ヒト白血病ウィルスを用いた遺伝子の発現制御とATL発症機構の研究

利用人白血病病毒进行基因表达调控和ATL发病机制研究

基本信息

批准号：
02262206
负责人：
吉田光昭
金额：
$ 16万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒトがんの診断治療あるいは予防対策を考えるには,ヒトがんの発症メカニズムについての直接的研究は重要である。この観点からATLの原因ウィルスであるヒト白血病ウィルス(HTLVー1)について研究を進めた。HTLVー1はpX領域に少なくとも2つの調節遺伝子,taxとrexを持ち,自らの増殖を調節している。taxは転写活性化因子でウィルスのプロモ-タ-の他にILー2RαやPTHrPなどの細胞遺伝子の発現も活性化する。しかしこれらのプロモ-タ-の活性化には異なる転写因子が関与することが昨年度までの研究で予想された。今年度は,ウィルスプロモ-タ-の活性化に必要な21塩基エンハンサ-に結合する細胞蛋白(TREB)3種について検討し,次のことを明らかにした。(1)TREBー5,ー7,ー36共にロイシンジッパ-構造を持ち,2量体を形成して21塩基エンハンサ-に結合する。(2)いずれもmRNAレベルでは多くの細胞株に発現しており,細胞特異性はない。(3)TREBー5はLTRーCATの発現をエンハンサ-特異的に活性化したが,TREBー7とー36は全く効果を示さなかった。(4)TREBー36は別の細胞系ではエンハンサ-非特異的に遺伝子発現を阻害した。このようなことから,TREB蛋白は細胞特異的に活性化・抑制と両方の効果を与え得る転写因子であると結論された。この転写因子とtax蛋白の相互作用について目下検討中である。また,tax蛋白の作用様式を検討する目的でGAL4DNA結合部位との融合蛋白を作成したところ,融合蛋白はDNA結合部位に依存して遺伝子発現を活性化した。したがってtax蛋白はTREBのようなDNA結合蛋白を介して間接的にDNAに会合して,初めて転写の活性化を行うことが確からしくなった。他方,pX遺伝子の1つであるrexの機能について検討し,rexは非スプライス型RNAの核輸送のみではなく,核内においてスプライシングに先立つプロセスに作用する知見を得た。これをHIVのrevと対比して検討している。

对人类癌症发展机制的直接研究对于考虑人类癌症的诊断治疗和预防措施非常重要。从这个角度来看，我们对ATL的致病病毒人类白血病病毒（HTLV-1）进行了研究。 HTLV-1在其pX区域至少有两个调节基因tax和rex，调节其增殖。 Tax 是一种转录激活剂，除了病毒启动子之外，还可以激活 IL-2Rα 和 PTHrP 等细胞基因的表达。然而，去年的研究预测不同的转录因子参与这些启动子的激活。今年，我们研究了三种类型的细胞蛋白（TREB），它们与病毒启动子激活所需的21个碱基增强子结合，并阐明了以下内容。 (1)TREB-5、-7和-36均具有亮氨酸拉链结构，形成二聚体，并与21碱基增强子结合。 (2) 两者均在许多细胞系中以 mRNA 水平表达，且不具有细胞特异性。 (3)TREB-5以增强子特异性方式激活LTR-CAT表达，但TREB-7和-36完全没有作用。 (4)TREB-36在其他细胞系中以非增强子特异性方式抑制基因表达。基于这些发现，得出结论：TREB蛋白是一种转录因子，可以以细胞特异性方式同时具有激活和抑制作用。我们目前正在研究这种转录因子和tax蛋白之间的相互作用。此外，为了研究tax蛋白的作用模式，我们创建了具有GAL4 DNA结合位点的融合蛋白，并发现该融合蛋白根据DNA结合位点激活基因表达。因此，tax 蛋白似乎只有在通过 DNA 结合蛋白（如 TREB）与 DNA 间接结合后才会激活转录。另一方面，我们研究了pX基因之一的rex的功能，发现rex不仅作用于未剪接RNA的核运输，还作用于细胞核内剪接之前的过程。这是与 HIV rev 进行比较。