抗エイズウイルス剤の開発に関する基礎研究

抗艾滋病病毒药物开发基础研究

基本信息

批准号：
03219213
负责人：
久保田幸穂
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

タンパク質のアミノ末端グリシン残基に炭素数14個の長鎖飽和脂肪酸ミリスチン酸が酸アミド結合を介して共有結合することをタンパク質のミリストイル化と呼び、この現象は1982年にcAMPー依存性プロテインキナ-ゼに、はじめて見い出された。Human immunodeficiency virus type 1(HIVー1)のヌクレオカプシドは種々の構成タンパク質によって構成されている。そのタンパク質のうちp17^<gag>タンパク質のアミノ末端にミリストイル基が結合していることが著者らによって見い出された。p17^<gag>タンパク質のミリストイル化がウイルスの組立に必要で、特に感染性ウイルスの出芽に必須ではないかと考えられている。そこで著者らはこのミリストイル化を阻害することによりウイルスの組立・出芽を阻止し、ウイルス粒子を未完成のまま感染細胞中に封じ込め、感染細胞のウイルスの出芽による破壊をくいとめ、しいてはエイズの発症を制御する事ができると考え、本研究を行なった。ミリストイル化を阻害するには、はじめにミリストイル化を触媒する酵素に着目し、その阻害剤を合成するのが順当であるので、その阻害剤を酵素反応の機構を基礎に分子設計し、化合物を化学合成した。ミリスイトル化の阻害はHIVー1感染細胞を用いて調べ、ミリストイル化阻害効果のあった化合物の抗HIV活性を調べた。その結果、最も簡単な構造式を持った化合物Nーミリストイルグリシナ-ルジエチルアセタ-ル(NーMyrーGOA)は40μMの濃度でp17^<gag>タンパク質のミリストイル化を著しく阻害し、ウイルス産生を強く制御することが明かになった。

肉豆蔻酸（一种具有 14 个碳原子的长链饱和脂肪酸）通过酰胺键与蛋白质的氨基末端甘氨酸残基共价键合，称为蛋白质肉豆蔻酰化，这种现象于 1982 年首次被描述为 cAMP -依赖性蛋白激酶。-Ze 是第一个发现它的人。人类免疫缺陷病毒 1 型 (HIV-1) 的核衣壳由多种成分蛋白组成。在这些蛋白质中，作者发现肉豆蔻酰基附着在 p17^<gag> 蛋白质的氨基末端。 p17^<gag> 蛋白的肉豆蔻酰化是病毒组装所必需的，并且被认为对于感染性病毒出芽尤其重要。因此，作者提出，通过抑制这种肉豆蔻酰化，可以阻止病毒组装和出芽，将病毒颗粒未完成地包含在感染细胞中，防止病毒出芽对感染细胞的破坏，从而可能导致发展我们进行这项研究的目的是相信可以控制艾滋病的发作。为了抑制肉豆蔻酰化，首先应关注催化肉豆蔻酰化的酶并合成其抑制剂，因此可以根据酶促反应的机理来分子设计抑制剂，并可以化学合成化合物。使用HIV-1感染的细胞研究了肉豆蔻酰化的抑制，并研究了抑制肉豆蔻酰化的化合物的抗HIV活性。结果表明，结构式最简单的化合物N-肉豆蔻酰甘氨酸二乙缩醛（N-Myr-GOA）在40μM浓度下显着抑制p17^<gag>蛋白的肉豆蔻酰化，并抑制病毒产生。有很强的控制力。