遺伝子操作によるコメタンパク質の消化性及び栄養価の改良

通过基因工程提高大米蛋白质的消化率和营养价值

基本信息

批准号：
01636512
负责人：
田中國介
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Kyoto Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

コメタンパク質の消化性及び栄養価の改良を遺伝子操作を用いて行なうための基礎知見を得ることを目的として調査研究を行なった。既に調製済みの登熟期コメ胚乳中に出現するmRNAに対するλgtllを用いるcDNAライブラリ-からコメ胚乳中に集積するタンパク質のcDNAを同定する作業を行なった。その結果、これまでに、グルテリン前々駆体59KDa2個、α-グロブリン(26KDa)1個、コメアレルゲン(16KDa)1個、13KDaAプロラミン2個、13KDaBプロラミン2個、10KDaプロラミン1個、計9個のcDNA構造の解析を終了した。またコメグルテリン、13KDaA、Bプロラミン、10KDaプロラミンの各遺伝子の単離にも成功した。これまでに解析の終了したcDNA構造から翻訳された前駆体ポリペプチドのシグナル配列を整理した結果、コメ貯蔵タンパク質の集積するプロテインボディの形態と、そこへ集積するタンパク質前駆体のシグナル配列に相関性があることが判明した。即ちコメプロテインボディの1つであるPB-Iへは同一あるいは非常に類似したシグナル配列を持つポリペプチドのみが集積していることが明らかとなった。そこでコメプロテインボディI(PB-I)に特異的に集積する10KDaプロラミン前駆体のシグナル配列を牛αS_1カゼインの成熟配列のN末端に持つようなキメラタンパク質を生合成させ、その生合成系にPB-Iタイプのトウモロコシプロテインボディを共存させることで、トウモロコシプロテインボディに牛αS_1カゼインを集積させることが出来た。

进行研究的目的是获得利用基因操作提高大米蛋白质的消化率和营养价值的基础知识。我们使用λgtll来鉴定在已经制备的成熟水稻胚乳中出现的mRNA的cDNA文库中积累在水稻胚乳中的蛋白质的cDNA。结果，到目前为止，我们总共发现了9个59KDa谷蛋白前体、1个α-球蛋白（26KDa）、1个大米过敏原（16KDa）、2个13KDaA谷醇溶蛋白、2个13KDaB谷醇溶蛋白和1个10KDa谷醇溶蛋白，我们已经完成了分析。的 cDNA 结构.我们还成功分离出水稻谷蛋白、13KDaA、B 谷醇溶蛋白和10KDa 谷醇溶蛋白的基因。对迄今为止分析的cDNA结构翻译的前体多肽的信号序列进行整理，结果表明，稻米贮藏蛋白蓄积的蛋白体的形态与蓄积于其中的蛋白质前体的信号序列之间存在相关性。事实证明确实有。换句话说，表明只有具有相同或非常相似的信号序列的多肽才会在水稻蛋白体之一的PB-I中积累。因此，我们生物合成了一种嵌合蛋白，该蛋白具有特异积累在牛αS_1酪蛋白成熟序列N端的大米蛋白体I（PB-I）中的10KDa谷醇溶蛋白前体的信号序列，并将PB添加到生物合成中通过与-I型玉米蛋白体共存，可以在玉米蛋白体中积累牛αS_1酪蛋白。