受体α链cDNA，并确定其整体结构。人IL-5受体α链有跨膜型和可溶型两种类型，已证实这两种类型的信息均在嗜酸性粒细胞中表达。重组人IL-5受体α链与小鼠α链非常相似（氨基酸水平相似性约为60%），由胞质外结构域、跨膜片段和胞质内结构域组成。在胞质外结构域中，4个半胱氨酸残基基序，WS x WS基序是保守的，其结构与细胞因子受体共有。胞质内结构域相对较短，并且没有酪氨酸激酶结构域或激酶催化结构域，因此我们预测α链单独不传递IL-5信号。当该cDNA在COS细胞中表达时，表达了以相对高亲和力与IL-5结合的分子。此外，当人IL-5受体α链在IL-3依赖性FDC-P1中表达时，它获得了对人IL-5的反应性并表现出DNA合成。由此认为，人IL-5受体-α链也与小鼠IL-5受体-β链(Alc2B)结合，能够赋予对IL-5的应答性，人α链也与人IL-5受体-β链结合。预计将建立功能性IL-5受体。重组IL-5α链的分子量约为60〓。未来，鉴定人类IL-5受体-β链并分析其信号转导将至关重要。

项目成果

Yoshiyuki Murata, et al: "Molecular cloning and characterization of the human interelukin 5receptor." J. Exp. Med.(1992)

Yoshiyuki Murata 等人：“人白细胞介素 5 受体的分子克隆和表征。”

Masatoshi Korenaga,et al: "The role of interleukin‐5(IL‐5)in protective immunity to Strongyloides venezuelensis infection in mice." Immunology.72. 502-507 (1991)

Masatoshi Korenaga 等人：“白细胞介素 5 (IL-5) 在小鼠对委内瑞拉类圆线虫感染的保护性免疫中的作用。免疫学 72-507 (1991)。

Eiichiro Sonoda, et al.: "Differential regulation of IgA production by TGFB and IL‐5:TGFB induces class switch of surface IgA^+ B cells,whereas IL‐5 promotes postswitch maturation into IgA‐secreting cells." Cell. Immunol.(1992)

Eiichiro Sonoda 等人：“TGFB 和 IL-5 对 IgA 产生的差异调节：TGFB 诱导表面 IgA^+ B 细胞的类别转换，而 IL-5 则促进转换后成熟为 IgA 分泌细胞。” （1992）

Seiji Mita, et al.: "Molecular characterization of the B chain of the murine interleukin 5(IL‐5)receptor." Int. Immunol.3. 665-672 (1991)

Seiji Mita 等人：“鼠白细胞介素 5 (IL-5) 受体 B 链的分子特征。Int. 665-672。”

Naoto Yamaguchi, et al.: "Murine interleukin 5receptor isolated by lmmunoaffinity chromatography:comparison of determined N‐terminal sequence and deduced primary sequence from cDNA and implication of a role of the intracytoplasmlc domain." Int. Immunol.3.

Naoto Yamaguchi 等人：“通过免疫亲和层析分离的小鼠白细胞介素 5 受体：比较确定的 N 末端序列和从 cDNA 推断的一级序列以及胞浆内结构域的作用。”3。