金属蛋白質の多元的構造と反応過程制御

金属蛋白的多维结构和反应过程的控制

基本信息

批准号：
03241103
负责人：
森島績
金额：
$ 11.97万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は以下の点について研究を行なった。1ミオグロビンにおける配位子結合機構の制御因子ミオグロビンは生体内で酸素貯蔵の機能を果たしており、酸素の可逆的な結合が可能である。本研究では酸素などの配位子結合に大きな影響を与えると考えられているヘム近傍の疎水性クラスタ-に注目し、その中に存在するLeu29、Leu72、Leu104、Val66を立体障害の異なる他の疎水性アミノ酸残基に置換した。その結果、29位のLeuを置換すると酸素や一酸化炭素の再結合反応速度が著しく遅くなり、また配位子の結合構造も変化することが明らかになった。つまり、この部位がLeuであることにより、配位子結合を加速されるものと結論づけられた。2アミノ酸置換チトクロ-ムP450の酸素添加機能チトクロ-ムP450の酸素添加機能の解明のため我々は252位のThrに注目し、この水酸基を消失させたAlaに置換したところ基質への酸素添加が阻害されヘム鉄に配位した酸素は過酸化水素として放出されることを明かにしてきた。今回その252位の近傍で、酸素結合部位を形成するために重要と考えられている、Lys178ーAsp251ーArg186のイオンペアを切断したところ、特に251位のアミノ酸置換により酸素分子の消費が著しく減少し、この部位のアミノ酸が酸素分子のヘムへの結合に大きく関与していることが明かになった。3チトクロ-ムc3の立体構造解所従来、我々はNMRを用いてチトクロ-ムc3の立体構造解析を行なってきたが、今回、重水素化したアミノ酸を用いることにより、高磁場側に常磁性シフトしたシグナルをヘム鉄に配位したHisのイミダゾ-ル基に由来することを明かにした。更にこれらのシグナルの常磁性シフトの値と4個のヘムの酸化還元電位の検討からそれぞれのヘム近傍構造の推定を試みた。

今年，我们对以下几点进行了研究。 1。肌红蛋白中协调键机制的控制因子具有活体中氧气储存的函数，氧气可以逆转。在这项研究中，注意下摆附近的疏水簇，这被认为对氧气（例如氧气）具有显着影响，其中存在于其中存在的Leu29，Leu72，Leu72，Leu104，val66在其中存在三个不同之处。尺寸障碍被疏水氨基酸残基取代。结果，取代Leu的第29位，表明氧气和一氧化碳的重新考虑速度显着减慢，配体的结合结构将会改变。换句话说，得出的结论是，这部分是Leu，它加速了协调员的纽带。 2由于阐明了氨基酸取代的氧添加剂Chitochrom-M P450 Chitochrra-M P450，我们重点关注第252 THR，并将其替换为丢失的羟基的ALA，并将氧气添加到底物中的氧气。对底物。这次，当被认为认为形成氧气的位点的离子对lys178 -ASP251 -ARG186被认为是形成氧气连接位点很重要的，因此消耗氧分子的消耗显着降低了251级的氨基酸替代。 3过去，我们使用NMR分析了Citkro-M C3的三维结构分辨率，但是这次通过使用重型氢化氨基酸，高磁场侧是正常的。转移的信号源自他的咪唑群，该组协调血红素铁。此外，我们试图通过检查这些信号的正常磁移以及四个下摆的氧化电位来估计每个下摆的结构。